减少冠心病患者心绞痛改善抑郁程度的组合物及制剂

摘要

本发明属于中医药技术领域，公开了一种减少冠心病患者心绞痛改善抑郁程度的组合物，减少冠心病患者心绞痛改善抑郁程度的组合物按照质量数计，由酸枣仁45g、百合30g、川芎15g、丹参30g、茯苓30g、知母15g、生龙骨30g、生牡蛎30g、土鳖虫10g、水蛭5g、柴胡20g、黄芩15g、姜半夏20g、夏枯草20g组成。本发明提供的双心方加减治疗能够减少冠心病心绞痛合并抑郁状态患者的心绞痛发作次数，改善抑郁程度；双心方能够减少心肌梗死大鼠的梗死面积，提高心功能，改善心肌梗死后抑郁；双心方能够降低心肌梗死大鼠外周血NF‑κB和TNF‑α浓度，改善心肌梗死后的炎症反应，治疗心肌梗死后抑郁。

说明书

技术领域

本发明属于中医药技术领域，尤其涉及一种减少冠心病患者心绞痛改善抑郁程度的组合物。

背景技术

心肌梗死起病急骤，症状剧烈，病情凶险。由于其突发性和高风险性，心肌梗死可作为一种重大的应激事件，导致患者出现剧烈的生理及心理上的双重应激反应，引发心肌梗死后抑郁。世界卫生组织(World Health Organization,WHO)公布的最新流行病学数据显示，抑郁在心肌梗死患者中的发病率为29％～40％。抑郁可发生在心肌梗死的不同阶段。心肌梗死患者在住院期间、出院后3个月、出院后12个月，抑郁的发病率分别为34.1％、30.8％和30％。抑郁是心肌梗死患者预后不佳的独立危险因素。心肌梗死后抑郁与全因死亡(OR:2.25)、心源性死亡(OR:2.71)和心脏事件(OR:1.59)风险增加均显著相关。目前治疗多采用心血管药物联合抗抑郁的非药物疗法(心理治疗等)或药物疗法(选择性5-羟色胺再摄取抑制剂等)，然而存在撤药困难、加重心肌缺血、恶化心血管疾病预后等限制。深入探索心肌梗死后抑郁安全有效的治疗方式迫在眉睫。

目前，中医“双心学说”，即“血脉之心”和“神明之心”双心一体，生理相依，病理互损，双心为病。在中医“双心医学”的指导下，应将“血脉之疾”和“神明之病”视为一体，作为心脏疾患的两个方面，根据其共同的病理因素进行辨证论治，即“双心同治”，其中以“双心方”为代表。

《黄帝内经》最早提出了“心主血脉”与“心主神明”的双心理论。“心主身之血脉”“诸血者皆属于心”即“血脉之心”，指心主血脉的生理功能，心气推动和调节血液循行于脉中，周流全身发挥营养和滋润作用。心主血脉失司，则可导致心脉痹阻，发为胸痹。“心者，君主之官，神明出焉”“心者，五脏六腑之大主，精神之所舍也，其脏坚固，邪弗能容也，容之则伤心，心伤则神去，神去则死矣”“心者，生之本，神之变也”即“神明之心”，指心主神明的生理功能，心具有主持精神意识思维活动的作用。心主神明功能失司，则易致情志内伤，发为郁病。

“心藏脉，脉舍神。”“血气者，人之神”。由此可知，“心主血脉”是“心主神明”的物质基础，“心主神明”又为“心主血脉”提供重要保障，两者生理相依，病理互损。正如《灵枢·平人绝谷》所言：“血脉和利，精神乃居。”心主血脉，心血充沛则心脉通利，心有所养。心主神明，心气充足则心神清明，神有所依。

