DC-SIGN的shRNA库的构建及其在原发性肝癌中的应用

摘要

本发明公开了DC‑SIGN的shRNA库的构建及其在原发性肝癌中的应用，构建方法包括以下步骤：设计并合成DC‑SIGN的shRNA的寡核苷酸序列，并经高温变性及缓慢降温退火获得双链寡核苷酸；之后将所述双链寡核苷酸连接至经限制性内切酶酶切线性化处理后的pSilencer 3.0‑H1混合，并在T4DNA连接酶的作用下形成重组质粒；将获得的重组质粒按照等比例混合形成DC‑SIGN混合shRNA库。本发明的shRNA库可有效沉默巨噬细胞中的DC‑SIGN表达，可作为靶向肝癌免疫耐受的技术手段促进肿瘤的免疫活化，对于肝癌的临床治疗具有非常广阔的应用开发前景。