一种代谢工程改造大肠杆菌产圣草酚的方法

摘要

本发明公开了一种代谢工程改造大肠杆菌产圣草酚的方法，属于代谢工程领域。本发明通过基因工程技术，在大肠杆菌中将截去膜结合序列的黄酮3’羟化酶基因tF3’H和P450还原酶基因tCPR两个基因融合表达，成功实现了柚皮素转化圣草酚的步骤。同时表达来自R.glutinis的酪氨酸解氨酶基因TAL，P.crispum的4‑香豆酸：辅酶A连接酶基因4CL，P.hybrida的査尔酮合成酶基因CHS和M.sativa的查尔酮异构酶基因CHI实现由酪氨酸直接生产柚皮素，从而构建得到由酪氨酸直接生产圣草酚的工程菌株。为进一步提高圣草酚产量，本发明敲除了大肠杆菌基因组中的乙酸激酶ackA基因，并过量表达乙酰辅酶A合成酶基因acs和乙酰辅酶A羧化酶基因ACC，最终圣草酚的产量可达106.7mg/L。