一种绵羊超短周期同期发情方法

摘要

本发明公开了一种绵羊超短周期同期发情方法，包括选择能繁母羊；在能繁母羊的阴道内埋置孕酮栓，埋置当天记为第0天；在第4天肌肉注射氯前列醇钠；在第5天为撤出孕酮栓，同时肌肉注射PMSG；在撤出孕酮栓后12～72小时，利用公羊进行试情，并选出发情母羊。该方法在短至5天的时间即能是能繁母羊发情，相对于以往使用孕酮栓需埋置10天以上的时间极大缩短了埋置时间，并且提高了发情率，同时有效减少了掉栓率和母羊阴道炎症。

说明书

技术领域：

本发明属于家畜繁殖技术领域，具体涉及一种绵羊超短周期同期发情方法。

背景技术

同期发情技术是利用外源生殖激素调控母羊发情周期，使母羊短时间内集中发情的繁殖技术。生产中，常规的同期发情方法是采用阴道海绵栓或CIDR埋置10～14天，撤栓时每只羊肌肉注射PMSG。由于孕酮栓埋置时间长，极易出现掉栓率高、阴道炎症等问题。发明专利申请CN 111743661 A公开了一种诱导湖羊批量生产的同期发情和人工授精方法，将醋酸氟孕酮栓(FGA)放置在母羊阴道深处共11天，并在第9天给母羊肌肉注射前列腺素(PGF

发明内容：

本发明的目的是提供一种绵羊超短周期同期发情方法，该方法在短至5天的时间即能是能繁母羊发情，相对于以往使用孕酮栓需埋置10天以上的时间极大缩短了埋置时间，并且提高了发情率，同时有效减少了掉栓率和母羊阴道炎症。

为了实现上述目的，本发明采取如下技术方案：

一种绵羊短周期同期发情方法，包括如下步骤：

S1：选择健康、体况膘情好、性周期正常、无繁殖障碍疾病的能繁母羊；

S2：在所述能繁母羊的阴道内埋置孕酮栓，埋置当天记为第0天；

S3：在第4天为埋置孕酮栓的所述能繁母羊肌肉注射氯前列醇钠，注射剂量为0.1～0.2mg/只；

S4：在第5天为埋置孕酮栓的所述能繁母羊撤出孕酮栓，同时肌肉注射PMSG，注射剂量为250～500IU/只；

S5：在撤出孕酮栓后12～72小时，利用公羊进行试情，并选出发情母羊。

优选的，在步骤S2中，所述孕酮栓为海绵栓，含45mg氟孕酮。

优选的，在步骤S2中，所述埋置孕酮栓的步骤为：

S21：保定所述能繁母羊；

S22：用消毒水清洗所述能繁母羊外阴，对于青年母羊，埋置孕酮栓前用手指插入其阴道内感受阴道穹窿位置，提起尾巴，缓慢将海绵栓放到穹窿所在位置；对于经产母羊，提起尾巴，将埋置枪先侧向插入，再缓慢将枪调整为正向并沿阴道壁推入到底部后推压手柄，将孕酮栓推出后轻拉埋栓枪，即完成孕酮栓的埋置。

优选的，在步骤S22中，埋置孕酮栓前先将孕酮栓的棉线剪短，使埋置后棉线长度稍低于尾脂。

优选的，在步骤S5中，所述利用公羊进行试情的步骤为：

S51：将试情公羊按公母比1：(10～12)的比例放入所述能繁母羊的群中，在每天上午7：00-9：00，下午16：00-18：00进行试情，每30min换一次公羊，持续时间为2小时。

