波齐替尼与细胞毒剂和/或其他分子靶向剂的组合物及其用途

摘要

提供了一种波齐替尼和选自细胞毒剂和分子靶向剂的至少一种药剂的组合物以及该组合物的用途。

说明书

相关申请的交叉引用

本申请要求2018年6月25日提交的美国临时申请号为62/689,530的权益，其全部公开内容通过引用整体纳入本文中。

技术领域

一个或多个实施方案涉及一种包含波齐替尼与细胞毒剂和/或分子靶向剂的组合药物以及该药物的用途。

背景技术

波齐替尼(poziotinib)是一种低分子量化合物，可选择性且不可逆地抑制表皮生长因子受体(EGFR)家族(包括Her1、Her2和Her4)。波齐替尼也是一种在抑制EGFR和Her2激活和耐药性突变方面非常有效的pan-Her抑制剂。US 8188102B和US 2013/0071452A1公开了波齐替尼的活性，在此通过引用纳入本文。在US 8188102B中，式1的化合物是实施例36的化合物。

EGFR是蛋白酪氨酸激酶中第一个已知的生长因子受体，蛋白酪氨酸激酶是一种由受体部分和酪氨酸激酶部分组成的蛋白质，它将细胞外的信号穿过细胞膜传递到细胞中。EGFR酪氨酸激酶家族具有EGFR/ErbB1、Her2/ErbB2、Her3/ErbB3和Her4/ErbB4四种亚型受体(以下也分别称为“Her1、Her2、Her3和Her4”)。所有这些都可以以同源二聚体或异源二聚体的形式形成包括该家族的两个不同成员的信号复合体。EGFR通过细胞内信号转导在正常细胞调节中发挥重要作用，但是当通过受体传递的信号由于过表达或激活突变而无法控制时，EGFR激活细胞信号系统以诱导肿瘤细胞的生长或分化、新血管形成、新陈代谢和耐药性表达(resistance expression)。(WellsA.Int J Biochem Cell Bio1.,1999,31,637和Nancy E.Hynes and Heidi A.Lane,Nature Reviews Cancer 5,341,2005)。据报道，EGFR在大多数实体癌细胞中异常过表达或频繁突变，这与预后不良有关。因此，开发靶向EGFR的抗癌剂的研究一直在积极进行，预期如果癌细胞通过EGFR的信号传输被阻断，抗癌效果将是非常好的。

EGFR靶向抗癌剂分为靶向受体胞外结构域的单克隆抗体药物和靶向胞内酪氨酸激酶的低分子量药物。EGFR靶向抗体药物的实例包括曲妥珠单抗(trastuzumab)和西妥昔单抗(Cetuximab)，其中曲妥珠单抗是一种Her2特异性人源化单克隆抗体，西妥昔单抗是一种Her1特异性嵌合(小鼠/人)单克隆抗体。曲妥珠单抗和西妥昔单抗分别用作Her2阳性晚期乳腺癌和胃癌以及Her1阳性转移性结直肠癌和头颈癌的单独治疗剂或联合治疗剂。EGFR靶向低分子量药物的实例包括EGFR/ErbB1的选择性抑制剂吉非替尼(gefitinib)和埃罗替尼(erlotinib)，以及EGFR和Her2的抑制剂拉帕替尼(lapatinib)。吉非替尼和埃罗替尼被用作肺癌的治疗剂，拉帕替尼被用作Her2阳性晚期乳腺癌的治疗剂，并且正在进行临床试验，以扩大其他实体癌治疗的适应症。

然而，近年来，据报道EGFR靶向治疗中的耐药性表达减少了所用药物的响应时间。据报道，用吉非替尼或埃罗替尼治疗的具有EGFR激活突变体的非小细胞肺癌(NSCLC)患者在大约8至16个月后对该药物产生耐药性，并且大约60％的患者由于EGFRT790M突变而产生耐药性(HelenaA.Yu et al.,Clin.CancerRes.19(8),2240,2013)。此外，在用抗体药物曲妥珠单抗治疗的Her2阳性转移性乳腺癌患者的情况下，已知66％至88％的患者由于各种机制而表现出新耐药性(de novo resistance)或获得性耐药性(Alice Chung et al.,Clin.Breast Cancer 13(4),223,2013)。

在这方面，尽管EGFR靶向治疗剂对EGFR/Her2过表达或突变的实体癌的治疗具有相当大的效果，但EGFR靶向治疗剂的开发具有这样的局限性，即由于原发性和继发性耐药性的产生，疗效不能长时间保持。因此，迫切需要这样一种有效的治疗方法，该方法能够在EGFR/Her2过表达或突变的实体癌的治疗中提高疗效并克服耐药性。

发明内容

本发明解决了这一需求。根据一个实施方案，提供了一种用于治疗与受试者的HER1、HER2和HER4中的至少一种基因或者HER1、HER2或HER4的突变体的过表达或扩增相关的肿瘤的组合药物，该组合药物包含作为活性成分的波齐替尼和选自细胞毒剂(cytotoxicagent)和分子靶向剂(molecularly targeted agent)的至少一种药剂的组合物。

根据另一个实施方案，提供了一种组合药物在制备用于治疗与受试者的HER1、HER2和HER4中的至少一种基因或者HER1、HER2或HER4的突变体的过表达或扩增相关的肿瘤的一种或多种药物中的用途。

根据另一个实施方案，提供了一种治疗与受试者的HER1、HER2或HER4或者HER1、HER2或HER4的突变体的过表达或扩增相关的肿瘤的方法，所述方法包括给药包含多种活性成分的组合物，所述多种活性成分包含治疗有效量的波齐替尼和选自细胞毒剂和分子靶向剂中的至少一种药剂。

根据另一个实施方案，提供了一种用于治疗与受试者的HER1、HER2或HER4或者HER1、HER2或HER4的突变体的过表达或扩增相关的肿瘤的试剂盒，所述试剂盒包含第一部分和第二部分，其中第一部分包含波齐替尼，第二部分包含至少一种选自细胞毒剂和分子靶向剂的活性成分。所述试剂盒还可以进一步包括药品说明书(package insert)，所述药品说明书包括用于治疗与受试者中HER1、HER2或HER4或者其突变体的过表达或扩增相关的肿瘤的说明。

附图说明

从下面对实施方案的描述，并结合附图，这些方面和/或其他方面将变得显而易见并且更容易理解，其中：

图1A至图1D示出了在BT-474细胞(一种乳腺癌细胞系)中协同作用的示例，所述BT-474细胞是Her2过表达的并且对曲妥珠单抗敏感。图1A示出了10μM的顺铂(cisplatin)和浓度范围为0.25nM至2nM的波齐替尼单独给药和联合给药的剂量响应曲线。图1B示出了浓度范围均为0.25nM至2nM的紫杉醇(paclitaxel)和波齐替尼单独给药和以紫杉醇:波齐替尼＝1:1的比例联合给药的剂量响应曲线。图1C示出了5μM的5-FU和浓度范围为0.25nM至2nM的波齐替尼单独给药和联合给药的剂量响应曲线。图1D示出了浓度范围为5nM至100nM的曲妥珠单抗和浓度范围为0.05nM至1nM的波齐替尼单独给药和以曲妥珠单抗:波齐替尼＝100:1的比例联合给药的剂量响应曲线；

图2A至图2C示出了在MDA-MB-453细胞(一种乳腺癌细胞系)中的协同作用的示例，所述MDA-MB-453细胞是HER2过表达的，具有曲妥珠单抗耐药性，并且具有PIK3CA突变体。图2A示出了浓度范围均为0.3nM至2.5nM的紫杉醇和波齐替尼单独给药和以紫杉醇:波齐替尼＝1:1的比例联合给药的剂量响应曲线。图2B示出了浓度范围为60nM至500nM的5-FU和浓度范围为0.3nM至2.5nM的波齐替尼单独给药和/或以5-FU:波齐替尼＝200:1的比例联合给药的剂量响应曲线。图2C示出了浓度范围为0.5nM至25nM的曲妥珠单抗和浓度范围为0.05nM至2.5nM的波齐替尼单独给药和以曲妥珠单抗:波齐替尼＝10:1的比例联合给药的剂量响应曲线；

图3示出了在MCF-7细胞(一种雌激素受体阳性的乳腺癌细胞系)中协同作用的一个示例，其中Her1和Her2未过表达。图3示出了2nM的长春瑞滨(vinorelbine)和浓度范围为0.1nM至10nM的波齐替尼单独给药和联合给药的剂量响应曲线；

图4示出了在MDA-MB-361细胞(一种乳腺癌细胞系)中协同作用的一个示例，该细胞是Her2过表达的，具有曲妥珠单抗耐药性，并且具有PIK3CA突变体。图4示出了1nM长春瑞滨和浓度范围为1μM至10μM的波齐替尼单独给药和联合给药的剂量响应曲线；

图5示出了在TE-4细胞(一种食管癌细胞系)中协同作用的一个示例，所述TE-4细胞是Her2过表达的。图5示出了浓度范围为10nM至50000nM的5-FU和0.5nM的波齐替尼单独给药和联合给药的剂量响应曲线；

图6A和图6B示出了在HCC827细胞(一种NSCLC(非小细胞肺癌)细胞系)中协同作用的示例，所述HCC827细胞具有Her1 L858R突变体。图6A示出了浓度范围为0.5nM至20nM的紫杉醇和浓度范围为0.05nM至2nM的波齐替尼单独给药和以紫杉醇:波齐替尼＝10:1的比例联合给药的剂量响应曲线。图6B示出了浓度范围为0.1nM至4μM的顺铂和浓度范围为0.05nM至2nM的波齐替尼单独给药和/或以顺铂:波齐替尼＝2000:1的比例联合给药的剂量响应曲线；以及

