核酸内切酶SpCas9的高PAM兼容性截短型变异体txCas9及其应用

摘要

本发明属于蛋白质工程技术领域，具体为一种来源于酿脓链球菌的CRISPR核酸酶SpCas9的高PAM兼容性截短型变异体txCas9及其应用。本发明中的高PAM兼容性截短型变异体txCas9核酸酶属于CRISPR‑Cas9系统。txCas9核酸酶是将高PAM兼容性xCas9核酸酶的第180位到299位的氨基酸截掉后重组所得。该高PAM兼容性截短型变异体txCas9不仅具有与野生型CRISPR‑Cas9核酸酶相当的基因编辑活性，而且能够识别NGN、GAA、GAT PAM，有效扩宽了CRISPR‑Cas9核酸酶的靶向范围。重要的是，该小型化Cas9核酸酶适合使用装载容量有限的腺病毒载体进行体内运输，因而在生物医药的体内精准编辑方面具有更大的应用潜力。