芫花及芫花素防治蜜蜂小蜂螨的应用

摘要

小蜂螨(Tropilaelaps spp.)是亚洲地区蜜蜂科(Apidae)的重要害螨，本发明公开了芫花及芫花素防治蜜蜂小蜂螨的应用，杀螨成分芫花和芫花素为植物组织和植物提取物，对蜂产品更环保，无污染，对蜜蜂成蜂、幼蜂、卵、蜂王安全；采用超微粉碎使芫花粉剂和芫花素粉剂粒度更细，有效成分利用率更高，在防治蜜蜂小蜂螨的效果比升华硫的效果更优。

说明书

技术领域

本发明涉及蜜蜂病害防治领域，具体涉及芫花及芫花素防治蜜蜂小蜂螨的应用。

背景技术

小蜂螨(Tropilaelaps spp.)是亚洲地区蜜蜂科(Apidae)的重要害螨。其繁殖快、携播期短，是一种比大蜂螨(Varroa destructor)危害性更大的蜜蜂外寄生虫。小蜂螨原始寄主是大蜜蜂(Apis dorsata)，但是也能转移寄主，感染蜜蜂科的西方蜜蜂(A.Mellifera)、黑大蜜蜂(A.laboriosa)和小蜜蜂(A.Florea)。

目前国内用于防治蜜蜂小蜂螨的最常见药剂有两类：一类是粉剂产品，主要有升华硫粉和复方升华硫粉；一类是水剂产品，主要有双甲脒。

其中，采用升华硫粉和复方升华硫粉防治小蜂螨，需将药粉均匀地撒在蜂路和框梁上，也可直接涂抹于封盖子脾上，但存在以下问题：

1)粉剂粒度较粗，药物利用率不高；

2)长期使用，防效会有所降低，粉剂用量需加大；

3)对蜜蜂有一定的毒害作用，主要表现在卵不孵化、蜂王不产卵等。

采用水剂产品双甲脒防治小蜂螨，需把蜂箱内所有蜂脾逐一提出进行喷雾治螨，但存在以下问题：

1)逐一进行喷雾操作，费工费时；

2)防治效果相对于粉剂产品差；

3)双甲脒对人毒性更大，残留会影响蜂产品品质。欧盟已禁用于蜜蜂上。

芫花，别名：药鱼草、老鼠花、闹鱼花、头痛花、闷头花、头痛皮、石棉皮、泡米花、泥秋树、黄大戟、蜀桑、鱼毒，拉丁文名：Daphne genkwa Sieb.et Zucc.瑞香科、瑞香属落叶灌木，高0.3～1米，多分枝；树皮褐色，无毛；小枝圆柱形，细瘦，干燥后多具皱纹，幼枝黄绿色或紫褐色，密被淡黄色丝状柔毛，老枝紫褐色或紫红色，无毛。叶对生，稀互生，纸质，卵形或卵状披针形至椭圆状长圆形，先端急尖或短渐尖，基部宽楔形或钝圆形，边缘全缘，上面绿色，干燥后黑褐色，下面淡绿色，干燥后黄褐色，幼时密被绢状黄色柔毛，老时则仅叶脉基部散生绢状黄色柔毛，花柱短或无，柱头头状，橘红色。果实肉质，白色，椭圆形，包藏于宿存的花萼筒的下部，花期3～5月，果期6～7月。主要利用芫花的花蕾。

芫花素，化学名称4H-Benzopyran-4-one,5-hydroxy-2-(4-hydroxyphenyl)，系统命名5,4'-二羟基-7-甲氧基黄酮，分子式C₁₆H₁₂O₅。分子量284.26。1932年由中国药物学家曾广方首先从瑞香料植物芫花中分离得到。芫花素为淡黄色针状结晶，熔点293～296℃；其全乙酰化合物熔点200℃；全甲基化合物熔点156℃。芫花素易溶于甲醇、乙醇和丙酮，难溶于水、氯仿、苯和石油醚。