图7A和图7B示出了在H1975细胞(一种携带Her1L858R/T790M突变体的NSCLC细胞系)中协同作用的示例。图7A示出了浓度范围为1.5nM至50nM的紫杉醇和浓度范围为0.15nM至5nM的波齐替尼单独给药和以紫杉醇:波齐替尼＝10:1的比例联合给药的剂量响应曲线。图7B示出了浓度范围为80nM至5000nM的西妥昔单抗和浓度范围为0.4nM至25nM的波齐替尼单独给药和/或以西妥昔单抗:波济洛替尼＝200:1的比例联合给药的剂量响应曲线。

图8A和图8B示出了波齐替尼和培美曲塞(Pemetrexed)或来曲唑(Letrozole)联合给药对Calu3细胞系的作用。

具体实施方式

现在将详细参考实施方案，其示例在附图中示出，其中相同的附图标记始终指代相同的要素。在这方面，本申请的实施方案可以具有不同的形式，并且不应被认为限于这里阐述的描述。因此，下面仅通过参考附图来描述实施方案，以解释本说明书的各方面。如这里所使用的，术语“和/或”包括一个或多个相关列出项目的任何和所有组合。诸如“至少一个(种)”之类的表达，当在要素列表之前时，修饰整个要素列表，而不修饰列表中的单个要素。

根据一个实施方案，提供了一种用于治疗肿瘤的组合药物。在一个更具体的实施方案中，肿瘤与受试者的HER1、HER2和HER4中的至少一个基因或者HER1、HER2或HER4的突变体的过表达或扩增相关，所述组合药物包含作为活性成分的波齐替尼和至少一种细胞毒剂和/或至少一种分子靶向剂的组合物。

波齐替尼，即1-[4-[4-(3,4-二氯-2-氟苯胺基)-7-甲氧基喹唑啉-6-基]氧哌啶-1-基]丙-2-烯-1-酮(1-[4-[4-(3,4-dichloro-2-fluoroanilino)-7-methoxyquinazolin-6-yl]oxypiperidin-1-yl]prop-2-en-1-one)，或其药学上可接受的水合物和/或盐，具有式1所示结构。

所述药学上可接受的盐可以是无机酸盐、有机酸盐或金属盐。无机酸盐可以是盐酸、磷酸、硫酸或二磺酸的盐。有机酸盐可以是苹果酸、马来酸、柠檬酸、富马酸、苯磺酸(besylic acid)、樟脑磺酸(camsylic acid)或1,2-乙二磺酸(edisylic acid)的盐。金属盐可以是钙盐、钠盐、镁盐、锶盐或钾盐。在一个实施方案中，波齐替尼可以是片剂形式的盐酸盐。波齐替尼可以以0.1mg至50mg的量给药。

波齐替尼是一种低分子量化合物，其可选择性且不可逆地抑制表皮生长因子受体(EGFR)家族(包括Her1、Her2和Her4)。波齐替尼也是一种在抑制EGFR和Her2激活和耐药性突变体方面非常有效的pan-Her抑制剂。US 8188102B和US 2013/0071452A1公开了波齐替尼的活性，其全部内容通过引用并入本文中。在US 8188102B中，式1的化合物是实施例36的化合物。波齐替尼可以在体外抑制具有Her1或Her2过表达或激活突变体的各种癌中肿瘤细胞的生长，并可以有效抑制对吉非替尼或埃罗替尼有耐药性的肺癌细胞的生长。另外，波齐替尼有效阻止了异种移植动物模型(hetero-transplantation animal model)中的肿瘤生长，所述异种移植动物模型是用这种肿瘤细胞移植的动物体。此外，波齐替尼对EGFR及其突变体具有广泛和优异的抑制作用，并且治疗领域可以更广泛和更有效，所述治疗领域包括对其他已知的EGFR靶向抗体药物和低分子量药物具有耐药性的领域。与使用常规治疗剂产生的效果相比，在此基础上与其他药物的联合治疗也可以提高对各种实体癌的抵抗效果，并且可以提高缓解率(response rate)和延长存活时间。

细胞毒剂是指对细胞具有细胞毒性作用的药剂。细胞毒性作用是指靶细胞(即肿瘤细胞)的消耗、消除和/或死亡。细胞毒剂可以是选自以下中的至少一种：抗代谢药、有丝分裂抑制剂、烷化剂、铂类抗肿瘤药物(platinum-based antineoplastic)、基于抗体的EGFR抑制剂、基于抗体的HER2/3抑制剂、血管生成抑制剂、mTOR抑制剂、CDK4和CDK6抑制剂或芳香酶抑制剂。组合物可以包括至少两种细胞毒剂。例如，组合物可以包含选自抗代谢药、有丝分裂抑制剂、烷化剂、血管生成抑制剂和铂类抗肿瘤药物中的至少2种、至少3种或至少4种或全部。

抗代谢药可以是通过抑制核苷酸的碱基嘌呤或嘧啶的形成来抑制细胞中DNA合成的药物。在一个实施方案中，抗代谢药可选自卡培他滨(Capecitabine)、5-氟尿嘧啶(5-Fluorouracil)、吉西他滨(Gemcitabine)、培美曲塞、甲氨蝶呤(Methotrexate)、6-巯基嘌呤(6-Mercaptopurine)、克拉屈滨(Cladribine)、阿糖胞苷(Cytarabine)、多西氟尿啶(Doxifludine)、氟尿苷(Floxuridine)、氟达拉滨(Fludarabine)、羟基尿素(Hydroxycarbamide)、达卡巴嗪(decarbazine)、羟基脲(hydroxyurea)和天冬酰胺酶(asparaginase)。在一个更具体的实施方案中，抗代谢药是碱基类似物，本文中的术语“碱基类似物”除包括嘌呤碱基类似物(如5-氟尿嘧啶)外，还包括核苷酸和核苷类似物。

有丝分裂抑制剂可以是微管去稳定剂、微管稳定剂或其组合物。有丝分裂抑制剂可以为紫杉烷(taxanes)、长春花生物碱(vinca alkaloids)、埃博霉素(epothilone)或其组合物。在一个具体实施方案中，有丝分裂抑制剂为紫杉烷，例如包括但不限于紫杉醇、多西他赛(docetaxel)和卡巴他赛(cabaitaxel)。在另一个具体实施方案中，有丝分裂抑制剂是长春花生物碱或其衍生物，例如包括但不限于长春碱(vinblastine)、长春新碱(vincristine)、长春氟宁(vinflunine)、长春瑞滨、文卡明醇(vincaminol)、长春布宁(vinburnine)、长春内日啶(vineridine)和长春地辛(vindesine)。

有丝分裂抑制剂可以选自BT-062、HMN-214、甲磺酸艾日布林(eribulinmesylate)、长春地辛、EC-1069、EC-1456、EC-531、vintafolide、2-甲氧基雌二醇(2-methoxyestradiol)、GTx-230、曲妥珠单抗恩坦辛(trastuzumab emtansine)(T-DM1)、crolibulin、D 1302A-美登素偶联物IMGN-529(D1302A-maytansinoid conjugates IMGN-529)、莫星-洛沃妥珠单抗(lorvotuzumab mertansine)、SAR-3419、SAR-566658、IMP-03138、拓扑替康(topotecan)/长春新碱组合物、BPH-8、fosbretabulin tromethamine、雌莫司汀磷酸钠(estramustine phosphate sudium)、长春新碱、长春氟宁、长春瑞滨、RX-21101、卡巴他赛、STA-9584、长春碱、埃博霉素A(epothilone A)、帕土匹龙(patupilone)、伊沙匹隆(ixabepilone)、埃博霉素D、紫杉醇、多西他赛、DJ-927、圆皮海绵内酯(discodermolide)、软珊瑚醇(eleutherobin)及其药学上可接受的盐或其组合物。

如本文中所用，“烷化剂”是向核酸中添加一个或多个烷基(C

血管生成抑制剂是抑制新血管生长(血管生成)的物质。一些血管生成抑制剂是内源性的，是身体控制的正常部分，其他的是通过药物或饮食外源性获得的。在至少一个实施方案中，血管生成抑制剂包括贝伐珠单抗(bevcizumab)、舒尼替尼(sunitinib)、索拉非尼(sorafenib)或帕唑帕尼(pazopatinib)。

铂类抗肿瘤药物可选自顺铂、卡铂(Carboplatin)、双环铂(Dicycloplatin)、依铂(Eptaplatin)、洛铂(Lobaplatin)、米铂(Miriplatin)、奈达铂、奥沙利铂(Oxaliplatin)、吡铂(Picoplatin)和沙铂(Satraplatin)。

如本文所用，“分子靶向剂”是一种这样的物质，当向受试者给药时，其干扰单个分子或一组分子的功能，优选干扰那些参与肿瘤生长和进展的分子的功能。本发明的分子靶向剂的非限制性实例包括信号转导抑制剂、基因表达和其他细胞功能的调节剂、免疫系统调节剂、抗体-药物缀合物及其组合物。

分子靶向剂可选自表皮生长因子受体家族抑制剂(EGFRi)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)抑制剂、免疫检查点抑制剂、间变性淋巴瘤激酶(ALK)抑制剂、B细胞淋巴瘤-2(BCL-2)抑制剂、B-Raf抑制剂、细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂(CDKi)(如CDK4/CDK6抑制剂)、帕博西尼(palbociclib)、ERK抑制剂、组蛋白去乙酰化酶抑制剂(HDACi)、热休克蛋白-90抑制剂(HSP90i)、Janus激酶抑制剂、丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)抑制剂、MEK抑制剂(如MEK1/MEK2抑制剂)、曲美替尼(trametinib)、聚-ADP核糖聚合酶(PARP)抑制剂、磷酸肌醇3-激酶抑制剂(PI3Ki)、Ras抑制剂、钠-葡萄糖协同转运蛋白(sodium-glucose linkedtransporter)(SGLT)抑制剂及其组合物。

合适的钠-葡萄糖协同转运蛋白(SGLT)抑制剂，也称为钠依赖性葡萄糖协同转运蛋白抑制剂(sodium-dependent glucose cotransporter inhibitors)，包括钠/葡萄糖共转运蛋白1(SGLT1)的抑制剂。

