一种分离提纯小鼠肿瘤组织浸润CD4+CD25+调节性T细胞的方法

摘要

本发明属于细胞分选领域，具体是一种分离提纯小鼠肿瘤组织浸润CD4+CD25+调节性T细胞的分离纯化方法。具体包括以下步骤：(1)肿瘤组织单细胞悬液的制备：称取肿瘤组织0.2g，剪成小块后放入组织研磨器内，加入5mL组织匀浆液0℃匀浆2min，经200目滤网过滤，收集滤液，250g 20℃垂直离心机内离心15min，弃上清留沉淀，用2mL含有80％的胎牛血清样本稀释液重悬沉淀成单细胞悬液，计数使用样本稀释液调节浓度为1×108个/mL；(2)小鼠肿瘤组织浸润淋巴细胞分离；(3)CD4+CD25+调节性T细胞的免疫磁珠分选，收集所得细胞即为CD4+CD25+Treg。本发明方法首次使用肿瘤组织制备单细胞悬液，最终获得的CD4+CD25+Treg纯度达到86.5％。