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快速筛选单拷贝转基因后代纯合家系的方法及应用

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本发明属于植物转基因领域，涉及一种快速筛选单拷贝转基因后代纯合家系的方法。利用农杆菌介导的遗传转化方法转化载体，用southern筛选阳性单拷贝转化植株，从T0代转基因株上收种子，播于苗床，取三叶期叶片，CTAB法抽提小样总DNA，以外源目的基因潮霉素和内源G3PDH基因设计real-time PCR引物；利用外源目的基因和內源基因的引物对小样DNA进行real-time PCR，比较计算外源目的基因和內源基因的扩增Ct值来判断转基因株的基因型；T1代结实以后通过发芽再次检测转基因株基因型，比较上述两个转基因株基因型是否吻合，选两个基因型都能吻合材料作为转基因育种或杂交转育或多基因聚合育种材料。

著录项

公开/公告号CN105803046A

专利类型发明专利
公开/公告日2016-07-27

原文格式PDF
申请/专利权人华中农业大学;
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申请/专利号CN201410833434.X
发明设计人林拥军;陈太钰;
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申请日2014-12-29
分类号
代理机构武汉宇晨专利事务所;
代理人张红兵
地址 430070 湖北省武汉市洪山区狮子山街1号
入库时间 2023-06-19 00:08:08

法律信息

法律状态公告日

法律状态信息

法律状态
2020-05-01

发明专利申请公布后的驳回 IPC(主分类):C12Q1/68 申请公布日:20160727 申请日:20141229

发明专利申请公布后的驳回
2016-08-24

实质审查的生效 IPC(主分类):C12Q1/68 申请日:20141229

实质审查的生效
2016-07-27

公开

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2. 一种快速获得抗除草剂的转基因高粱纯合植株的方法 [P] . 中国专利： CN106967746A . 2017-07-21
3. method for the preparation of sorghum differentiation embryogenic callus tissue, method of producing a genetically modified sorghum cell, method of producing a genetically modified sorghum plant or regenerative part thereof, method of producing offspring of a sorghum plant genetically modified, genetically modified sorghum plant, offspring or part thereof produced using a method, culture medium suitable for use in the preparation of sorghum-differentiating embryogenic callus tissue and sorghum-differentiating embryogenic callus tissue [P] . BR112018075587A2 . 2019-03-19

机译：高粱分化胚性愈伤组织的制备方法，转基因高粱细胞的生产方法，转基因高粱植物或其再生部分的生产方法，转基因高粱植物的后代，转基因高粱植物的后代，后代或使用适于制备高粱分化胚性愈伤组织和高粱分化胚性愈伤组织的方法的培养基
4. Preparation of isolated protein, substantially pure or recombinant, isolated trt protein, substantially pure or recombinant isolated trt protein, substantially pure or recombinant, isolated trt protein or a variant thereof, or a fragment, polynucleotide, synthetic, substantially pure or recombinant, isolated nucleic acid, encoding a trt protein, expression vector, transfected cell, non-human animal, or its progeny, transgenic non-human animal, antibody or its binding fragment, antibody, specifically immunoreactive under immunologically reactive conditions, for a trt protein or its immunogenic fragment, processes of determining whether a compound or treatment is a modulator of a trt activity or expression, of determining whether a test compound is a modulator of a trt activity, of preparing recombinant telomerase, to detect a trt gene product in a sample, to detect the presence of d and at least one telomerase positive human cell in a biological sample comprising human cells, to diagnos [P] . BR9711844A . 2000-01-18

机译：分离的蛋白质，基本上纯的或重组的分离的trt蛋白，基本上纯的或重组的分离的trt蛋白，基本上纯的或重组的分离的trt蛋白或其变体或片段，多核苷酸，合成的，基本上纯的或重组的分离的核酸的制备编码trt蛋白的酸，表达载体，转染的细胞，非人类动物或其后代，转基因非人类动物，抗体或其结合片段，抗体，在免疫反应条件下对trt蛋白或其免疫原具有特异性片段，确定化合物或处理是否是trt活性或表达的调节剂，确定测试化合物是否是trt活性的调节剂，制备重组端粒酶以检测样品中trt基因产物的过程，检测包含人细胞的生物样品中d和至少一种端粒酶阳性人细胞的存在，以进行诊断
5. Methods for producing a plant with yield increased in comparison with a corresponding wild type plant,To produce a transgenic plant with yield increased as compared to a wild type plant has not been processed corresponding to produce an agricultural composition.To identify a plant with a yield increased, and to increase yield of a plant population, the molecule of nucleic acid nucleic acid isolation, construction, vector,Processes for producing a polypeptide, and to identify a compound, polypeptide, antibody, cell nucleus of plant, plant cell, plant tissue, propagating material, pollen.Offspring, harvested material or plant, seed, plant part, transgenic plant, transgenic plant, cell nucleus of transgenic plant, transgenic plant cell.The plant comprising one or more such nuclei of transgenic plant cell or plant cell, progeny, seed or pollen derived from or produced by a transgenic plant, composition, and,Use of nucleic acids. [P] . BRPI0816880A2 . 2015-09-08

机译：与相应的野生型植物相比产量增加的植物的生产方法，与野生型植物相比产量增加的转基因植物的生产未经过相应的生产农业组合物的鉴定。增加，并增加植物种群的产量，核酸分子的分离，构建，载体，多肽的生产过程以及鉴定化合物，多肽，抗体，植物细胞核，植物细胞，植物组织的分子，繁殖材料，花粉后代，收获的材料或植物，种子，植物部分，转基因植物，转基因植物，转基因植物的细胞核，转基因植物细胞。该植物包含一个或多个这样的转基因植物细胞或植物细胞的核，源自转基因植物，核酸的组合物或核酸产生的后代，种子或花粉。