芫花和芫花素的作用以药用为主，也有报道有杀虫杀菌的活性，如CN100466911C，采用芫花有效部位加入表面活性剂、乳化剂、渗透剂、增效剂等制成植物杀螨剂，用于防治果树、蔬菜等经济作物上；CN101336648B，按苦参浓缩液、藜芦浓缩液、芫花浓缩液复配乳油，制成杀虫剂，对农作物果树、蔬菜上的粘虫、蚜虫、食心虫、红蜘蛛、菜青虫、利木虱、叶螨等具有明显的防效功能。

将芫花和芫花素用于蜜蜂病虫害的防治，尤其是小蜂螨的防治尚未见报道。

发明内容

本发明的目的在于：克服现有防治蜜蜂小蜂螨最常见药剂存在的缺陷，提供一种芫花及芫花素防治蜜蜂小蜂螨的应用，与现有技术相比，该种方法可解决药剂对蜜蜂的毒害影响，提高小蜂螨的防治效果，不影响蜂产品的品质。

本发明通过下述技术方案实现：

本发明提供一种芫花在蜜蜂小蜂螨防治中的应用方法。尤其是，将芫花制备成芫花粉剂用于蜜蜂小蜂螨防治。

所述芫花粉剂的制备方法包括以下步骤：

1)初粉碎：芫花加入粉碎机进行初步粉碎；

2)过筛：将已初粉碎的芫花过60目筛，去除絮状物；

3)超微粉碎：通过超微粉碎得到粉末粒度D90≤23微米的芫花粉剂。

其中，所述芫花粉剂的制备方法还包括升华硫粉混合步骤。所述芫花粉剂中芫花的质量含量为10～90％，升华硫的质量含量90％～10％。所述芫花粉剂的制备方法包括以下步骤：

1)初粉碎：芫花加入粉碎机进行初步粉碎；

2)过筛：将已初粉碎的芫花过60目筛，去除絮状物；

3)升华硫粉混合：过筛后芫花加入升华硫粉混合；

4)超微粉碎：通过超微粉碎得到粉末粒度D90≤23微米的芫花粉剂。

芫花经初粉碎、乙醇提取、过滤浓缩、萃取、蒸馏回收、萃取浓缩、柱层析、浓缩结晶等过程可获取得到芫花素。芫花素是芫花防治蜜蜂小蜂螨的应用的主要组分，因此本发明还提供了一种芫花素在蜜蜂小蜂螨防治中的应用。尤其是芫花素粉剂在蜜蜂小蜂螨防治中的应用。