分子靶向剂可选自ado-曲妥珠单抗(T-DM1)、阿仑单抗(alemtuzumab)、西妥昔单抗、易普利姆玛(ipilimumab)、奥法木单抗(ofatumumab)、帕尼单抗(panitumumab)、帕妥珠单抗(pertuzumab)、利妥昔单抗(rituximab)、托西莫单抗(tositumomab)、131I-托西莫单抗(131I-tositumomab)、曲妥珠单抗、维布妥昔单抗(brentuximab vedotin)、地尼白介素(denileukin diftitox)、替伊莫单抗(ibritumomab tiuxetan)、阿昔替尼(axitinib)、硼替佐米(bortezomib)、博舒替尼(bosutinib)、卡博替尼(cabozantinib)、克里唑蒂尼(crizotinib)、卡非佐米(carfilzomib)、达沙替尼(dasatinib)、埃罗替尼、吉非替尼、甲磺酸伊马替尼(imatinib mesylate)、拉帕替尼(lapatinib)、尼罗替尼(nilotinib)、帕唑帕尼(pazopanib)、帕纳替尼(ponatinib)、瑞戈非尼(regorafenib)、鲁索替尼(ruxolitinib)、索拉非尼、舒尼替尼、托法替尼(tofacitinib)、凡德他尼(vandetanib)、维罗非尼(vemurafenib)、阿利维A酸(alitretinoin)、蓓萨罗丁(bexarotene)、依维莫司(everolimus)、罗米地辛(romidepsin)、坦罗莫司(temsirolimus)、维甲酸(tretinoin)、伏立诺他(vorinostat)及其药学上可接受的盐或其组合物。分子靶向剂可包括抗体、抗体部分(antibody moiety)或抗体偶联药物。

EGFR抑制剂可选自埃罗替尼、吉非替尼、拉帕替尼、卡奈替尼(canetinib)、培利替尼(pelitinib)、来那替尼(neratinib)、(R,E)-N-(7-氯-1-(1-(4-(二甲氨基)丁-2-烯基)氮杂-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-2-甲基异烟酰胺((R,E)-N-(7-chloro-1-(1-(4-(dimethylamino)but-2-enoyl)azepan-3-yl)-1H-benzo[d]imidazol-2-yl)-2-methylisonicotinamide)、曲妥珠单抗、Margetuximab、帕尼单抗、马妥珠单抗(matuzumab)、耐昔妥珠单抗(necitumumab)、帕妥珠单抗、尼妥珠单抗(nimotuzumab)、扎鲁木单抗(zalutumumab)、西妥昔单抗、埃克替尼(icotinib)、阿法替尼(afatinib)及其药学上可接受的盐。在一个实施方案中，EGFR抑制剂可以是基于抗体的EGFR抑制剂，例如西妥昔单抗，在另一个实施方案中，EGFR抑制剂是耐昔妥珠单抗，而在另一个实施方案中，EGFR抑制剂是帕尼单抗。分子靶向剂可以是抗EGFR家族抗体或包含抗EGFR家族抗体的复合物(complex)。抗EGFR家族抗体可以是抗HER1抗体、抗HER2抗体或抗HER4抗体。

与HER1、HER2和HER4中的至少一种基因或其突变体的过表达或扩增相关的肿瘤可以是组织的异常生长，如果其形成团块，通常被称为具有HER1、HER2、HER4及其突变体中的至少一种的过表达或HER1、HER2、HER4或其突变体中的至少一种基因编码的扩增的肿瘤。在一个实施方案中，突变体可以存在于外显子18、19、20和21中的任何一个或其任何组合中。例如，突变体可以是具有外显子19缺失、T790M取代、L828R取代或其组合的HER1。在另一个实施方案中，突变体可以在HER2外显子20处，例如外显子20插入突变体。在另一个实施方案中，外显子19或20或两者都有一个或多个突变。例如，一个或多个EGFR外显子20突变体包括氨基酸763–778之间3–18个核苷酸的一个或多个点突变体、插入和/或缺失。

在其他实施方案中，可以确定受试者在选自A763、A767、S768、V769、D770、N771、P772和H773的一个或多个残基上具有2、3或4个EGFR外显子20突变体。在另一个实施方案中，可以确定受试者在残基C797上没有EGFR突变体。在一些实施方案中，一个或多个EGFR突变体包括在外显子20中A763、A767、S768、V769、D770、N771、P772和H773处的取代和/或缺失。在一些实施方案中，一个或多个外显子20突变体选自A763insFQEA、A767insASV、S768dupSVD、V769insASV、D770insSVD、D770insNPG、H773insNPH、N771del insGY、N771delinsFH和N771dupNPH。

在某些实施方案中，来自受试者的基因组样品可以来自唾液、血液、尿液、正常组织或肿瘤组织。在特定方面，通过核酸测序(例如，肿瘤组织的DNA测序或血浆循环游离DNA)或聚合酶链反应(PCR)分析来确定EGFR外显子20突变体的存在。

其他实施方案提供了治疗患者癌症的方法，包括向受试者给药有效量的波齐替尼和次级细胞毒剂，其中已确定受试者具有一个或多个外显子19或外显子20突变体。

如本文所用，“过表达”表示该蛋白质的表达水平高于正常细胞。表达水平可以使用免疫组织化学、荧光原位杂交(FISH)或显色原位杂交(CISH)来测量。肿瘤可以是肺癌(包括非小细胞肺癌)、乳腺癌、胃癌、结肠癌、胰腺癌、前列腺癌、骨髓瘤、头颈癌、卵巢癌、食管癌或转移性细胞癌(metastatic cell carcinoma)。

所述受试者可以是哺乳动物。所述哺乳动物可以是人类。

治疗有效量的本发明组合物的给药优于单个组分化合物的给药，因为当与治疗有效量的组分化合物的单独给药相比时，该组合物将提供一种或多种以下改进的性质：i)比活性最高的单一药剂更大的抗癌作用，ii)协同或高度协同的抗癌活性，iii)提供增强的抗癌活性且副作用低的给药方案，iv)毒性作用降低，v)治疗窗口期增加，vi)一种或两种组分化合物的生物利用度增加，或vii)相对于单个组分化合物的细胞凋亡增加。

本发明的化合物可以包含一个或多个手性原子，或者可以以两种对映异构体的形式存在。因此，本发明的化合物包括对映异构体的混合物以及纯化的对映异构体或对映异构体富集的混合物。此外，本文中应当理解的是，术语“波齐替尼”、“细胞毒剂”和“分子靶向剂”中的每一个都包括可能适合该情况的所有密切相关形式的化合物。例如，通过本文中术语“波齐替尼”、“细胞毒剂”和“分子靶向剂”中的每一个，将所有互变异构体和互变异构体的混合物以及其药学上可接受的溶剂化物和/或盐都包括在该范围内。这一涵盖范围的原则不仅适用于术语“细胞毒剂”和“分子靶向剂”，而且适用于属于这两个术语所定义的组的任何特定药物成员。例如，本文使用的术语“顺铂”包括其所有互变异构体和互变异构体的混合物以及其药学上可接受的溶剂化物和/或盐，正如与波齐替尼组合时的术语“细胞毒剂”的情况一样。

本发明的化合物可以形成溶剂化物，该溶剂化物被理解为由溶质(在本发明中，溶质可以是波齐替尼或其盐与细胞毒剂或其盐和/或分子靶向剂或其盐)和溶剂形成的化学计量可变的复合物。用于本发明目的的这种溶剂不会干扰溶质的生物活性。合适的溶剂的实例包括但不限于水、甲醇、二甲基亚砜、乙醇和乙酸。适当地，所用的溶剂是药学上可接受的溶剂。适当地，所用的溶剂是水。

本领域技术人员容易制备本发明化合物的药学上可接受的盐。

在一个实施方案中，所述至少一种细胞毒剂选自紫杉烷、碱基类似物、铂类抗肿瘤药物和长春花生物碱类抗肿瘤药物以及芳香酶抑制剂。在至少一个实施方案中，芳香酶抑制剂包括来曲唑和阿那曲唑(anastrozole)。

在另一个实施方案中，所述至少一种分子靶向剂选自表皮生长因子受体(EGFR)家族抑制剂和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)抑制剂(例如依维莫司、坦罗莫司和西罗莫司(sirolumus))。

在一个具体的实施方案中，所述组合物包含波齐替尼和抗EGFR家族抗体。在另一个具体实施方案中，所述组合物包含波齐替尼和紫杉烷。在另一个具体实施方案中，所述组合物包含波齐替尼和碱基类似物。在另一个具体实施方案中，所述组合物包含波齐替尼和铂类抗肿瘤药物。在另一个具体实施方案中，所述组合物包含波齐替尼和长春花生物碱。

在一个实施方案中，所述组合物可以包含波齐替尼和抗EGFR家族抗体。抗EGFR家族抗体可以是曲妥珠单抗、西妥昔单抗、margetuximab、马妥珠单抗、帕尼单抗、耐昔妥珠单抗或帕妥珠单抗。所述组合物的一个实例可以是波齐替尼和曲妥珠单抗；或波其替尼和西妥昔单抗。波齐替尼可以是盐酸盐形式。所述组合物可以进一步包含细胞毒剂。细胞毒剂可以是有丝分裂抑制剂。有丝分裂抑制剂可以是紫杉烷、长春花生物碱、埃博霉素或其组合物。长春花生物碱可以是长春碱、长春新碱、长春地辛和长春瑞滨中的至少一种药物。所述组合物的实例包含波齐替尼、曲妥珠单抗和长春瑞滨。长春瑞滨可以是注射剂的形式。紫杉烷可以是紫杉醇或多西他赛。所述组合物的实例可以包括波齐替尼、西妥昔单抗和紫杉醇。紫杉醇可以是注射剂的形式。