心肌梗死归属“真心痛”，抑郁归属“郁病”，心肌梗死后抑郁的中医核心病机为“瘀热虚滞”。“瘀”，即瘀阻心脉。真心痛多因心主血脉失调，心脉瘀阻而猝发。瘀血是“真心痛”继发“郁病”的始动因素，瘀血内积，血凝不流，壅塞不通，更助凝涩之势。“热”，即壅瘀生热。心脉瘀血内积不消，遵“凡气有余便是火”之意，壅瘀生热；心在五行属火，被称人身之“日”，可促内热亢盛，最终瘀热互结于心脉。“虚”，即暗耗而虚。瘀血不去，新血不生，瘀热搏结，暗耗阴血，故心血亏虚，脉道失充。“滞”，即虚而留滞。“至虚之处，便是留邪之地”，心脉亏虚，无虚不成积，内生瘀血加重，则心脉因虚而留滞。此即“瘀热虚滞”，双心为病。

由上可知，“瘀”“热”损于血脉之心，心失所养，无力泵血，则心功能无以恢复。“虚”“滞”损于神明之心，心神失充，则情绪低落，兴趣缺乏，发为郁病。“双心学说”将“血脉之疾”和“神明之病”视为一体，“血脉之心”和“神明之心”双心一体，生理相依，病理互损；运用“祛瘀法”治“血脉之心”，“调神法”治“神明之心”，将心肌梗死和抑郁作为一个整体来研究其发病规律及证候特征(见图1)。

中医认为药材的功用各有所长亦各有所偏，如一味地重用某单味药不但难以达到预期效果，甚至难以避免不良反应，因此中药的科学合理配伍很重要。

通过上述分析，现有技术存在的问题及缺陷为：目前针对冠心病合并抑郁的治疗，多采用冠心病二级预防联合抗抑郁治疗药物或非药物疗法。然后非药物疗法具有临床效果不确切、患者依从性差、疗效难以准确评估等确定，药物疗法存在撤药困难、加重心肌缺血、恶化心血管疾病预后等限制，使该病的治疗陷入临床困境。而中医方面目前缺乏专方专药，因此亟需从中医角度提出治疗冠心病合并抑郁的药物。

发明内容

针对现有技术存在的问题，本发明提供了一种减少冠心病患者心绞痛改善抑郁程度的组合物。

本发明是这样实现的，一种缓解冠心病合并抑郁患者心绞痛和抑郁程度的组合物，所述减少冠心病患者心绞痛改善抑郁程度的组合物包括丹参、百合、川芎、酸枣仁。

进一步，作为优选，所述减少冠心病患者心绞痛改善抑郁程度(缓解冠心病合并抑郁患者心绞痛和抑郁程度)的组合物按照质量数计，由酸枣仁45g、百合30g、川芎15g、丹参30g、茯苓30g、知母15g、生龙骨30g、生牡蛎30g、土鳖虫10g、水蛭5g、柴胡20g、黄芩15g、姜半夏20g、夏枯草20g组成。

进一步，作为优选，所述减少冠心病患者心绞痛改善抑郁程度的组合物按照质量数计，由酸枣仁30g、百合30g、川芎15g、丹参15g组成

进一步，所述减少冠心病患者心绞痛改善抑郁程度(缓解冠心病合并抑郁患者心绞痛和抑郁程度)的组合物为14付颗粒。

本发明的另一目的在于提供一种实施所述的减少冠心病患者心绞痛改善抑郁程度的组合物的使用方法，所述减少冠心病患者心绞痛改善抑郁程度的组合物使用方法为：

日1剂，分两次冲服。

进一步，所述减少冠心病患者心绞痛改善抑郁程度的组合物(缓解冠心病合并抑郁患者心绞痛和抑郁程度的组合物)通过降低心肌梗死大鼠外周血NF-κB和TNF-α浓度，改善心肌梗死后的炎症反应。

进一步，所述减少冠心病患者心绞痛改善抑郁程度的组合物(缓解冠心病合并抑郁患者心绞痛和抑郁程度的组合物)通过改善大脑海马区抑郁相关神经递质基因及蛋白的变化，改善心肌梗死后大鼠抑郁样行为。

进一步，所述减少冠心病患者心绞痛改善抑郁程度的组合物(缓解冠心病合并抑郁患者心绞痛和抑郁程度的组合物)在体内外促进心肌梗死大鼠骨髓间充质干细胞动员及归巢；通过调控心肌梗死后抑郁大鼠S100A9表达及小胶质细胞活化，提高心功能，改善心肌梗死后抑郁。

