一种基于锁式探针介导的茎环连接的扩增技术检测DNA点突变的方法及试剂盒

摘要

本发明公开了一种基于锁式探针介导的茎环连接的扩增技术检测DNA点突变的方法及试剂盒。本方法首先将锁式探针和DNA模板连接形成带有茎环结构的长串联重复序列片段，然后将该产物和茎环引物、滚环引物、等温扩增引物混合在一起，构造双茎环扩增元件进行指数扩增，达到信号的指数放大。其中，锁式探针包括正常型锁式探针和突变型锁式探针，将突变位点设计在突变型锁式探针的3’末端，可以很好的区分突变模板和正常模板。本发明通过采用SYBR I来进行实时荧光检测，信号明显，实现了双链点突变的快速检测，且具有很高的灵敏度和准确性，给与临床指导用药带来益处。