优选的，所述步骤S3中注射氯前列醇钠的剂量为0.1/只；步骤S4中注射PMSG的剂量为330IU/只。

本发明是因偶然原因得到的，在进行母羊发情的试验中，因试验外事由不得不比原计划提前数天撤出孕酮栓，即在埋栓的第6天撤栓，同时配合使用了前列腺激素及促排卵激素，令人惊奇的是取得了异常良好的效果。为了进一步确定试验效果，又选取了72只能繁母羊进行短期同期发情处理：埋植孕酮栓5天，在撤栓前一天为母羊肌肉注射氯前列醇钠，埋栓后第5天撤栓并同时肌肉注射PMSG，撤栓后12～72h利用公羊进行试情。同样出乎意料的是，试情结果显示母羊发情率竟然达到了97％，这一结果完全颠覆了以往对孕酮栓使用的认知。在通常认知中，孕酮栓一般均需埋置至少10天以上，本发明的试验显示埋栓后第4天注射前列腺素(氯前列醇钠)，第5天取栓并注射PSMG竟然达到了优于常规埋栓10～14天后取栓并注射PSMG的发情效果，从而创造了发情时间超短并具有高发情率的独特发情方法。

附图说明

图1为本发明方法的流程图。

具体实施方式

下面通过具体实施例对本发明做进一步说明，若未特别指明，实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段。

1.试验条件

1.1试验动物

选择健康，体况膘情好，性周期正常，无繁殖障碍疾病的育成母羊72只，体重(35.16±3.66)kg。

1.2试验药品和材料

阴道埋植海绵栓(MAP，澳大利亚生产)，规格：氟孕酮45mg/枚；孕马血清促性腺激素(PMSG，宁波三生生物科技有限公司)，规格：1000IU/支；氯前列醇钠(宁波三生生物科技有限公司)，规格：0.2mg/支。栓枪；生理盐水；外用消毒液(高锰酸钾或新洁尔灭均可)、注射器。

1.3处理方法

试验时间从2020年11月21日到2020年12月3日。每24个MAP用2g左右320万单位的青霉素钠均匀涂于表面，再放置于母羊阴道内，防止发生阴道炎。氯前列醇钠、PMSG均采用肌肉注射。具体步骤如下：

在上述能繁母羊(即上述育成母羊)的阴道内埋置孕酮栓，埋置当天记为第0天，埋栓时，首先保定羊只，然后用消毒水清洗母羊外阴，对于青年母羊，埋置孕酮栓前用手指插入其阴道内感受阴道穹窿位置，一手提起尾巴，另一手缓慢将海绵栓放到穹窿所在位置；对于经产母羊，一手提起尾巴，另一手将埋置枪先侧向插入，再缓慢将枪调整为正向并沿阴道壁推入到底部后推压手柄，将孕酮栓推出后轻拉埋栓枪，即完成孕酮栓的埋置。为了避免羊只互相咬食外置棉线而拉出海绵栓，可将棉线剪短，长度稍低于尾脂最佳。

在第4天为埋置孕酮栓的能繁母羊肌肉注射氯前列醇钠，注射剂量为0.1mg/只；

在第5天为埋置孕酮栓的能繁母羊撤出孕酮栓，同时肌肉注射PMSG，注射剂量为330IU/只。

1.4掉栓和发炎鉴定

撤栓时MAP脱落记为掉栓；撤栓时有出血、恶臭、脓性分泌物流出记为发炎。

1.5母羊发情鉴定

撤栓后12～72h，挑选性欲旺盛的试情公羊，将试情公羊按公母比1：(10～12)的比例放入母羊群中，在每天上午7：00-9：00，下午16：00-18：00试情，每30min换一次公羊，持续时间为2小时。母羊站立不动，接受爬跨，即为发情。统计撤栓后24h、36h、48h发情羊只数。发情率计算公式：发情率＝(发情母羊数/同期发情处理母羊数)×100％。

1.6数据统计

试验数据使用Excel 2016进行整理，SPSS 26.0统计软件进行差异性分析。

2.试验结果

2.1绵羊短周期同期发情效果

由表1可知，同期发情处理后60h内的发情率为97.22％。其中撤栓后36～48h发情率最高，为41.67％，显著高于撤栓后12～24h、48～60h和60～72h(P＜0.05)，与撤栓后24～36h显著不差异(P＞0.05)。