进一步，所述减少冠心病患者心绞痛改善抑郁程度的组合物(缓解冠心病合并抑郁患者心绞痛和抑郁程度的组合物)通过调控PI3K/AKT信号通路，发挥抗心肌细胞凋亡和抗海马神经元凋亡作用，治疗心肌梗死后抑郁；通过多靶点、多通路发挥治疗心肌梗死后抑郁。

结合上述的技术方案和解决的技术问题，请从以下几方面分析本发明所要保护的技术方案所具备的优点及积极效果为：

本发明提供的组合物由丹参、百合、川芎、酸枣仁四味药物组成，通过方药组合配伍达到“双心同治”。本发明前期分别从临床分析、实验分析、数据挖掘等方面证明了双心方在冠心病合并抑郁状态治疗中的作用，并经网络药理学优化，验证了双心方改善炎症反应等机制。

本发明提供的双心方加减治疗能够减少冠心病心绞痛合并抑郁状态患者的心绞痛发作次数，改善抑郁程度；能够减少心肌梗死大鼠的梗死面积，提高心功能，改善心肌梗死后抑郁；双心方能够降低心肌梗死大鼠外周血NF-κB和TNF-α浓度，改善心肌梗死后的炎症反应；双心方能够改善大脑海马区抑郁相关神经递质基因及蛋白的变化，改善心肌梗死后大鼠抑郁样行为；双心方在体内外能够促进心肌梗死大鼠骨髓间充质干细胞动员及归巢；双心方可能通过调控心肌梗死后抑郁大鼠S100A9表达及小胶质细胞活化，提高心功能，改善心肌梗死后抑郁；双心方可能是通过调控PI3K/AKT信号通路，发挥抗心肌细胞凋亡和抗海马神经元凋亡作用，治疗心肌梗死后抑郁；双心方可通过多靶点、多通路来发挥治疗心肌梗死后抑郁(网络药理学)。

本方面为冠心病合并抑郁的治疗提供了专方专药，且该方药来源可靠，研究基础丰厚，行之有效。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对本发明实施例中所需要使用的附图做简单的介绍，显而易见地，下面所描述的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1是本发明实施例提供的中医“双心学说”指导下的双心方示意图；

图2是本发明实施例提供的心肌梗死后3、7、14天大鼠心脏组织对比(HE和masson染色)示意图；sham组：假手术大鼠；model组：心肌梗死大鼠，MI+PCF：心肌梗死+双心方干预组；

图3是本发明实施实施例提供的心肌梗死后3、7、14天大鼠心脏超声结果示意图；sham组：假手术大鼠；model组：心肌梗死大鼠，MI+PCF：心肌梗死+双心方干预组；

图4是本发明实施例提供的心肌梗死后第3、7、14天外周血NF-κB和TNF-α浓度(ELISA试验)示意图；sham组：假手术大鼠；model组：心肌梗死大鼠；MI+PCF：心肌梗死+双心方干预组；

图5是本发明实施例提供的双心方可改善心肌梗死大鼠大脑海马区抑郁相关GAD含量(免疫组化)示意图；sham组：假手术大鼠；model组：心肌梗死大鼠；MI+PCF：心肌梗死+双心方干预组；

图6是本发明实施例提供的双心方可改善心肌梗死大鼠大脑海马区抑郁相关神经递质mRNA的变化(QPCR)示意图；sham组：假手术大鼠；model组：心肌梗死大鼠；MI+PCF：心肌梗死+双心方干预组；

图7本发明实施例提供的双心方对大鼠海马组织病理变化的影响示意图；

图8是本发明实施例提供的双心方可改善心肌梗死大鼠抑郁样行为示意图；sham组：假手术大鼠；model组：心肌梗死大鼠；MI+PCF：心肌梗死+双心方干预组；OFT：旷野试验；FST：强迫游泳；

图9是本发明实施例提供的双心方促进心肌梗死大鼠骨髓间充质干细胞动员及归巢(流式细胞术)示意图；sham组：假手术大鼠；model组：心肌梗死大鼠；MI+PCF：心肌梗死+双心方干预组；

