提高转基因丹参中阳性率的方法

摘要

本发明涉及一种提高转基因丹参中阳性率的方法，应用根癌农杆菌介导的叶盘转化法操作简便、重复性高、能快速、有效获得转基因丹参植株。目前丹参植株遗传转化体系多采用卡那霉素进行筛选，但本实验室在对已经完成测序工作的99‑3品系的丹参进行遗传转化研究中发现99‑3丹参叶片对卡那霉素敏感，用它做筛选抗生素时叶片生长容易停止，实验重现性差。本方法采用50mg/L Hyg进行筛选时，不仅获得了阳性转基因植株，而且阳性率极高，接近100％。上述方法建立了一种以丹参叶片作为外植体，通过根癌农杆菌的遗传转化法将携带外源质粒转入丹参外植体中的高效可靠、简便的丹参植株提高阳性率的方法。