可溶性SARS病毒3CL蛋白酶的表达和纯化

摘要

本发明提供可在宿主细胞中表达可溶性SARS病毒3CL蛋白酶的表达质粒pQE30-SARS-3CL，菌种保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏日2003年5月30日，保藏号CCTCC No.M203048。还提供在宿主细胞中表达可溶性SARS病毒3CL蛋白酶的方法，包括：采用PCR技术从SARS病毒cDNA文库中获得SARS病毒3CL蛋白酶DNA片段(TRO2)；用pQE30载体构建SARS病毒3CL蛋白酶表达质粒pQE30-SARS-3CL；和将pQE30-SARS-3CL质粒转化于宿主细胞中，并在宿主细胞中表达。可溶性SARS病毒3CL蛋白酶表达产物的纯化方法，包括将细胞裂解液透析、NTA-Ni柱层析和分子筛纯化。本发明的方法操作简单、得到的蛋白纯度高。