一种可提高细胞工厂催化效率的人工类细胞器的构建方法

摘要

本发明公开了一种可提高细胞工厂催化效率的人工类细胞器的构建方法，属于生物技术领域。本发明以蛋白质笼Mi3做为支架，通过融合表达Spycatcher，对其表面进行修饰，利用SpyCatcher多肽与SpyTag多肽之间自发形成的异肽键，招募带有SpyTag‑酶分子，获得人工类细胞器；将蛋白质笼Mi3‑SpyCatcher与维生素K12合成途径中带有SpyTag的三个顺序酶MenFST、MenDST、MenHST在胞外混合进行自组装，所得的类细胞器催化效率较游离酶提高一倍；在大肠杆菌BL21(DE3)中共表达蛋白质笼Mi3‑SpyCatcher与甲羟戊酸途径中带有SpyTag的三个顺序酶HMGRST、HMGSST、AtoBST)，并构建番茄红素合成通路，发酵结果显示，含有人工类细胞器的工程菌株中番茄红素产量较对照菌株提高8倍。