测定药物最低抑菌浓度的方法

摘要

本发明公开一种能够快速、简便、定量检测最低抑菌浓度的方法，包括以下步骤：按照CLSI标准(2010版)将一定浓度的新鲜肠球菌悬液，加入到含有浓度梯度抗菌药物的无菌96孔板中共孵育；4h孵育结束后，向各孔加入一定量的荧光染料SYTOX Green和DAPI，室温避光15min，利用荧光酶标仪分别读取各孔两种染料的荧光强度，记为FSYTOX Green和FDAPI；扣除相应本底荧光后，绘制细菌荧光强度比(Pdead/livel)与药物浓度(CDrug)的对应曲线，当Pdead/live不再波动时所对应的最低药物浓度(CDrug)即为该抗生素对该细菌的MIC。[Pdead/live＝FSYTOX Green/FDAPI]。本发明的检测方法具有简便、快速、客观，能对所测数据直接进行数学统计与分析等特点，为测定抗菌药物的最低抑菌浓度提供了新的检测方法，具有广阔的应用前景。