一种起搏器囊袋定植细菌的16SrRNA基因序列分析方法

摘要

本发明涉及一种起搏器囊袋定植细菌的16SrRNA基因序列分析方法，包括以下步骤：S1、囊袋组织标本获取；S2、装置表面生物膜标本获取；S3、细菌基因组DNA的提取；S4、16S rRNA基因的PCR扩增；S5、PCR产物的纯化：使用PCR产物纯化试剂盒纯化回收；S6、PCR产物的连接：将PCR纯化产物与pGEM‑T Easy载体连接反应参照PCR纯化产物与T‑A载体的连接反应体系；S7、重组质粒的转化、克隆；S8、重组质粒的提取；S9、质粒的酶切鉴定；S10、序列测定；S11、序列比对。本发明首次将细菌16S rRNA基因(即rDNA)序列分析技术应用到起搏器囊带定植细菌的鉴定，显著提高起搏器更换的患者体内的囊袋组织及脉冲发生器表面的定植细菌检出的敏感性和特异性。