技术领域
本发明涉及化合物检测领域,具体提供一种N-亚硝基二甲戊乐灵标准样品的制备方法及二甲戊乐灵产品中亚硝化物的精确测定方法。
背景技术
二甲戊乐灵是世界上销量最大的选择性除草剂,但在其合成过程中会有副反应发生,不可避免的会产生亚硝基二甲戊乐灵,其反应如下:
亚硝基二甲戊乐灵属于N-亚硝基化合物(简称亚硝胺),是一类强烈致癌物质。市场上对于二甲戊乐灵产品中亚硝化合物含量的要求越来越严格,大部分要求在50ppm以下,特殊使用条件下如足球场清除杂草要求在10ppm以下。
现有技术对于亚硝胺类化合物的分析,国内外虽有大量的文献报道,但主要针对挥发性亚硝胺,而对于难挥发的亚硝胺的分析,至今国内鲜有报道。杭州应用工程技术学院李菊清等人曾提出用HPLC外标法进行测定,对于所报道的方法我们曾进行过验证,实际上依据目前国内所使用的液相色谱,包括从国外进口的岛津、安捷伦、惠普等,其检出限都不能满足检测要求,实际操作中并不可行。而且所选择的外标法准确度也受到较大的限制。对于难挥发性亚硝胺的分析,国外文献报道有液相色谱-热分析(LC-TEA)、气相色谱-热分析(GC-TEA)、薄层色谱、光谱分析、极谱等方法,后三种分析方法由于其方法的灵敏度较低,实际应用受到了限制。前两种分析方法其灵敏度较高,但由于GC-TEA等仪器目前国内较少,推广、普及较难。
发明内容
本发明是针对上述现有技术的不足,提供一种能够有效N-亚硝基二甲戊乐灵标准样品的制备方法。
本发明解决其技术问题所采用的技术方案是:N-亚硝基二甲戊乐灵标准样品的制备方法,包括:
A1.取二甲戊乐灵硝化后油相,加入亚硝酸钠,并在1-5℃下滴加浓盐酸,保温条件下反应一定时间;
A2.反应完后水洗、碱洗(如采用10%的NaOH强碱溶液),水洗至中性后,分液,油相蒸馏除去里面的二氯乙烷;
A3.蒸馏后的样品用甲醇提纯,得到N-亚硝基二甲戊乐灵含量大于 99%的目标产物。
所述二甲戊乐灵硝化后油相指二甲合成时经过消化反应后的油相,主要含溶剂二氯乙烷、二甲戊乐灵、N-亚硝基二甲戊乐灵及少量杂质。
进一步的,
亚硝酸钠和二甲戊乐灵硝化后油相的质量比为3:(4-6),优选为3:5;
浓盐酸和二甲戊乐灵硝化后油相的质量比为(1.1-1.3):1,优选为1.2:1;滴加时间优选为1-2h,保温反应时间优选为5-7h,所述浓盐酸的浓度为37%。
本发明进一步的技术任务是提供一种二甲戊乐灵产品中亚硝化物的精确测定方法。
申请人发现,以上述方法制备的N-亚硝基二甲戊乐灵标准样品为内标物,采用液相色谱内标法测定二甲戊乐灵产品中亚硝化物的含量时,能够达到极其优异的检测效果。
进一步的,液相色谱检测限定以下检测条件时,能够达到最佳的检测效果:
流动相中乙腈、水的体积比优选为(80-90):(10-20);
流速优选为0.8-1.2mL/min;
检测波长为254nm;
进样量优选为5-15μL;
亚硝化物的保留时间为5.10-5.40min。
进一步的,二甲戊乐灵产品中亚硝化物的精确测定方法包括以下步骤:
B1.标样溶液的制备
用甲醇溶解标准样品,以制备标样溶液;
B2.试样溶液的制备
用甲醇溶解待测样品,以制备试样溶液;
B3.测定
向液相色谱仪中连续注入数针标样溶液,直至相邻两针亚硝响应值相对变化小于1.5%后,按照标样溶液、试样溶液、试样溶液、标样溶液的顺序进行测定;
B4.计算
将测得的两针试样溶液以及试样前后两针标样溶液中亚硝的峰高,分别进行平均,并按照下式计算亚硝的质量分数X1:
式中:
H1━━两针标样溶液中,亚硝峰高的平均值;
H2━━两针试样溶液中,亚硝峰高的平均值;
m1━━亚硝标样的质量,g;
m2━━试样的质量,g;
P━━标样中亚硝的质量分数,%。
在上述测定方法中,两次平行测定结果之差应不大于1.0%。取其算术平均值,作为测定结果。
标样溶液的制备方法优选为:
准确称取0.01-0.03g(精确至0.0001g)亚硝标样,置于100mL容量瓶中,用甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,备用,此为标准溶液A。用移液管移取1.0mL标准溶液A于50ml容量瓶中,再用甲醇定容至刻度,使其全部溶解,摇匀,得到标样溶液。
试样溶液的制备方法优选为:
准确称取0.8-1.2g(精确至0.0001g)待测二甲戊乐灵原药试样若干份 (优选为3-5份),每份分别置于50mL容量瓶中,用移液管移取1.0mL 标准溶液A于50ml容量瓶中,再用甲醇定容至刻度,使其全部溶解,摇匀,待测。
和现有技术相比,本发明的N-亚硝基二甲戊乐灵标准样品的制备方法及二甲戊乐灵产品中亚硝化物的精确测定方法具有以下突出的有益效果:
(一)制备的标准样品中N-亚硝基二甲戊乐灵的含量超过99%以上,为实现二甲戊乐灵产品中亚硝化物的精确测定奠定了基础;