波齐替尼可以以0.1mg至50mg的量给药。曲妥珠单抗可以以每千克体重0.5mg至10mg的量给药。西妥昔单抗可以以100mg/m

长春瑞滨可以以0.5mg/m

在其他药物中以Herceptin

西妥昔单抗是一种表皮生长因子受体(EGFR)抑制剂，用于治疗转移性结直肠癌、转移性非小细胞肺癌和头颈癌。西妥昔单抗是一种通过静脉输注产生的嵌合(小鼠/人)单克隆抗体，由药物公司Bristol-Myers Squibb以商品名Erbitux

在其他药物中以Taxol

在一个实施方案中，所述组合物可以包含波齐替尼和有丝分裂抑制剂。有丝分裂抑制剂可选自BT-062、HMN-214、甲磺酸艾日布林、长春地辛、EC-1069、EC-1456、EC-531、vintafolide、2-甲氧基雌二醇、GTx-230、曲妥珠单抗-美坦新偶联物(T-DM1)、crolibulin、D1302A-美登素偶联物、IMGN-529、莫星-洛沃妥珠单抗、SAR-3419、SAR-566658、IMP-03138、拓扑替康/长春新碱组合物、BPH-8、fosbretabulin tromethamine、雌莫司汀磷酸钠、长春新碱、长春氟宁、长春瑞滨、RX-21101、卡巴他赛、STA-9584、长春碱、埃博霉素A、帕土匹龙、伊沙匹隆、埃博霉素D、紫杉醇、多西他赛、DJ-927、圆皮海绵内酯、软珊瑚醇及其药学上可接受的盐或其组合物。所述组合物的一个实例可以包含波齐替尼和紫杉烷、长春花生物碱或它们的组合物。长春花生物碱可以是选自长春碱、长春新碱、长春地辛和长春瑞滨中的至少一种药物。紫杉烷可以是紫杉醇或多西他赛。所述组合物的一个实例可以包含波齐替尼和紫杉醇；或者波齐替尼和长春瑞滨。肿瘤可以是Her2过表达的乳腺癌。

在另一个实施方案中，所述组合物可以包含波齐替尼和有丝分裂抑制剂(例如紫杉醇)。在另一个实施方案中，细胞毒剂可以是EGFR抑制剂，例如Raf抑制剂、RAS抑制剂、MEK抑制剂、MAPK抑制剂或ERK抑制剂与波齐替尼单独组合或与波齐替尼和第二细胞毒剂组合。

波齐替尼可以以0.1mg至50mg的量给药。另外，长春瑞滨可以以0.5mg/m

在其他药物中以Navelbine

在一个实施方案中，所述组合物可以包含波齐替尼和mTOR抑制剂，以及AKT和/或P13k系统抑制剂。mTOR抑制剂可以选自佐他莫司(zotarolimus)、乌米莫司(umirolimus)、坦罗莫司、西罗莫司、西罗莫司NanoCrystal

波齐替尼可以以0.1mg至50mg的量给药。此外，雷帕霉素可以以0.5mg/m

在一个实施方案中，所述组合物可以包含波齐替尼和抗代谢物。抗代谢物可选自卡培他滨、5-氟尿嘧啶、吉西他滨、培美曲塞、甲氨蝶呤、6-巯基嘌呤、克拉屈滨、阿糖胞苷、多西氟尿啶、氟尿苷、氟达拉滨、羟基尿素、达卡巴嗪、羟基脲和天冬酰胺酶。所述组合物的一个实例可以包含波齐替尼和5-氟尿嘧啶。5-氟尿嘧啶可以是注射剂的形式。

波齐替尼可以以0.1mg至50mg的量给药。5-氟尿嘧啶的以100mg/m

在其他药物中以Adrucil

在一个实施方案中，所述组合物可以包含波齐替尼和铂类抗肿瘤药。铂类抗肿瘤药可以选自顺铂、卡铂、双环铂、依铂、洛铂、米铂、奈达铂、奥沙利铂、吡铂和沙铂。所述组合物的一个实例可以包含波齐替尼和顺铂。顺铂可以是注射剂的形式。

波齐替尼可以0.1mg至50mg的量给药。顺铂可以以1mg/m

顺铂是一种用于治疗多种癌症的化疗药物。这包括睾丸癌、卵巢癌、宫颈癌、乳腺癌、膀胱癌、头颈癌、食管癌、肺癌、间皮瘤、脑瘤和神经母细胞瘤。顺铂通过静脉注射使用。顺铂属于铂类抗肿瘤药物家族。其部分地通过结合DNA并抑制DNA复制而起作用。

所述组合物可进一步包含至少一种药学上可接受的载体。所述载体必须是可接受的，即与制剂的其他成分相容，能够制成药物制剂，并且对其接受者无害。根据本发明的另一个方面，还提供了一种制备药物制剂的方法，包括将波齐替尼或其药学上可接受的溶剂化物或其盐与细胞毒剂和/或分子靶向剂组合的药物组合物与一种或多种药学上可接受的载体混合，其中所述细胞毒剂和/或分子靶向剂包括其药学上可接受的盐或溶剂化物。如上所述，所使用的药物组合物的这些成分可以存在于单独的药物组合物中或一起配制成一种药物制剂。

药物制剂可以单位剂量形式存在，所述单位剂量包含预定量的活性成分。如本领域技术人员已知的，每剂量活性成分的量将取决于所治疗的病状、给药途径以及患者的年龄、体重和病状。优选的单位剂量制剂是含有每日剂量或亚剂量或其适当分数的活性成分的单位剂量制剂。此外，可以通过制药领域公知的任何方法来制备这样的药物制剂。

波齐替尼与细胞毒剂和/或分子靶向剂的组合物可以通过任何合适的途径给药。合适的给药途径包括口服给药、直肠给药、鼻腔给药、局部给药(包括口腔给药和舌下给药)、阴道给药和胃肠外给药(包括皮下给药、肌内给药、静脉内给药、皮内给药、鞘内给药和硬膜外给药)。可以理解的是，优选的给药途径可以随着例如组合物的接受者的状况和待治疗的癌症而变化。还应当理解，每种给药的药剂可以通过相同或不同的途径给药，并且所有组分化合物可以一起混合在一种药物组合物/制剂中。适当地，所有组分化合物在分开的药物组合物中给药。

本发明的化合物或组合物被掺入到方便的剂型如胶囊、片剂或注射制剂中。使用固体或液体药物载体。固体载体包括淀粉、乳糖、二水合硫酸钙、白土(terra alba)、蔗糖、滑石粉、明胶、琼脂、果胶、阿拉伯胶、硬脂酸镁和硬脂酸。液体载体包括糖浆、花生油、橄榄油、盐水和水。类似地，载体可以包括缓释材料，例如单硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯单独或与蜡一起。固体载体的量变化范围很宽，但适当地，每剂量单位可为约25mg至约1g。当使用液体载体时，制剂将适当地为糖浆、酏剂、乳剂、软明胶胶囊、无菌注射液(如安瓿)或水性或非水性液体悬浮液的形式。

例如，对于片剂或胶囊形式的口服给药，活性药物成分可以与口服、无毒的药学上可接受的惰性载体(如乙醇、甘油、水等)结合。粉末是通过将化合物粉碎成合适的细粒并与类似粉碎的药物载体(如可食用碳水化合物，如淀粉或甘露醇)混合而制成的。还可以含有调味剂、防腐剂、分散剂和着色剂中的一种或多种。

应该理解的是，关于所讨论的制剂的类型，除了上述成分之外，制剂还可以包括本领域常规的其它药剂，例如那些适于口服给药的药剂可以包括调味剂。

在另一方面，将治疗有效量的本发明的组合物(波齐替尼或其药学上可接受的溶剂化物或盐与细胞毒剂或其药学上可接受的盐或溶剂化物和/或分子靶向剂或其药学上可接受的盐或溶剂化物的组合物)以同时或连续的方式向人给药。通常，本发明的给药药剂的治疗有效量将取决于多个因素，包括例如受试者的年龄和体重、需要治疗的确切病状、病状的严重性、制剂的性质和给药途径。最终，治疗有效量将由主治医师决定。

适当地，本发明涉及治疗与野生型或突变型的HER1、HER2和HER4中的至少一个基因的过表达或扩增相关的肿瘤。这包括以下患者：HER1、HER2和HER4中的一种为野生型的患者，HER1、HER2和HER4中的两种为突变型的患者，HER1、HER2和HER4中的两种为野生型的患者，HER1、HER2和HER4中的一种为突变型的患者，以及所有HER1、HER2和HER4为突变型的患者。

如本文所用，术语“野生型”在本领域中是指存在于天然群体中而没有基因修饰的多肽或多核苷酸序列。在本领域中还应理解，“突变型”包括与分别在野生型多肽或多核苷酸中发现的相应氨基酸或核酸相比，对氨基酸或核酸具有至少一种修饰的多肽或多核苷酸序列。术语突变型中包括单核苷酸多态性(SNP)，其中与最普遍发现的(野生型)核酸链相比，核酸链的序列中存在单个碱基对差异。通过已知方法可鉴定出包括HER1、HER2或HER4的野生型或突变型或具有HER1，HER2或HER4基因扩增或HER1、HER2或HER4蛋白过表达的癌症的肿瘤。

例如，野生型或突变型HER1、HER2和HER4肿瘤细胞可以通过DNA扩增和测序技术、DNA和RNA检测技术(包括但不限于分别进行Northern和Southern印迹)和/或各种生物芯片阵列技术或原位杂交鉴定。可以通过多种技术来检测野生型和突变型多肽，这些技术包括但不限于免疫诊断技术，例如ELISA、蛋白质印迹法(Western blot)或免疫细胞化学。

根据另一个实施方案，提供了所述组合药物在制备一种或多种治疗与受试者中HER1、HER2和HER4的至少一个基因或HER1、HER2或HER4的突变体的过表达或扩增相关的药物中的用途。

