用于创建cDNA测序库的方法

摘要

本发明涉及生物技术领域和用于创建cDNA库的方法。更具体地，本发明涉及从RNA原位形成互补DNA(cDNA)测序库的方法，其包括以下步骤：(a)固定细胞，固定在固体表面上；(b)使用包含PCR柄部1的RT引物和部分生物素化的dNTP在细胞内进行原位逆转录(RT)；(c)使用释放混合物从细胞中释放单链cDNA，其中该释放混合物包含RNAse，使得该单链cDNA从完整细胞中释放；(d)将包含释放的cDNA的上清液收集到单个较大体积或分离体积中；以及(e)引入包含将与延长的cDNA的3’结合的PCR柄部2的衔接分子。