图10是本发明实施例提供的双心方在体外可促进骨髓间充质干细胞迁移(Transwell试验，100×)示意图；control组：BM-MSCS+完全培养基；PCF(双心方)组：BM-MSCS+双心方处理24h；

图11是本发明实施例提供的SA1009在心肌、脑组织中的表达结果示意图；

图12是本发明实施例提供的双心方可能是调控海马PI3K/AKT信号通路；

图13是本发明实施例提供的双心方可能是调控心脏PI3K/AKT信号通路；

图14是本发明实施例提供的双心方与心肌梗死、抑郁的药物交集靶点图；

图15是本发明实施例提供的双心方通过多条通路影响心心肌梗死后抑郁图；

图16是本发明实施例提供的双心方颗粒总离子流图；图16A.负离子模式；图16B.正离子模式。

图17是本发明实施例提供的双心方所含142种化合物的分类

具体实施方式

为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。

本发明实施例提供的组合物由丹参、百合、川芎、酸枣仁四味药物组成，为本发明自拟方，通过方药组合配伍达到“双心同治”。《神农本草经》言丹参“味苦，微寒”、“主心腹邪气……破癥除瘕”，该方以丹参活血化瘀，宁心安神为君药。《本草纲目》言酸枣仁“熟用疗胆虚不得眠”，酸枣仁为养血调神之要药，可作臣用。故方用百合养心阴，清心热，配伍丹参清心热，又助酸枣仁养阴血，俾阴充则神藏，当作佐药。《本草纲目》言川芎为“血中气药”，本方选川芎为使药，可增强祛瘀之效，兼可行气以助血脉畅通，全方药味精炼，选药精准，药效集中，共收活血清心，养血调神之效。

针对现有技术存在的问题，本发明提供了一种减少冠心病患者心绞痛改善抑郁程度的组合物，下面结合附图对本发明作详细的描述。

为了使本领域技术人员充分了解本发明如何具体实现，该部分是对权利要求技术方案进行展开说明的解释说明实施例。

双心方为“双心学说”理论指导的代表方，该方由丹参、百合、川芎、酸枣仁四味药物组成，为本发明自拟方，通过方药组合配伍达到“双心同治”。《神农本草经》言丹参“味苦，微寒”、“主心腹邪气……破癥除瘕”，该方以丹参活血化瘀，宁心安神为君药。《本草纲目》言酸枣仁“熟用疗胆虚不得眠”，酸枣仁为养血调神之要药，可作臣用。故方用百合养心阴，清心热，配伍丹参清心热，又助酸枣仁养阴血，俾阴充则神藏，当作佐药。《本草纲目》言川芎为“血中气药”，本方选川芎为使药，可增强祛瘀之效，兼可行气以助血脉畅通，全方药味精炼，选药精准，药效集中，共收活血清心，养血调神之效。应用数据挖掘软件中医传承辅助平台V2.5(中国中医研究院中药研究所研发)，得出治疗心肌梗死后抑郁的常用药物，双心方药物在其中占据关键地位，如图2所示。

本发明实施例提供的减少冠心病患者心绞痛改善抑郁程度的组合物由丹参、百合、川芎、酸枣仁四味药物组成。

作为优选，本发明实施例提供的减少冠心病患者心绞痛改善抑郁程度的组合物按照质量数计，由酸枣仁45g、百合30g、川芎15g、丹参30g、茯苓30g、知母15g、生龙骨30g、生牡蛎30g、土鳖虫10g、水蛭5g、柴胡20g、黄芩15g、姜半夏20g、夏枯草20g组成。