根据另一个实施方案，提供了一种治疗与受试者中HER1、HER2或HER4或者HER1、HER2或HER4的突变体的过表达或扩增相关的肿瘤的方法，该方法包括给药活性成分的组合物，所述活性成分包含治疗有效量的波齐替尼和选自细胞毒剂和分子靶向剂中的至少一种药剂。关于与HER1、HER2或HER4或者HER1、HER2或HER4的突变体的过表达或扩增相关的组合物和肿瘤的描述与以上描述中定义的相同。

在一个具体实施方案中，肿瘤选自：

(i)携带一个或多个选自外显子19中L858R取代、T790M取代和/或缺失的EGFR突变体的非小细胞肺癌；

(ii)伴随HER1和/或HER2过表达的雌激素受体阴性乳腺癌；

(iii)伴随HER2表达但不过表达的雌激素受体和孕激素受体双阳性乳腺癌；

(iv)伴随HER2过表达的曲妥珠单抗耐药乳腺癌；

(v)HER2、孕酮受体和雌激素受体三阴性的HER 1过表达乳腺癌；

(vi)伴随HER2过表达的食管癌；

(vii)伴随HER2过表达的胃癌；

(viii)携带包含一个或多个氨基酸763–778之间的3–18个核苷酸的点突变体、插入和/或缺失的一个或多个EGFR突变体，或者在选自A763、A767、S768、V769、D770、N771、P772和H773的一个或多个残基处具有2、3或4个EGFR外显子20突变体，和/或在C797残基处没有EGFR突变体的非小细胞肺癌。

(ix)携带选自A763insFQEA、A767insASV、S768dupSVD、V769insASV、D770insSVD、D770insNPG、H773insNPH、N771del insGY、N771del insFH和N771dupNPH的一个或多个外显子20突变体的非小细胞肺癌。

在另一个具体的实施方案中，所述组合物和待治疗的肿瘤选自：

(1)波齐替尼和紫杉醇，用于治疗

(a)携带外显子19中L858R取代、T790M取代和/或缺失的EGFR突变体的非小细胞肺癌，

(b)伴随HER2过表达的雌激素受体阴性乳腺癌，或

(c)伴随HER2过表达的曲妥珠单抗耐药乳腺癌；

(2)波齐替尼和顺铂，用于治疗

(a)携带外显子19中L858R取代、T790M取代和/或缺失的EGFR突变体的非小细胞肺癌，

(b)伴随HER2过表达的雌激素受体阴性乳腺癌，或

(c)伴随HER2过表达的曲妥珠单抗耐药乳腺癌；

(3)波齐替尼和5-氟尿嘧啶，用于治疗

(a)伴随HER2过表达雌激素受体阴性乳腺癌，

(b)伴随HER2过表达的曲妥珠单抗耐药乳腺癌，或

(c)伴随HER2过表达的食管癌；

(4)波齐替尼和西妥昔单抗，用于治疗携带L858R和T790M的EGFR取代并伴随HER1过表达的非小细胞肺癌；

(5)波齐替尼和曲妥珠单抗，用于治疗

(a)伴随HER2过表达的曲妥珠单抗耐药乳腺癌，或

(b)伴随HER2过表达的胃癌；和

(6)波齐替尼和长春瑞滨，用于治疗

(a)伴随HER2过表达的雌激素受体阴性乳腺癌，

(b)伴随HER2过表达的雌激素受体和孕激素受体双阳性且曲妥珠单抗耐药的乳腺癌，

(c)HER1和HER2过表达双阴性的雌激素受体和孕激素受体双阳性乳腺癌，或者

(d)HER2、雌激素受体和孕激素受体三阴性的HER1过表达乳腺癌。

此外，本文涉及使用本发明的组合物治疗癌症的方法，其中药物组合物的组分药物以前药的形式给药。本领域技术人员容易制备本发明化合物的药学上可接受的前药。

当提及给药方案时，术语“天”、“每天”等是指一个日历日的时间，即从午夜开始并在随后的午夜结束的时间。

本文所用的术语“治疗”及其派生词是指对有此需要的患者的治疗有效方案。针对特定病症，治疗是指：(1)改善或预防该病症的一种或多种生物学表现的病症，(2)干扰(a)导致或导致该病症的生物学级联中的一个或多个点，或(b)该病症的一种或多种生物学表现；(3)减轻与该病症或其治疗有关的一种或多种症状、效应或副作用；或(4)减缓该病症或该病症的一种或多种生物学表现的进展。因此也涉及预防性治疗。技术人员将理解，“预防”不是绝对的术语。在医学上，“预防”应理解为是指预防性给药药物以实质上降低病症或其生物学表现的可能性或严重性，或延迟该病症或其生物学表现的发作。预防性治疗是合适的，例如，当受试者被认为具有发展成癌症的高风险时，例如当受试者具有较强的癌症家族史或当受试者已经暴露于致癌物时。

如本文所用，术语“有效量”是指将引起组织、系统、动物或人的生物或医学反应的药物或药剂的量，所述生物或医学反应是例如研究者或临床医生所寻求的。此外，术语“治疗有效量”是指与未接受该量的相应受试者相比，使疾病、紊乱(disorder)或副作用的改善治疗、治愈、预防或改善，或疾病或紊乱的进展速度降低的任何量。该术语在其范围内还包括有效增强正常生理功能的量。

本文所用的术语“组合物”是指同时给药或以任何方式分别顺序给药治疗有效量的组分药物波齐替尼与细胞毒剂和/或分子靶向剂或其药学上可接受的盐或溶剂化物组成的组合物。优选地，如果给药不是同时进行的，则化合物在彼此接近的时间内给药。此外，如果化合物以相同的剂量形式给药也可以，例如一种化合物可以局部给药，另一种化合物可以口服给药。适当地，两种化合物都是口服给药的。

适当地，本发明的组合物在“特定时间(specified period)”内给药。

本文使用的术语“特定时间”及其派生词是指给药本发明组合物的一种组分药物和另一种组分药物之间的时间间隔。除非另有规定，否则特定时间可以包括同时给药。在双组分药物组合物的实施方案中，当本发明的两种化合物每天给药一次时，特定时间是指在一天内以相关顺序给药波齐替尼和另一种化合物的时间。当本发明的一种或两种化合物每天给药多于一次时，特定时间是基于每种化合物在特定时间的第一次给药来计算的。当计算特定时间时，不考虑在特定时间第一次给药之后的本发明化合物的所有给药。

适当地，如果化合物在“特定时间”内给药并且不同时给药，它们都在彼此约24小时、12小时、11小时、10小时、9小时、8小时、7小时、6小时、5小时、4小时、3小时、2小时或1小时内给药—在这种情况下，特定时间为约24小时、12小时、11小时、10小时、9小时、8小时、7小时、6小时、5小时、4小时、3小时、2小时或1小时。如本文所用，对于双组分药物组合物的实施方案，在间隔不到约45分钟的时间内给药波齐替尼和其他组分药物被认为是同时给药。

适当地，当本发明的组合物给药“特定时间”时，化合物将在“持续时间(durationof time)”内共同给药。

本文使用的术语“持续时间”及其派生词是指本发明的两种化合物在“特定时间”内以指定的连续天数给药，任选地随后的连续天数仅给药一种组成化合物。

关于“特定时间”给药，在至少一个实施方案中，在治疗过程中，两种化合物将在特定时期内给药至少1天、2天、3天、5天、7天、14天或30天——在这种情况下，持续时间将为至少1天、2天、3天、5天、7天、14天或30天。在治疗过程中，当两种化合物在特定时间内给药超过30天时，该治疗被视为慢性治疗，并将持续到改变事件(event)，如癌症状态的重新评估或患者病情的变化，保证对方案进行修改。

进一步关于“特定时间”给药，在另一个实施方案中，在用两种组分药物组合物治疗的过程中，两种组分药物将在特定时间内给药至少1天，然后单独给予波齐替尼至少1天、2天、3天、4天、5天、6天或7天——在这种情况下，持续时间至少为2天、3天、4天、5天、6天、7天或8天；适当地，在治疗过程中，两种化合物将在特定时间内连续给药至少2天，随后单独给药波齐替尼至少1天、2天、3天、4天、5天、6天或7天——在这种情况下，持续时间至少为3天、4天、5天、6天、7天、8天或9天；适当地，在治疗过程中，两种化合物将在特定时间内连续给药至少3天，随后单独给药波齐替尼至少1天、2天、3天、4天、5天、6天或7天——在这种情况下，持续时间至少为4天、5天、6天、7天、8天、9天或10天；适当地，在治疗过程中，两种化合物将在特定时间内连续给药至少4天，随后单独给药至少1天、2天、3天、4天或7天——在这种情况下，持续时间至少为5天、6天、7天、8天或11天；适当地，在治疗过程中，两种化合物将在特定时间内连续给药至少5天，随后单独给药至少1天、2天、3天、4天或5天——在这种情况下，持续时间至少为6天、7天、8天、9天或10天。在另一个实施方案中，在治疗过程中，两种化合物将在特定时间内连续给药1至3天，随后单独连续给药波齐替尼3至7天。

在另一个实施方案中，在治疗过程中，两种化合物将在特定时间内连续给药3至6天，随后单独连续给药波齐替尼1至4天。适当地，在治疗过程中，两种化合物将在特定时间内连续给药2天，随后单独连续给药波齐替尼3至7天。适当地，在治疗过程中，两种化合物将在7天时间内的1至3天的特定时间内给药，并且在7天时间的其他天内，将单独给药波齐替尼。在另一个实施方案中，在治疗过程中，两种化合物将在7天时间内的2天的特定时间内给药，在7天时间的其他天内，将单独给药波齐替尼。

