一种hhdA基因缺失的无抗性标记的副猪嗜血杆菌工程菌株及其构建方法

摘要

本发明公开了一种hhdA基因缺失的无抗性标记的副猪嗜血杆菌菌株及其构建方法。利用重叠PCR技术将HPS野生型菌株hhdA基因上下游序列进行连接，构建到自杀性质粒载体（PEMOC2ΔhhdA）并转入到E.β2155菌株中，通过结合转移的方法将PEMOC2ΔhhdA转入到HPS野生型菌株中筛选出发生单交换的阳性结合子菌株，经有限稀释连续培养，筛选hhdA基因缺失的无抗性标记的HPS菌株HPSΔhhdA。本发明构建的HPSΔhhdA菌株生长特性和免疫保护原性与亲本菌株相似，并且免疫HPSΔhhdA菌株后动物不产生抗hhdA蛋白抗体，可用其作为疫苗用菌株在副猪嗜血杆菌病防控和检测中区别野生型菌株。