所述芫花素粉剂的制备方法包括以下步骤：

1)芫花素预混料：将芫花素、柠檬酸、滑石粉按顺序加入混合设备，混合时间不少于60min；

2)芫花素粉料：将上述芫花素预混料、白炭黑、滑石粉按顺序加入混合设备，混合时间不少于60min，得到芫花素粉料；

3)芫花素粉剂：将上述芫花素粉料进行超微粉碎，得到粉末粒度D90≤23微米的芫花素粉剂。

所述芫花素粉剂中芫花素的质量含量为1～10％。

所述芫花素粉剂中还添加有升华硫。含有升华硫的芫花素粉剂制备方法包括以下步骤：

1)芫花素预混料：将芫花素、柠檬酸、升华硫按顺序加入混合设备，混合时间不少于60min；

2)芫花素粉料：将上述芫花素预混料、白炭黑、升华硫按顺序加入混合设备，混合时间不少于60min，得到芫花素粉料；

3)芫花素粉剂：将上述芫花素粉料进行超微粉碎，得到粉末粒度D90≤23微米的芫花素粉剂。

所述含有升华硫的芫花素粉料，其中，芫花素的质量含量为1～10％，升华硫的质量含量83％～74％。

所述芫花粉剂和芫花素粉剂的投放方式为撒蜂路和框梁，也可直接涂抹于封盖子脾上。

本发明与现有技术相比，具有以下优点及有益效果：

1)芫花及芫花素应用于防治蜜蜂小蜂螨的效果优良；

2)粉剂的粉末粒度D90≤23微米，其粒度细，有效成分利用率高；

3)芫花及芫花素用于蜜蜂小蜂螨防治中，对蜜蜂成蜂、幼蜂、卵、蜂王安全；

4)杀螨成分芫花和芫花素为植物组织和植物提取物，对蜂产品更环保，无污染。

具体实施方式

本说明书中公开的所有特征，或公开的所有方法或过程中的步骤，除了相互排斥的特质和/或步骤以外，均可以以任何方式组合，除非特别叙述，均可被其他等效或具有类似目的的替代特征加以替换，即，除非特别叙述，每个特征为一系列等效或类似特征中的一个实施例而已。

本发明中所用到的试剂主要如下：对照组杀螨剂，商品名为升华硫，主要成分是升华硫(生产厂家为四川汪氏动物保健有限责任公司)。检查防治效果药剂，主要成分是双甲脒(生产厂家为四川汪氏动物保健有限责任公司)。