(二)采用内标法进行测定,能够实现二甲戊乐灵原药中的微量亚硝基化合物的精准检测(10ppm以下),简便易操作,准确性,平行性均可达到要求,并适合大生产的控制要求。
(三)在亚硝结果的计算中,采用峰高来进行计算,而不是常规的峰面积计算,这样做对于微量分析,可以更好的避免其相邻杂峰的干扰,使结果更准确、平行性更好。
附图说明
附图1为实施例一N-亚硝基二甲戊乐灵质谱分析检测图表;
附图2为实施例一N-亚硝基二甲戊乐灵谱分析检测图谱;
附图3为实施例二亚硝标样液相色谱检测图谱;
附图4为实施例二待测样品液相色谱检测图谱;
附图5为实施例三线性验证图。
具体实施方式
下面结合附图和具体实施例对本发明作进一步说明,但不作为对本发明的限定。
如无特别说明,下述所用各成分的含量为质量百分比含量。
【实施例一】
N-亚硝基二甲戊乐灵标准样品的制备步骤:
A1.取生产上的处理后呈中性的二甲戊乐灵硝化后油相100g,往里加入亚硝酸钠60g,降温至2℃,保持2℃左右的反应温度往里滴加120g 37%的浓盐酸,滴加过程有气泡产生,冷凝管口处有黄烟产生,50分钟后不再冒烟,溶液变稠。1.5h滴加完毕后,保温反应6h。
A2.反应完后水洗,用10%的NaOH碱洗,然后水洗至中性。处理完后进行分液,油相进行蒸馏去除二氯乙烷。
A3.蒸馏完样品用甲醇提纯2遍,液谱归一可测得N-亚硝基二甲戊乐灵含量为99.1%,得到的产品要避光保存。结构测定为目标产物,见附图 1、2。
【实施例二】
1、检测方法:
试样用甲醇溶解,用乙腈+水为流动相,使用以Spherisorb C18 5μ m为填充物的不锈钢柱和具可变波长紫外检测器,对试样中的亚硝进行高效液相色谱分离和测定。
液相色谱检测条件如下:
流动相:ψ(乙腈:水)=85:15;
流速:1.0mL/min;
柱温:室温;
检测波长:254nm;
进样量:10μL;
保留时间(min):亚硝基二甲戊乐灵:5.28。
2、检测步骤:
B1.标样溶液的制备
准确称取亚硝标样0.0243g(精确至0.0001g),置于100mL容量瓶中,用甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,备用,此为标准溶液A。
用移液管移取1.0mL标准溶液A于50ml容量瓶中,再用甲醇定容至刻度,使其全部溶解,摇匀,此为标样溶液。
B2.试样溶液的制备
准确称取同一个二甲戊乐灵原药试样三份①0.8223g,②0.8357g,③0.8791g(精确至0.0001g),分别置于50mL容量瓶中,
用移液管移取1.0mL标准溶液A于50ml容量瓶中,再用甲醇定容至刻度,使其全部溶解,摇匀,待测。
B3.测定
在上述色谱操作条件下,待仪器基线稳定后,连续注入数针标样溶液,直至相邻两针亚硝响应值相对变化小于1.5%后,按照标样溶液、试样溶液、试样溶液、标样溶液的顺序进行测定。
B4.计算
将测得的两针试样溶液以及试样前后两针标样溶液中亚硝的峰高,分别进行平均。将亚硝的质量分数记为X1,按下式计算亚硝的质量分数:
式中:
H1━━两针标样溶液中,亚硝峰高的平均值;
H2━━两针试样溶液中,亚硝峰高的平均值;
m1━━亚硝标样的质量,g;
m2━━试样的质量,g;
P━━标样中亚硝的质量分数,%。
分析结果所示:
经过测定该二甲戊乐灵样品中亚硝基化合物的含量为6.949ppm。标样液相色谱检测图谱见图3,测试典型图见附图4(试样②)。
【实施例三】
一、线性验证
准确称取约0.02克(精确至0.0001g)实施例一所述方法制得的亚硝基二甲戊乐灵标准样品于100ml容量瓶中,加甲醇溶解定溶。分别准确移取 2.0、4.0、6.0、8.0、10.0ml于另一50ml溶量瓶中配成不同浓度的溶液,在实施例二所述液相色谱条件下分别进样分析,得出不同浓度亚硝化合物峰高,以亚硝浓度为横座标,峰高为纵座标得到图5所示曲线。
经计算得其回归方程:194625X-10000Y=7000,说明采用标准加入法分析微量亚硝化合物符合线性规律。
二、回收率测定
称取已知含量样品三只,各移入1ml配好的亚硝化合物标准品溶液 (40mg/50ml)按样品测定方法进行回收试验,加标回收率测定结果见下表:
以上数据表明,采用标准加入法,使微含量的亚硝化合物得以放大,同时获得满意的回收率。
三、精密度验证
以实施例二方法对同一样品同时进行五次重复测定,其结果为: 8.62ppm,8.64ppm,8.65ppm,8.58ppm,8.56ppm.平均值8.61ppm,标准偏差0.04。
总结:综上证明,采用高效液相色谱标准加入法分析二甲戊乐灵原药中的微量亚硝基化合物,简便易操作,准确性,平行性均可达到要求,并适合大生产的控制要求。
机译: 包含五恶子灵和二甲戊乐灵的协同除草组合物
机译: 包含五恶子灵和二甲戊乐灵的协同除草组合物
机译: 含有戊氧舒兰和二甲戊乐灵的协同除草组合物