作为优选，本发明实施例提供的减少冠心病患者心绞痛改善抑郁程度的组合物按照质量数计，由酸枣仁30g、百合30g、川芎15g、丹参15g组成。

本发明实施例提供的减少冠心病患者心绞痛改善抑郁程度的组合物为14付颗粒。

本发明实施例提供的减少冠心病患者心绞痛改善抑郁程度的组合物通过降低心肌梗死大鼠外周血NF-κB和TNF-α浓度，改善心肌梗死后的炎症反应。

本发明实施例提供的减少冠心病患者心绞痛改善抑郁程度的组合物通过改善大脑海马区抑郁相关神经递质基因及蛋白的变化，改善心肌梗死后大鼠抑郁样行为。

本发明实施例提供的减少冠心病患者心绞痛改善抑郁程度的组合物在体内外促进心肌梗死大鼠骨髓间充质干细胞动员及归巢；通过调控心肌梗死后抑郁大鼠S100A9表达及小胶质细胞活化，提高心功能，改善心肌梗死后抑郁。

本发明实施例提供的减少冠心病患者心绞痛改善抑郁程度的组合物通过调控PI3K/AKT信号通路，发挥抗心肌细胞凋亡和抗海马神经元凋亡作用，治疗心肌梗死后抑郁；通过多靶点、多通路发挥治疗心肌梗死后抑郁。

本发明实施例提供的减少冠心病患者心绞痛改善抑郁程度的组合物使用方法为：日1剂，分两次冲服。

为了证明本发明的技术方案的创造性和技术价值，该部分是对权利要求技术方案进行具体产品上或相关技术上的应用实施例。

本发明实施例在研发或者使用过程中取得了一些积极效果，和现有技术相比的确具备很大的优势，下面内容结合试验过程的数据、图表等进行描述。

一、双心方的临床分析

1.双心方加减治疗能够减少冠心病心绞痛合并抑郁状态患者的心绞痛发作次数，改善抑郁程度(见表1～表2)。

表1两组冠心病心绞痛合并抑郁状态息者治疗前后心绞痛发作次数及持续时间比较

注：与本组治疗0周比较，*P＜0.05；与对照组治疗后同期比较，ΔP＜0.05

表2两组冠心病心绞痛合并抑郁状态患者治疗前后抑郁自评量表评分比较(

注：与本组治疗0周比较，*P＜0.05；与对照组治疗后同期比较.ΔP＜0.05

2.双心方的经典病例分析

病例1：患者某，男，66岁，2021年7月6日初诊。主诉：胸闷憋气3个月。患者3个月前因胸闷于外院行冠脉造影，提示单根血管狭窄70％，诊断“冠心病”，规律服用冠心病二级预防药物。刻下症见：间断于安静时发胸闷憋气，持续几分钟，活动后可减轻，夜间偶有心悸，疲倦乏力，怕热，喜汗出，易感冒，口苦不干，喜饮水，偶有反酸烧心，双下肢发凉发沉，平素性急易怒，情绪不佳，易担心紧张，纳一般，食欲不佳，眠差，入睡困难，眠浅易醒，再难入睡，小便黄，大便干。舌红淡胖边有齿痕，苔白，脉缓。中医诊断：胸痹、郁证、血脉瘀阻、心神失养证；西医诊断：冠心病、失眠。处方：酸枣仁45g、百合30g、川芎15g、丹参30g、茯苓30g、知母15g、生龙骨30g、生牡蛎30g、土鳖虫10g、水蛭5g、柴胡20g、黄芩15g、姜半夏20g、夏枯草20g，14付颗粒，日1剂，分两次冲服。

二诊：近期无明显胸闷憋气，疲倦乏力减轻，仍眠差，入睡困难，服半片佐匹克隆可睡3～4h，怕热，动则汗出，上半身尤甚，情绪较前平稳。纳可，大便偏黏，小便浅黄。舌红淡胖边有齿痕，苔白，脉缓。处方：初诊方加生石膏30g，28付颗粒，日1剂，分两次冲服。