进一步关于“特定时间”给药，在治疗过程中，对于两种组分药物组合物的一个实施方案，两种化合物将在特定时间内给药至少1天，随后单独给药另一种组分药物至少1天、2天、3天、4天、5天、6天或7天——在这种情况下，持续时间将为至少2天、3天、4天、5天、6天、7天或8天；适当地，在治疗过程中，两种化合物将在特定时间内连续给药至少2天，随后单独给药另一种组分药物至少1天、2天、3天、4天、5天、6天或7天——在这种情况下，持续时间至少为3天、4天、5天、6天、7天、8天或9天；适当地，在治疗过程中，两种化合物将在规定的时间内给药至少连续3天，随后单独连续给药另一种成分药物至少1天、2天、3天、4天、5天、6天或7天——在这种情况下，持续时间至少为4天、5天、6天、7天、8天、9天或10天；适当地，在治疗过程中，两种化合物将在特定时间内连续给药至少4天，随后单独连续给药另一种组分药物至少1天、2天、3天、4天或7天——在这种情况下，持续时间至少为5天、6天、7天、8天或11天；适当地，在治疗过程中，两种化合物将在特定时间内连续给药至少5天，随后单独连续给药另一种组分药物至少1天、2天、3天、4天或5天——在这种情况下，持续时间至少为6天、7天、8天、9天或10天。适当地，在治疗过程中，两种化合物将在特定时间内连续给药1至3天，随后单独连续给药其他组分药物3至7天。适当地，在治疗过程中，两种化合物将在特定时间内连续给药3至6天，随后单独连续给药其它组分药物1至4天。适当地，在治疗过程中，两种化合物将在特定时间内连续给药2天，随后单独连续给药另一种组分药物3至7天。适当地，在治疗过程中，两种化合物将在7天内的1至3天的特定时间内给药，并且在7天期间的其他天内，将单独给药其他组分药物。适当地，在治疗过程中，两种化合物将在7天时间内的2天的特定时间内给药，并且在7天期间的其他天内，将单独给药其他组分药物。

此外，关于“特定时间”给药，在治疗过程中，对于两种组分药物组合物的一个实施方案，将在7天时间的1至3天的特定时间内给药波齐替尼和另一种组分药物，并且在7天期间的其他天内将单独给药波齐替尼。适当地，该7天方案重复2个周期或14天；适当地，4个周期或28天；适当地，连续给药。

适当地，在治疗过程中，对于双组分药物组合物的一个实施方案，在7天期间的1至3天的特定时间内给药波齐替尼和其他组分药物，并且在7天期间的其他天内，将单独给药其他组分药物。适当地，该7天方案重复2个周期或14天；适当地，4个周期或28天；适当地，连续给药。

适当地，在治疗过程中，对于双组分药物组合物的一个实施方案，将在14天期间的1至5天的特定时间内给药波齐替尼和其它组分药物，并且在14天期间的其它天内，将单独给药波齐替尼。适当地，该14天方案重复2个周期或28天；适当地，连续给药。

适当地，在治疗过程中，对于双组分药物组合物的一个实施方案，在14天期间的1至5天的特定时间内给药波齐替尼和其他组分药物，并且在14天期间的其他天内，单独给药其他组分药物。适当地，该14天方案重复2个周期或28天；适当地，连续给药。

适当地，如果化合物不是在“特定时间”期间给药，则它们是顺序给药的。本文所用的术语“顺序给药”是指例如双组分药物组合物的实施方案，其中连续给药波齐替尼和另一个组分药物中的一个组分药物1天或更长时间，随后连续给药波齐替尼和另一个组分药物中的另一个组分药物1天或更长时间。除非另有规定，否则在双组分药物组合物的情况下，“顺序给药”和本文所述的所有给药方案不必从治疗开始时实施，到治疗结束时终止，只需要在治疗过程中的某个时间点给药波齐替尼和另一种组分药物中的一种组分药物，然后给药另一种组分药物，或指定的给药方案。此外，此处考虑的是在波齐替尼和另一种组分药物中的一种和另一种的顺序给药之间使用的药物假期(drug holiday)。如本文所用，药物假期是在连续给药波齐替尼和另一种组分药物中的一种之后和给药另一种之前的几天时间，其中既没有给药波齐替尼也没有给药另一种组分药物。适当地，药物假期将是从以下天数中选择的时间：1天、2天、3天、4天、5天、6天、7天、8天、9天、10天、11天、12天、13天和14天。

关于顺序给药：

适当地，例如对于双组分药物组合物的一个实施方案，连续给药波齐替尼和另一种组分药物中的一种1至30天，然后是任选的药物假期，然后连续给药另一种1至30天。

适当地，例如对于双组分药物组合物的一个实施方案，其他组分药物将按顺序首先给药，然后是任选的药物假期，然后给药波齐替尼。

适当地，波齐替尼将按顺序首先给药，然后是任选的药物假期，然后给药其它组分药物。

应当理解，“特定时间”给药和“顺序”给药之后可以是一个或多个循环的重复给药，或者可以是替代给药方案，并且药物假期可以在重复给药或替代给药方案之前。

适当地，作为根据本发明的组合物的一部分给药的波齐替尼的量将选自约0.1mg至约50mg；适当地，该量将选自约0.5mg至约50mg；适当地，该量将选自约1mg至约50mg；适当地，该量将选自约5mg至约50mg；适当地，该量将选自约1mg至约30mg；适当地，该量将选自约5mg至约20mg；适当地，该量将选自约1mg至约10mg；适当地，该量将选自约0.1mg至约5mg；适当地，该量为1mg，适当地，该量为5mg，适当地，该量为10mg，适当地，该量为20mg，适当地，该量为30mg；适当地，该量为50mg。因此，作为根据本发明的组合物的一部分给药的波齐替尼的量将是选自约0.1mg至约50mg。例如，作为根据本发明的组合物的一部分给药的波齐替尼的量适当地选自1mg、5mg、10mg、20mg、30mg和50mg。适当地，选定量的波齐替尼以一片或多片的形式每天给药1至4次。适当地，选定量的波齐替尼以一片或多片的形式每天给药两次。适当地，选定量的波齐替尼以一片或多片的形式每天给药一次。适当地，波齐替尼的给药将以负荷剂量开始。适当地，负荷剂量将是维持剂量的2至100倍；适当地为2至10倍；适当地为2至5倍；适当地为2倍；适当地为3倍；适当地为4倍；适当地为5倍。适当地，负荷剂量给药1至7天；适当地为1至5天；适当地为1至3天；适合地为1天；适当地为2天；适当地为3天，然后是维持剂量方案。

适当地，作为根据本发明组合物的一部分给药的第二组分药物(不是波齐替尼)的量将选自约0.1mg/m

如本文所用，所有波齐替尼和其他组分药物的具体量均表示为每剂量的游离或未盐化和未溶解化合物的给药量。

因此，本发明进一步提供了药物组合物，其包含波齐替尼和其他组分药物以及一种或多种药学上可接受的载体。

根据另一个实施方案，提供了一种用于治疗与受试者中HER1、HER2或HER4或者HER1、HER2或HER4的突变体的过表达或扩增相关的肿瘤的试剂盒，所述试剂盒包含第一部分和第二部分，其中第一部分包含波齐替尼，第二部分包含选自细胞毒剂和分子靶向剂的至少一种活性成分。所述试剂盒还可以进一步包含药品说明书，所述药品说明书包含用于治疗与受试者中HER1、HER2或HER4或其突变体的过表达或扩增相关的肿瘤的说明。

波齐替尼、细胞毒剂和分子靶向剂以及表述“HER1、HER2或HER4或者HER1、HER2或HER4的突变体”和“过表达”的描述与上述描述中的定义相同。

本文使用的术语“组合物试剂盒”是指用于给药的一种或多种药物组合物。例如，波齐替尼或其药学上可接受的溶剂化物和/或盐与选自细胞毒剂和分子靶向剂中的至少一种结合，所述细胞毒剂和分子靶向剂也包含细胞毒剂和分子靶向剂的药学上可接受的盐或溶剂化物。当化合物可以同时给药时，至少两种化合物可以在同一药物组合物中，例如片剂。当化合物不同时给药时，组合物试剂盒将在不同的药物组合物中含有波齐替尼和其他组分药物或其药学上可接受的盐或溶剂化物。所述组合物试剂盒可以在同一包装中的不同药物组合物中或在不同包装中的不同药物组合物中包含波齐替尼和其它组分药物或其药学上可接受的盐或溶剂化物。

在组合物试剂盒中，可以以合适的顺序、分开和/或同时给药的形式提供组分。

“组合物试剂盒”还可配置说明书，如剂量和给药说明。这种剂量和给药说明可以是提供给医生的那种，例如通过药品标签，或者它们可以是由医生提供的那种，例如给患者的说明。

根据另一个实施方案，描述了一种用于治疗有需要的受试者中与HER1、HER2或HER4或者HER1、HER2或HER4的突变体的过表达或扩增相关的肿瘤的方法，其中在进行本文所述的合适的联合疗法之前，确定受试者EGFR的基因型和/或表型状态，如HER1、HER2、HER4。在另一个实施方案中，受试者HER1、HER2和HER4的这种状态可以通过合适的免疫组织化学或原位再杂交方法(in-situ rehybridization methodologies)来确定。在另一个实施方案中，本发明还提供了一种治疗有患HER1、HER2或HER4或者HER1、HER2或HER4突变体的过表达或扩增相关病症风险的人类患者的方法，首先确定该人类患者个体对HER1、HER2或HER4突变体的易感性，然后给药本文所述的治疗有效组合物。

现在将参考以下实施例更详细地描述一个或多个实施方案。然而，这些实施例并不旨在限制一个或多个实施方案的范围。

实施例1：细胞生长抑制试验和组合物数据分析

在EGFR过表达或突变的癌细胞系中测试本发明组合物对癌细胞生长抑制的效果。

1.细胞系和细胞生长条件以及单个化合物及其组合物的IC50测定

癌细胞和细胞生长条件的信息如下表1所示。

表1

ER：雌激素受体；PR：孕激素受体；HER2：人类表皮生长因子受体2；HER1：人类表皮生长因子受体1；PIK3CA：磷脂酰肌醇3-激酶(phosphoinositide-3-kinase)、催化剂、α多肽；PTEN：同源性磷酸酶；+：阳性(过表达)；-：阴性；m：突变体；ATCC：美国模式菌种收集中心(American Type Culture Collection)；FBS：胎牛血清。

