一种基于Tn558转座子构建的能表达荧光的自杀型质粒、构建方法及应用

摘要

本发明属于基因工程技术领域，具体公开了一种基于Tn558转座子构建的能表达荧光的自杀型质粒、构建方法及应用。该自杀型质粒的构建方法包括：将Tn558和sfGFP进行重叠PCR得到Tn558::sfGFP片段，该片段与用BamHI单酶切后的线性化质粒pZ‑oriTRP4进行重组得到最终的自杀质粒pTn558‑GFP‑oriTRP4。将上述自杀质粒转化至大肠杆菌WM3064感受态细胞，得到大肠杆菌供体菌，可将其与金黄色葡萄球菌受体菌株共培养，构建金黄色葡萄球菌荧光菌株。本发明构建的基于金黄色葡萄球菌染色体radc基因定点荧光标记菌株方法效率较高，可用于构建耐药荧光菌株、药动药效学评价或筛选药物中。