一种表达Nectin-1基因胞外区片段的PK-15细胞系及其构建方法

摘要

本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种表达Nectin-1基因胞外区片段的PK-15细胞系PK15-nectin-1-ecto的构建。将猪肝脏组织中的Nectin-1胞外区完整编码区序列克隆到慢病毒核心载体pLenti-7.3CA质粒，成功构建了pLenti7.3CA-nectin-1-ecto重组质粒，将重组质粒和另外三个辅助质粒pLP1、pLP2和pLP/VSVG共同转染包装细胞人胚肾细胞293FT，获得HIV慢病毒粒子，将慢病毒粒子用低速离心的方法转导PK-15细胞，得到能够稳定表达猪pLenti7.3CA-nectin-1-ecto的PK-15细胞系PK15-nectin-1-ecto。PK15-nectin-1-ecto细胞系含有Nectin-1基因胞外区片段，该细胞系获得抗伪狂犬病毒的能力。