三诊：诸症好转，已无胸闷憋气、疲倦乏力，睡眠时间延长，纳眠可，二便调。舌红苔白脉沉。继服二诊方28付巩固疗效。

按语：该患者既往冠心病诊断明确，此次主因胸闷憋气就诊，平素情绪起伏大，伴失眠、便干，四诊合参，胸痹、郁证诊断明确。心主血脉亦主神明，心气不畅则血行艰涩，瘀血内生于脉中，阻滞心脉则生胸闷憋气；心以血养之，脉中瘀血生而“活”血少，血不足心失养则心神不安，发为郁证。故治宜活血化瘀，养血安神，以双心方为主方，川芎与丹参相合行气活血以通瘀血，活血之余加养肝血之酸枣仁、养心血之百合以濡养心神。该患者平素情绪不畅、失眠日久，气郁重而瘀血难消，加土鳖虫、水蛭以破血逐瘀。夜寐不宁、思虑生气可加重血脉瘀滞，心血耗损，胸闷憋气、焦虑抑郁等症也会随之加重，故化瘀同时安神安眠方能事半功倍，以生龙骨、生牡蛎重镇安神，柴胡与黄芩、半夏与夏枯草一升一降调气机助安眠。

病例2：患者某，女，63岁，2021年7月16日初诊。主诉：间断胸痛1个月，加重2天。患者近一个月来间断于活动后出现轻度左侧胸痛，持续时间6～10分钟，服硝酸甘油可缓解。近2天发作频率较前增加，于我院心内科行冠脉造影，提示左前降支狭窄50％，诊断“冠心病”。刻下症见：间断胸痛胸闷，头晕，时胸胁胀满，心烦急躁，情绪不佳，纳一般，食欲欠佳，眠差，多梦，小便黄量少，大便调。舌紫暗苔白腻，脉涩。PHQ-9评分9分。中医诊断：胸痹脏躁血脉瘀阻、心神失养证；西医诊断：冠心病。

处方：酸枣仁30g、百合30g、川芎15g、丹参15g，14付颗粒，日1剂，分两次冲服。

二诊：间断轻度胸痛，胸闷心烦明显缓解，无头晕、胸胁胀满，情绪转佳，睡眠较前改善，纳可，二便调。PHQ-9评分3分。继服前方巩固疗效。

按语：该患者主因反复胸痛胸闷1个月就诊，兼有头晕、胁肋胀、心烦焦躁、眠差、食欲不振等脏躁表现，属于双心疾病范畴。七情内伤致机体气机失调，气行失常则血行不畅，久则渐生瘀血痹阻于血脉、心胸，引发胸痹心痛之症。气滞血瘀日久一则致脉道无血以供养神明之主，心神不安则夜寐不宁、情志反常，一则易伤阴津生内热使血虚更甚且易生躁生怒。当施以双心方活血化瘀，养血安神，其中丹参祛瘀活血、宁心安神为君药，百合养心安神除烦为臣药，二者合用可清心祛瘀。气行则血行，以素有“血中气药”之称的川芎活血行气为佐，可增强祛瘀之效；《本草纲目》言酸枣仁“熟用疗胆虚不得眠”，另加酸枣仁养心安神助眠为使药，一助祛瘀一助安神可使祛瘀养心之力专而效彰，同时丹参、百合之寒与川芎、酸枣仁之温可相互制约祛邪而不伤正。

二、双心方的基础分析

1.双心方能够减少心肌梗死大鼠的梗死面积，提高心功能，改善心肌梗死后抑郁(见图3)。

2.双心方能够降低心肌梗死大鼠外周血NF-κB和TNF-α浓度，改善心肌梗死后的炎症反应(见图4)。

3.双心方能够改善大脑海马区抑郁相关神经递质基因及蛋白的变化，改善心肌梗死后大鼠抑郁样行为(见图5～7)。

4.双心方在体内外能够促进心肌梗死大鼠骨髓间充质干细胞动员及归巢(见图8～9)