除H1975外，所有细胞在细胞铺板前均培养72小时。细胞以4–15×10

2.细胞生长抑制(CI)的测量

基于细胞蛋白含量测量的细胞生长抑制率根据“Nat Protoc.2006；1(3),1112-6”通过硫罗丹明B比色法测定。540nm下的吸光度在SpectraMax

在用测试试剂或测试试剂组合物处理培养时间(2–3天)并将信号与用介质(DMSO)处理的细胞进行比较后，估算细胞生长抑制率。细胞生长率(％)通过以下方程计算。

生长抑制百分比的计算方法是:

a.[(Ti-Tz)/(C-Tz)]×100，对于Ti＝Tz的浓度

b.[(Ti-Tz)/Tz]×100，对于Ti＜Tz的浓度

每个T值表示吸光度。Tz：时间零点(测试组治疗前的细胞密度组)，C：用测试试剂100％控制生长，Ti：在浓度水平的药物存在下测试生长。GI

使用CalcusynTM Software通过组合指数评价组合效果的影响。表2描述了两种化合物的组合指数(CI)范围。

表2

3.结果

表3a-3f总结了每种单一药剂和联合作用(CI)对体外细胞生长的生长抑制作用。

表3a

表3b

表3c

表3d

表3e

表3f

使用GraphPad Prism

表4总结

实施例2：对选定细胞系的细胞增殖的协同作用研究

在该实施例中，评估了波齐替尼单独或与其他药物组合治疗选定癌细胞系Calu-3、BT-474和SK-BR-3的直接细胞杀伤效果。

1.细胞系和细胞生长条件以及单个化合物及其组合物的IC50测定。

所有细胞在列出的温度为37℃、5％CO

以下提供了每个单一方案和组合方案的生长抑制效果。

表6(a)

表6(b)

表6(c)

在Calu-3、BT-474和SK-BR-3细胞系上检测了代表多种作用机理的单个测试化合物的细胞抑制活性。波齐替尼在三种细胞系中均表现出更大的细胞增殖抑制潜能，其中Calu-3的IC50为0.001M至0.009M，BT-474的IC50小于0.0015M和0.001M，SK-BR-3的IC50为0.001M。对于Calu-3细胞系，索拉非尼、坦罗莫司、曲美替尼的IC50分别为4.475、0.167和0.042M，而BT-474对来曲唑、帕博西尼和曲美替尼治疗显示出弱响应或无响应。培美曲塞对这两种细胞无效，而T-DM1最具响应性，Calu-3的IC50为90.449g/mL，SK-BR-3的IC50小于0.030g/mL。

2.细胞生长抑制率(CI)的测量

在用测试试剂或测试试剂的组合物处理培养时间(2–3天)并将信号与用介质(DMSO)处理的细胞进行比较后，估算细胞生长抑制率。细胞生长率(％)通过以下方程计算。

同时使用Bliss independence model和Lowewe additivity model计算生长抑制百分比。高于5分表示协同，低于-5分表示拮抗。

表5

3.结果

Calu-3、BT-474或SK-BR-3细胞系分别用下表所示的与第二种化合物组合的波齐替尼在6×6组合基质中在37℃、5％CO

表6(d)

表6(e)

下表示出了选定癌细胞系的两种化合物组合物的CI值(或细胞存活率表)。

表6(f)Calu-3:波齐替尼+索拉菲尼

表6(g)Calu-3:波齐替尼+坦罗莫司

表6(h)Calu-3:波齐替尼+曲美替尼

图8(A)和(B)示出了波齐替尼和培美曲塞或来曲唑组合物对Calu3细胞系的影响。

表6(i)Calu-3:波齐替尼+T-DM1

表6(j)BT474:波齐替尼+帕博西尼

表6(k)BT474:波齐替尼+曲美替尼

表6(l)BT474:波齐替尼+培美曲塞

表6(m)SK-BR-3:波齐替尼+T-DM1

本研究旨在进一步评估上述组合物对Calu-3、BT-474和SK-BR-3细胞系的可能的协同作用。从使用组合指数(CI)的分析来看，大多数组合物都表现出协同作用，特别是在两种测试化合物分别处于中等浓度范围进行处理时。

4.讨论

如上表所示，根据一个实施方案，波齐替尼和另一种药物的组合物在对乳腺癌、胃癌、肺癌或食管癌细胞的生长抑制试验中表现出协同作用，其中HER1或HER2基因过表达或突变。

在非小细胞肺癌(NSCLC)的情况下，在具有外显子19del突变(一种Her1激活突变)的HCC827细胞中，波齐替尼与紫杉醇或顺铂联合给药时，表现出优异的协同作用。当波齐替尼与5-FU联合时，在相同的测试条件下未观察到协同作用。在H1975细胞(即一种由于存在T790M突变体而具有对第一代EGFRTKIs的耐药性的细胞系)中，当波齐替尼以等于或低于单独使用波齐替尼的GI

在乳腺癌的情况下，当波齐替尼与紫杉醇、顺铂或5-FU联合用于BT-474细胞(其是Her2过表达的且对雌激素受体(ER)呈阴性)中时，具有高协同作用。当波齐替尼与曲妥珠单抗联合时，在等于或低于单独使用波齐替尼的GI

此外，在MDA-MB-468细胞中通过给药某些浓度的波齐替尼和长春瑞滨的组合物，观察到了协同作用，所述MDA-MB-468细胞为HER2阴性、ER阴性和HER1过表达的三阴性乳腺癌细胞。在MBA-MB-453细胞(其是曲妥珠单抗耐药的乳腺癌细胞中HER2过表达的细胞)中，当紫杉醇、5-FU、顺铂或曲妥珠单抗与波齐替尼联合时，在等于或低于单独的波齐替尼的GI

在TE细胞(一种HER2过表达的食管癌细胞系)中，当波齐替尼与5-FU联合时，波齐替尼与其他药物联合给药的协同作用也是很好的。此外，在N-87细胞(一种HER2过表达的胃癌细胞系)中，当波齐替尼与曲妥珠单抗联合给药时，在某些浓度下观察到了协同作用。

这些结果表明，根据一个实施方案，波齐替尼和其它靶向抗癌剂或细胞毒性抗癌剂的组合物对癌症如乳腺癌、胃癌、肺癌和食管癌非常有效，并且可以有效抑制对常规治疗剂有耐药性的癌症。已经证实，根据一个实施方案的组合物甚至对于不具有HER1或HER2过表达或其突变体的癌细胞也是有效的。

如上所述，根据一个或多个实施方案，提供了一种用于治疗与受试者中HER1、HER2和HER4中的至少一种基因或者HER1、HER2或HER4的突变体的过表达或扩增相关的肿瘤的组合药物，并且所述组合药物可用于有效治疗肿瘤。

根据另一个实施方案，提供了一种用于治疗与受试者中HER1、HER2和HER4中的至少一种基因或者HER1、HER2或HER4的突变体的过表达或扩增相关的肿瘤的方法；当所述方法用于有此需要的患者时，肿瘤可以得到有效治疗。

根据另一个实施方案，一种用于治疗与受试者中HER1、HER2和HER4中的至少一种基因或者HER1、HER2或HER4的突变体的过表达或扩增相关的肿瘤的组合物试剂盒和药物组合物可用于有效治疗肿瘤。

本发明的其他方面包括作为活性成分的波齐替尼与至少一种细胞毒剂和/或至少一种分子靶向剂的组合物的新型组合物和药物方案，其中至少一种细胞毒剂选自紫杉烷、碱基类似物、铂类抗肿瘤药物和长春花生物碱；并且其中所述至少一种分子靶向剂选自至少一种表皮生长因子受体(EGFR)家族抑制剂。EGFR家族抑制剂可以是抗EGFR家族抗体。所述组合物可以包含波齐替尼和抗EGFR家族抗体，其中抗EGFR家族抗体可以是曲妥珠单抗、margetuximab西妥昔单抗、马妥珠单抗、帕尼单抗、耐昔妥珠单抗或帕妥珠单抗。表皮生长因子受体(EGFR)家族抑制剂可以是mTOR抑制剂。所述组合物可以包含波齐替尼和紫杉烷。紫杉烷可选自紫杉醇、多西他赛和卡巴他赛。所述组合物可以包含波齐替尼和碱基类似物。碱基类似物可选自5-氟尿嘧啶、6-巯基嘌呤、卡培他滨、吉西他滨、培美曲塞、甲氨蝶呤、克拉屈滨、阿糖胞苷、多西氟尿啶、氟尿苷、氟达拉滨和达卡巴嗪。所述组合物可包含波齐替尼和铂类抗肿瘤药物。铂类抗肿瘤药物可选自顺铂、卡铂、二环铂、依铂、洛铂、米铂、奈达铂、奥沙利铂、吡铂和沙铂。所述组合物可包含波齐替尼和长春花生物碱。长春花生物碱可选自长春碱、长春新碱、长春氟宁、长春瑞滨、长春胺醇、长春布宁、长春内日啶和长春地辛。mTOR抑制剂选自佐他莫司、乌米莫司、坦罗莫司、西罗莫司、西罗莫司NanoCrystal、西罗莫司TransDerm、西罗莫司-PNP、依维莫司、biolimus A9、ridaforolimus、雷帕霉素、TCD-10023、DE-109、MS-R001、MS-R002、MS-R003、Perceiva、XL-765、奎纳克林、PKI-587、PF-04691502、GDC-0980、dactolisib、CC-223、PWT-33597、P-7170、LY-3023414、INK-128、GDC-0084、DS-7423、DS-3078、CC-115、CBLC-137、AZD-2014、X-480、X-414、EC-0371、VS-5584、PQR-401、PQR-316、PQR-311、PQR-309、PF-06465603、NV-128、nPT-MTOR、BC-210、WAY-600、WYE-354、WYE-687、LOR-220、HMPL-518、GNE-317、EC-0565、CC-214、ABTL-0812及其药学上可接受的盐或其组合物。所述至少一种细胞毒剂可选自紫杉醇、顺铂、5-氟尿嘧啶、长春瑞滨以及它们任意的组合物。所述至少一种分子靶向剂可选自西妥昔单抗、曲妥珠单抗和它们的任意组合物。所述组合药物可选自以下：(A)波齐替尼和紫杉醇；(B)波齐替尼和顺铂；(C)波齐替尼和5-氟尿嘧啶；(D)波齐替尼和紫杉醇；(E)波齐替尼和曲妥珠单抗；和(F)波齐替尼和长春瑞滨。

