一种基于EGFP的GADD45β RNA干扰报告载体构建及应用

摘要

本发明构建了一种基于EGFP的GADD45βRNA干扰报告载体及快速筛选siRNA的方法，可用于在细胞水平和活体水平的基因功能研究。本发明通过将GADD45β开放阅读框插入至pEGFP-N1载体中，构建基于EGFP的GADD45βRNA干扰报告载体p-GADD45β-EGFP-N1，GADD45β与EGFP在该载体中融合表达；将该载体分别与合成的GADD45βsiRNA共转染膀胱癌细胞系T24，发现GADD45βsiRNA360和siRNA638的干扰效果最好，比常规的qPCR方法省时省力。该方法可用于在膀胱癌细胞及哺乳动物细胞中快速筛选siRNA，用于基因功能研究。