实施例1：

芫花粉剂1的制备：

1)初粉碎：将芫花加入粉碎机进行初步粉碎；

2)过筛：将已初粉碎的芫花过60目筛，去除絮状物；

3)超微粉碎：通过超微粉碎得到粉末粒度D90≤23微米的芫花粉剂1。

实施例2：

芫花粉剂2的制备：

1)初粉碎：芫花加入粉碎机进行初步粉碎；

2)过筛：将已初粉碎的芫花过60目筛，去除絮状物；

3)升华硫粉混合：过筛后芫花(质量含量10％)加入升华硫粉(质量含量90％)混合；

4)超微粉碎：在惰性气体保护下，通过超微粉碎得到粉末粒度D90≤23微米的芫花粉剂2。

实施例3：

芫花粉剂3的制备：

1)初粉碎：芫花加入粉碎机进行初步粉碎；

2)过筛：将已初粉碎的芫花过60目筛，去除絮状物；

3)升华硫粉混合：过筛后芫花(质量含量90％)加入升华硫粉(质量含量10％)混合；

4)超微粉碎：在惰性气体保护下，通过超微粉碎得到粉末粒度D90≤23微米的芫花粉剂3。

实施例4：

芫花粉剂4的制备：

1)初粉碎：芫花加入粉碎机进行初步粉碎；

2)过筛：将已初粉碎的芫花过60目筛，去除絮状物；

3)升华硫粉混合：过筛后芫花(质量含量50％)加入升华硫粉(质量含量50％)混合；

4)超微粉碎：在惰性气体保护下，通过超微粉碎得到粉末粒度D90≤23微米的芫花粉剂4。

实施例5：

1％芫花素粉剂的制备：

1)芫花素预混料：

质量含量比：芫花素，20％；柠檬酸，20％；滑石粉，60％。

将芫花素、柠檬酸、滑石粉按顺序加入混合设备，混合时间不少于60min；

2)芫花素粉料：

质量含量比：芫花素预混料，5％；白炭黑，15％；滑石粉，80％。

将上述芫花素预混料、白炭黑、滑石粉按顺序加入混合设备，混合时间不少于60min，得到芫花素粉料；

3)芫花素粉剂：

将上述芫花素粉料进行超微粉碎，得到粉末粒度D90≤23微米的芫花素粉剂。

实施例6：

2％芫花素粉剂的制备：

1)芫花素预混料：

质量含量比：芫花素(市售，兰州沃特莱斯生物科技有限公司)，20％；柠檬酸，10％；滑石粉，70％。

将芫花素、柠檬酸、滑石粉按顺序加入混合设备，混合时间不少于60min；

2)芫花素粉料：

质量含量比：芫花素预混料，10％；白炭黑，15％；滑石粉，75％。

将上述芫花素预混料、白炭黑、滑石粉按顺序加入混合设备，混合时间不少于60min，得到芫花素粉料；

3)芫花素粉剂：

将上述芫花素粉料进行超微粉碎，得到粉末粒度D90≤23微米的芫花素粉剂。

实施例7：

10％芫花素粉剂的制备：

1)芫花素预混料：

质量含量比：芫花素(芫花中提取)，20％；柠檬酸，2％；升华硫，78％。

将芫花素、柠檬酸、滑石粉按顺序加入混合设备，混合时间不少于60min；

2)芫花素粉料：

质量含量比：芫花素预混料，50％；白炭黑，15％；升华硫，35％。

将上述芫花素预混料、白炭黑、滑石粉按顺序加入混合设备，混合时间不少于60min，得到芫花素粉料；

3)芫花素粉剂：

将上述芫花素粉料在惰性气体保护下进行超微粉碎，得到粉末粒度D90≤23微米的芫花素粉剂。

实施例8：

根据《蜜蜂用杀螨剂药效评价田间试验指导原则》，对本发明提供的芫花粉剂和芫花素粉剂进行小蜂螨的防治效果评价。

试验方法：

试验蜂群由四川汪氏动物保健有限责任公司试验蜂场提供，选取群势一致(6脾)、小蜂螨寄生水平一致的蜂群分为8组，每组20群，分别为试验组1(芫花粉剂1)、实验组2(芫花粉剂2)、实验组3(芫花粉剂3)、实验组4(1％芫花素粉剂组)、实验组5(2％芫花素粉剂组)、实验组6(10％芫花素粉剂组)、阳性对照组7(升华硫组)和阴性对照组8(不用药)，蜂种为意大利蜜蜂。

用药方法：蜂群每隔7天用药一次，一个周期用药三次，21天后使用双甲脒喷蜂脾。

试验开始后，每天检查收集底板落螨，试验开始前、第22天和第43天定一次群(分别记录卵、幼虫、蜂盖子、成年蜂(足框)的数量)，试验开始前、第22天和第43天调查封盖子内小蜂螨寄生率。

封盖子内小蜂螨寄生率：从蜂群内不同的子脾区域随机用镊子挑开100个封盖子，夹出封盖房中的蜜蜂幼虫或蛹，统计有小蜂螨的封盖房数目。

封盖子内小蜂螨寄生率(％)＝(有螨的封盖房数/检查的封盖房总数)×100％

落螨率计算：

落螨数量：给药后每天观察一次落螨板，收集并统计落螨数量(a)，统计试验结束时的总落螨数(∑a)

统计最后落螨数量：试验结束时，各试验组蜂群分别用过量的双甲脒喷脾，分别统计最后落螨数量(b)。将此数量(b)加各蜂群总落螨数(∑a)，作为蜂群总螨数，分别计算各试验组蜂群的落螨率。

试验结果：

落螨率结果见下表：

寄生率结果见下表：

项目用药前平均寄生率％用药后第22天平均寄生率％用药后第43天平均寄生率％芫花粉剂15.11.10.9芫花粉剂26.21.41.6芫花粉剂35.80.90.81％芫花素粉剂5.41.91.82％芫花素粉剂4.90.80.710％芫花素粉剂5.70.50.4升华硫5.31.51.4阴性对照6.17.23.8

群势调查结果见下表：

结论：

根据《蜜蜂用杀螨剂药效评价田间试验指导原则》，对本发明提供的芫花粉剂和芫花素粉剂进行小蜂螨的防治效果评价，结果为：芫花粉剂1、芫花粉剂2、芫花粉剂3和1％、2％、3％芫花素粉剂的平均落螨率和寄生率均优于升华硫粉剂，蜂群的群势情况来看，结果也优于升华硫粉剂。因此，采用芫花粉剂和芫花素粉剂对小蜂螨的防治效果良好，并对蜜蜂安全。

以上所述，仅是本发明的较佳实施例，并非对本发明做任何形式上的限制，凡是依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化，均落入本发明的保护范围。