生物标记的双分子定点生物素化重组碱性磷酸酶

摘要

本发明公开了一种生物标记的双分子定点生物素化重组碱性磷酸酶，是在碱性磷酸酶的氨基端、羧基端分别以生物方式各连接一个生物素分子构建而成，该重组生物素标记酶一经产生即为双分子生物素定点标记的重组碱性磷酸酶，其酶学活性不受标记因素影响。构建方法为：首先，构建具有两个可生物素化序列及蛋白质连接柔性Linker的中间载体，然后利用PCR技术将碱性磷酸酶基因克隆至两个可生物素化序列的中间，细菌表达体系表达获得重组碱性磷酸酶。本发明的重组碱性磷酸酶，在BAS体系的酶免疫分析中可与链霉亲和素或亲和素形成网状的放大结构，可有效提高BAS酶免疫分析的灵敏度与特异性，以及可减少标记酶的用量，降低检测成本。