5.双心方可能通过调控心肌梗死后抑郁大鼠S100A9表达及小胶质细胞活化，提高心功能，改善心肌梗死后抑郁(见图10～11)。

6.双心方可能是通过调控PI3K/AKT信号通路，发挥抗心肌细胞凋亡和抗海马神经元凋亡作用，治疗心肌梗死后抑郁(见图12～14)。

7.双心方可通过多靶点、多通路来发挥治疗心肌梗死后抑郁(网络药理学)(见图15)。

本发明实施例提供的减轻心绞痛和抑郁程度的组合物由丹参、川芎、百合、酸枣仁组成。这种组合物为本发明自拟方，通过方药组合配伍达到“双心同治”。《神农本草经》言丹参“味苦，微寒”、“主心腹邪气……破癥除瘕”，该方以丹参活血化瘀，宁心安神为君药。《本草纲目》言酸枣仁“熟用疗胆虚不得眠”，酸枣仁为养血调神之要药，可作臣用。故方用百合养心阴，清心热，配伍丹参清心热，又助酸枣仁养阴血，俾阴充则神藏，当作佐药。《本草纲目》言川芎为“血中气药”，本方选川芎为使药，可增强祛瘀之效，兼可行气以助血脉畅通，全方药味精炼，选药精准，药效集中，共收活血清心，养血调神之效。

通过超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱技术(UPLC-Q-ExactiveOrbitrap MS/MS)对该组合物的所含成分及入血移行成分进行定性、定量分析。设置色谱条件：AQUITYUPLC C18色谱柱(2.1mm×100mm，1.7μm)；流动相0.1％甲酸水溶液(A)-乙腈溶液(B)，梯度洗脱(0-3min，0％B；3-45min，0％-75％B；45-45.1min，75％-0％B；45.1-50min，0％B)；流速0.3ml/min；进样量3μl；柱温35℃。设置质谱条件：正离子的检出模式，加热电喷雾离子源(H-ESI)，离子源温度320℃，电离源电压3kV，毛细管电压35V，管透镜电压110V；鞘气和辅助气为99.99％的高纯氮气，流速分别为35，10arb。负离子的检出模式，H-ESI离子源，离子源温度320℃，电离源电压3.5kV，毛细管电压35V，管透镜电压110V；鞘气和辅助气99.99％的高纯氮气，其流速分别为35，10arb。使用Q Exactive plus高分辨质谱Full MS/dd-MS2(data-dependent MS2)全扫方式采集正离子及负离子数据。采用QualBroswer ofXcalibur 4.1(Thermo Fishier Scientific)软件收集高分辨数据。通过CompoundDiscoverer 3.0软件的中药成分数据库(TCM Database)对正离子模式、负离子模式化合物进行搜库，找到中药类化合物。然后根据目标化合物的相对分子量、同位素峰等信息判断化合物的元素组成，参数误差设置为10ppm。查阅文献中相关化合物的碎裂信息，对其进行结构分析，并根据碎片裂解信息推测并鉴定该组合物的组成化合物。在负离子模式下，该组合物共鉴定出91个化学成分(图16A，表1)；在正离子模式下，共鉴定出92个化学成分(图16B，表2)。去掉正负例离子模式下的重复成分后，总离子模式下共鉴定出142个化学成分，其中74个来自丹参，40个来自川芎，14个来自酸枣仁，18个来自百合。)。

如图16所示，双心方颗粒总离子流图。图16A.负离子模式；图16B.正离子模式。

将该组合物的142个化合物进行分类，其中包括二萜类化合物35个，酚酸类化合物24个，黄酮类化合物14个，内酯类化合物9个，生物碱类化合物8个，苯酞类化合物8个，酚酸甘油酯类化合物6个，烷烃类化合物5个，糖苷类化合物4个，有机酸类化合物4个，香豆素类化合物3个，皂苷类化合物3个，酚类化合物2个，呋喃类化合物2个，苯丙烯类化合物1个，吡嗪类化合物1个，单萜类化合物1个，多糖类化合物1个，肼类化合物1个，醌类化合物1个，醛类化合物1个，其他8个，见图17所示.双心方所含142种化合物的分类。

体内研究中共鉴定出7种入血移行成份(表3，图3)，其中2个化合物进入正常血浆中，经鉴定为丹参醌新酮Ⅰ、新隐丹参酮；7个化合物进入造模血浆，分别为丹参醌新酮Ⅰ、新隐丹参酮、丹参新醌甲、阿魏酸、苯戊酮、香草酸、洋川芎内酯D。

表3该组合物入血成分

以上所述，仅为本发明的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，都应涵盖在本发明的保护范围之内。