对于组合药物方案，肿瘤可选自非小细胞肺癌、乳腺癌、胃癌、结肠癌、胰腺癌、前列腺癌、骨髓瘤、头颈癌、卵巢癌、食管癌和转移性细胞癌。肿瘤可选自非小细胞肺癌、乳腺癌、胃癌和食管癌。肿瘤可以选自：(i)携带选自外显子19中L858R取代、T790M取代和/或缺失的一个或多个EGFR突变体，和/或选自外显子20中A763、A767、S768、V769、D770、N771、P772和H773取代和/或缺失的一个或多个EGFR突变体的非小细胞肺癌；(ii)伴随HER1和/或HER2过表达的雌激素受体阴性乳腺癌；(iii)伴随HER2表达但不过表达的雌激素受体和孕激素受体双阳性乳腺癌；(iv)伴随HER2过表达的曲妥珠单抗耐药乳腺癌；(v)HER2、孕激素受体和雌激素受体三阴性的HER1过表达乳腺癌；(vi)伴随HER2过表达的食管癌；和(vii)伴随HER2过表达的胃癌。

组合药物和待治疗的肿瘤可选自：(1)波齐替尼和紫杉醇，用于治疗(a)携带外显子19中L858R取代、T790M取代和/或缺失的EGFR突变体和/或选自外显子20中A763、A767、S768、V769、D770、N771、P772和H773取代和/或缺失的一个或多个EGFR突变体的非小细胞肺癌，(b)伴随HER2过表达的雌激素受体阴性乳腺癌，或(c)伴随HER2过表达的曲妥珠单抗耐药性乳腺癌；(2)波齐替尼和顺铂，用于治疗携带外显子19中L858R取代、T790M取代和/或缺失的EGFR突变体和/或选自外显子20中A763、A767、S768、V769、D770、N771、P772和H773取代和/或缺失的一个或多个EGFR突变体的非小细胞肺癌，(b)伴随HER2过表达的雌激素受体阴性乳腺癌，或(c)伴随HER2过表达的曲妥珠单抗耐药性乳腺癌；(3)波齐替尼和5-氟尿嘧啶，用于治疗(a)伴随HER2过表达的雌激素受体阴性乳腺癌，(b)伴随HER2过表达的曲妥珠单抗耐药性乳腺癌，或(c)伴随HER2过表达的食管癌；(4)波齐替尼和西妥昔单抗，用于治疗携带L858R和T790M的EGFR取代且伴随HER1过表达和/或携带选自外显子20中A763、A767、S768、V769、D770、N771、P772和H773的取代和/或缺失的一个或多个EGFR突变体的非小细胞肺癌；(5)波齐替尼和曲妥珠单抗，用于治疗(a)伴随HER2过表达的曲妥珠单抗耐药乳腺癌或(b)伴随HER2过表达的胃癌；以及(6)波齐替尼和长春瑞滨，用于治疗(a)伴随HER2过表达的雌激素受体阴性乳腺癌，(b)伴随HER2过表达的雌激素受体和孕激素受体双阳性和曲妥珠单抗耐药乳腺癌，(c)HER1和HER2过表达双阴性的雌激素受体和孕激素受体双阳性乳腺癌，或者(d)HER2、雌激素受体和孕激素受体三阴性的HER1过表达的乳腺癌。

本发明的另一个方面涉及一种在需要或有发展成HER1、HER2、过表达癌症的风险的受试者中治疗肿瘤的方法，其中所述方法包括向所述受试者单独或组合给药治疗有效量的作为活性成分的波齐替尼和至少一种细胞毒剂和/或至少一种分子靶向剂方法，其中所述至少一种细胞毒剂选自紫杉烷、碱基类似物、铂类抗肿瘤药和长春花生物碱；和其中所述至少一种分子靶向剂选自表皮生长因子受体(EGFR)家族抑制剂和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)抑制剂。所述方法的至少一种细胞毒剂可以选自紫杉醇、顺铂、5-氟尿嘧啶、长春瑞滨及其任意的组合物。所述方法的至少一种分子靶向剂可以选自西妥昔单抗、曲妥珠单抗及其任意的组合物。单独或组合给药可以选自以下：(a)波齐替尼和紫杉醇；(b)波齐替尼和顺铂；(c)波齐替尼和5-氟尿嘧啶；(d)波齐替尼和西妥昔单抗；(e)波齐替尼和曲妥珠单抗；(f)波齐替尼和长春瑞滨。所述方法的肿瘤可以是非小细胞肺癌、乳腺癌、胃癌、结肠癌、胰腺癌、前列腺癌、骨髓瘤、头颈癌、卵巢癌、食管癌或转移性细胞癌。肿瘤可选自非小细胞肺癌、乳腺癌、胃癌和食管癌。肿瘤可选自：(i)携带选自外显子19中L858R取代、T790M取代和/或缺失的一个或多个EGFR突变体，和/或选自外显子20中A763、A767、S768、V769、D770、N771、P772和H773取代和/或缺失的一个或多个EGFR突变体的非小细胞肺癌；(ii)伴随HER1和/或HER2过表达的雌激素受体阴性乳腺癌；(iii)伴随HER2表达但不过表达的雌激素受体和孕激素受体双阳性乳腺癌；(iv)伴随HER2过表达的曲妥珠单抗耐药乳腺癌；(v)HER1、HER2和雌激素受体三阴性的HER1过表达乳腺癌；(vi)伴随HER2过表达的食管癌；和(vii)伴随HER2过表达的胃癌。肿瘤可以选自：(i)携带选自外显子19中的L858R取代、T790M取代和/或缺失的一个或多个EGFR突变体，和/或选自外显子20中的A763、A767、S768、V769、D770、N771、P772和H773取代和/或缺失的一个或多个EGFR突变体的非小细胞肺癌；(ii)伴随HER1和/或HER2过表达的雌激素受体阴性的乳腺癌；(iii)伴随HER2表达但不过表达的雌激素受体和孕激素受体双阳性乳腺癌；(iv)伴随HER2过表达的曲妥珠单抗耐药乳腺癌；(v)HER1、HER2和雌激素受体三阴性的HER1过表达乳腺癌；(vi)伴随HER2过表达的食管癌；和(vii)伴随HER2过表达的胃癌。

所述方法的给药和待治疗肿瘤选自：(1)波齐替尼和紫杉醇，用于治疗(a)携带外显子19中的L858R取代、T790M取代和/或缺失的EGFR突变体，和/或选自外显子20中A763、A767、S768、V769、D770、N771、P772和H773的突变和/或缺失的一个或多个EGFR突变体的非小细胞肺癌，(b)伴随HER2过表达的雌激素受体阴性乳腺癌，或(c)伴随HER2过表达的曲妥珠单抗耐药乳腺癌；(2)波齐替尼和顺铂，用于治疗(a)携带外显子19中L858R取代、T790M取代和/或缺失的EGFR突变体，和/或选自外显子20中的A763、A767、S768、V769、D770、N771、P772和H773取代和/或缺失的一个或多个EGFR突变体的非小细胞肺癌，(b)伴随HER2过表达的雌激素受体阴性乳腺癌，或(c)伴随HER2过表达的曲妥珠单抗耐药乳腺癌；(3)波齐替尼和5-氟尿嘧啶，用于治疗(a)伴随HER2过表达的雌激素受体阴性乳腺癌，(b)伴随HER2过表达的曲妥珠单抗耐药乳腺癌，或(c)伴随HER2过表达的食管癌；(4)波齐替尼和西妥昔单抗，用于治疗携带L858R和T790M的EGFR替代并伴随有HER1过表达和/或携带选自外显子20中的A763、A767、S768、V769、D770，N771，P772和H773的取代和/或缺失的一个或多个EGFR突变体的非小细胞肺癌；(5)波齐替尼和曲妥珠单抗，用于治疗(a)伴随HER2过表达的曲妥珠单抗耐药乳腺癌，或(b)伴随HER2过表达的胃癌；(6)波齐替尼和长春瑞滨，用于治疗(a)伴随HER2过表达的雌激素受体阴性乳腺癌，(b)伴随HER2过表达的雌激素受体和孕激素受体双阳性和曲妥珠单抗耐药乳腺癌，(c)HER1和HER2的过表达双阴性的雌激素受体和孕激素受体双阳性乳腺癌，或者(d)HER2、雌激素受体和孕激素受体三阴性的HER1过表达的乳腺癌。

本发明的另一方面涉及一种用于治疗受试者的肿瘤的试剂盒，所述试剂盒包含第一部分和第二部分，其中第一部分包含波齐替尼，第二部分包含选自细胞毒剂和分子靶向剂的至少一种活性成分，其中至少一种细胞毒剂选自紫杉烷、碱基类似物、铂类抗肿瘤药和长春花生物碱；其中至少一种分子靶向剂选自表皮生长因子受体(EGFR)家族抑制剂和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)抑制剂的。试剂盒可以进一步包含药品说明书，所述药品说明书包含用于治疗受试者中与HER1、HER2或HER4或其突变体的过表达或扩增相关的肿瘤的说明。

应该理解，本文所述的实施方案应仅视为示例性的，而不限制本发明的范围。每个实施方案中的特征或方面的描述通常应被认为可用于其他实施方案中的其他类似特征或方面。尽管已经参考附图描述了一个或多个实施方案，但是本领域普通技术人员将理解，可以在不脱离如权利要求书限定的本发明的精神和范围的情况下对形式和细节进行各种改变。