检测靶点数多于荧光通道数的实时PCR技术及其应用

摘要

本发明公开了检测靶点数多于荧光通道数的实时PCR技术，在PCR仪的多个荧光通道中存在：1)至少有一个荧光通道检测两种以上的待测靶点；2)至少有一个靶点被两个以上的荧光通道所检测；3)至少有一个荧光通道检测26％以上的待测靶点；以及4)至少有一个荧光通道所检测的靶点数与其他荧光通道所检测的靶点数不相同。本发明通过采用单一荧光通道检测不同基因序列片段和不同通道检测不同基因片段的不同比例关系，在需要使用内参时，避免了必须内参使用非靶点序列和内参需要单独占用一个荧光通道的缺点，并可增加不同比例不同序列内参以提高检测特异性和防污染能力。