一种钙黄绿素可视化LAMP检测肺炎克雷伯菌的检测反应体系

摘要

本发明公开了一种钙黄绿素可视化LAMP检测肺炎克雷伯菌的检测反应体系，在25μL的反应体积中包括试剂：10×thermosol Buffer，dNTPs，甜菜碱，MgSO4，内引物对，环引物对，外引物对，钙黄绿素，MnCl2，Bst聚合酶，DNA模板，RNase‑free water。该检测反应体系具有良好的特异性，且与LAMP琼脂糖凝胶电泳检测方法的敏感性一致，但比PCR方法敏感100倍；在反应前加入钙黄绿素和锰离子，反应产物直接肉眼观察颜色变化即可判断反应结果，无需经过琼脂糖凝胶电泳检测。可以看出，钙黄绿素可视化LAMP方法具有特异性强、灵敏高、操作简单、产物易检测等优点，反应只需要一个恒温水浴锅即可完成检测，适用于基层养殖场对病原菌的快速检测。