表1实施例1的绵羊超短周期同期发情效果

注：同行数据肩标不同小写字母表示差异显著(P＜0.05),小写字母相同表示差异不显著(P＞0.05)。

在发明专利申请CN 111743661 A中，第Ⅱ组试验埋栓11天，取栓前两天(即第九天)每只母羊肌肉同时注射前列腺素0.1mg和PSMG330IU，发情率83.33％；第Ⅳ组试验埋栓13天，前一天注射前列腺素0.1mg，取栓的同时注射PSMG330IU，发情率80.00％。本发明埋栓5天，前一天注射前列腺素0.1mg，取栓的同时注射PSMG330IU，发情率97.22％。可见，本发明与发明专利申请CN 111743661 A第Ⅱ组试验相比，埋栓时间由11天缩短至5天，改同时注射前列腺素和PMSG为取栓前一天注射前列腺素，取栓同时注射PMSG，发情率则有83.33％提高至97.22％。本发明与上述发明第Ⅳ组试验与本发明相比，区别之处仅在于本发明将埋栓时间由13天缩短至5天，但发情率却由80.00％提高至97.22％。

针对这种差异，一个可能的解释是：

绵羊的发情周期平均为17天，根据卵巢在发情周期中的生理变化，可以将绵羊的发情周期分为黄体期和卵泡期，黄体期大概10-12天。同期发情技术是利用外源孕激素造成“人工黄体”，使处于不同发情阶段的母羊同时出现黄体消退，配合使用促卵泡激素促进卵泡发育成熟以排卵。孕酮栓埋植时间根据发情周期决定，任何一天处理的一群母羊，黄体消退处于50％的概率状态，10-12天才能使母羊黄体全部消退，因此生产中普遍采用的孕酮栓埋植时间为10-12天，在非繁殖季节，由于生殖激素分泌少以及生殖器官的周期性萎缩，孕酮栓处理要延长2天。

而本发明方法打破常规孕酮栓使用时间，共埋置孕酮栓5天，影响如下：

1、本试验埋栓5天，孕酮栓释放的孕酮浓度一直处于较高水平，负反馈抑制促卵泡素和促黄体素的分泌，减少并维持大卵泡数量，促进中小卵泡闭锁。如处理时母羊处于卵泡期，撤栓后配合使用促排卵的生殖激素(PMSG)，母羊会发情排卵；如处理时母羊处于黄体期，5天的埋栓处理结束时黄体可能还未消退，因此必须配合使用前列腺激素溶解黄体：前列腺激素溶解黄体的原理是抑制孕酮分泌，造成功能性黄体的溶解，同时前列腺激素会诱导黄体细胞凋亡，造成结构性黄体溶解。本试验中短期植入孕酮栓，母羊体内外源孕酮水平较高，抑制内源孕酮的分泌，功能性黄体合成孕酮作用减弱，此时注射前列腺激素，对功能性黄体退化的作用更加明显。因此即使5天的短期埋栓时母羊处于黄体期，也不会影响发情效果。

2、黄体退化包括功能性退化和结构性退化，前列腺激素作用12h内主要使黄体功能退化，作用12h后由于黄体逐渐凋亡导致黄体结构退化。PMSG主要作用是促进大卵泡成熟并排卵。因此，撤栓前一天注射前列腺素，撤栓时黄体已经消退，撤栓造成孕激素水平突然下降，对促卵泡素和促黄体素抑制消失，促卵泡素和促黄体素分泌增加促进卵泡发育，此时注射PMSG，促使大卵泡成熟并排卵。

在发明专利申请CN 111743661 A中，长期埋栓孕酮栓(＞10天)，孕酮浓度随埋栓时间延长而降低，造成中小卵泡增多，但大卵泡老化，易造成排卵质量下降，往往受胎率较低。所以该申请第Ⅳ组试验效果埋栓13天，仍不如本发明埋栓5天的效果好。

第Ⅱ组试验中将前列腺素PGF2α与PMSG在同一天使用，不能保证黄体完全溶解，且黄体存在时使用PMSG会导致该激素作用效果降低，不能确保PMSG发挥正常功能。所以效果也不如本发明。

上述实施例只是对本发明构思和实现的说明，并非对其进行限制，在本发明构思下，未经实质变换的技术方案仍然在保护范围内。