何首乌或制何首乌的混悬液、提取物在制备治疗抑郁症药物中的应用

摘要

本发明涉及何首乌或制何首乌的混悬液、提取物在制备治疗抑郁症药物中的应用，解决抑郁症的防治问题，技术方案是，将中药何首乌或制何首乌粉碎，加水制成混悬液，混悬液浓度为相当于含生药1g/mL，或将中药何首乌或制何首乌粉碎，用水或20%～75%乙醇的一种按常规方法回流提取所得。在应用时可按本发明中所述混悬液或提取物的制备工艺，并加入常规药用辅料，制成任何一种药学上所称的浓度为相当于含生药1g/mL的浸膏、流浸膏、酒剂、酊剂、口服液或丸剂、散剂、滴丸、片剂或胶囊剂，本发明中药何首乌或制何首乌制成的混悬液或提取物，用于制备治疗抗抑郁症的药物，从而解决抑郁症的防治问题，开辟了何首乌及制何首乌用于防治抑郁症的新用途。

说明书

一、技术领域

本发明涉及医药领域，是中药何首乌或制何首乌抗抑郁作用的新用途，特别是何首乌或制何首乌的混悬液、提取物在制备治疗抑郁症药物中的应用。

二、背景技术

抑郁症是以显著而持久的情绪低落、行为木僵和悲观厌世为主要特征他的一组疾病。实际上它很普通，以致被称为精神疾病中的“普通感冒”，同时它还是严重的、威胁生命的疾病，折磨着世界上数以千万计的人。目前用于治疗抑郁症的药物主要有三环类抗抑郁剂(TCA)、单胺氧化酶(MAO)抑制剂和5-羟色胺(5-HT)再摄取抑制剂，但是均有不同程度的副作用，如嗜睡、视物模糊、高血压、惊厥和性欲低下等，从而限制了其广泛使用。

何首乌是常用补益中药，为蓼科植物何首乌(Polygonum multiflorum Thunb.)的干燥块根。何首乌味苦、甘，涩，性微温。归肝、肾经。生用截疟解毒，润肠通便；制用补益精血。现代研究表明，何首乌主要含有蒽醌类化合物、二苯乙烯苷类化合物、磷脂类化合物等，具有抗衰老，抗氧化，调节机体免疫功能，增强学习记忆能力，抗菌，抗炎等广泛的作用。制何首乌(Polygoni multifloriradix praeparata)为何首乌的炮制加工品，其制法为取何首乌片或块，照炖法(中国药典2010版·一部附录II D)用黑豆汁搅匀，置非铁质的适宜容器内，炖至汁液吸尽；或照蒸法(中国药典2010版·一部附录II D)，清蒸或用黑豆汁拌匀后蒸，蒸至内外均呈棕褐色，或晒至半干，切片，干燥，每100kg何首乌片(块)，用黑豆10kg。制何首乌具有补肝肾、益精血、强筋骨、乌须发、化浊降脂之功效，主要用于血虚萎黄、眩晕耳鸣、须发早白、腰膝酸软、遗精、肢体麻木、崩漏带下、高脂血症，主要成分为二苯乙烯苷和游离蒽醌。结合何首乌、制何首乌的药效及应用，何首乌或制何首乌在一定程度上可能通过滋补肝肾而具有潜在的防治抑郁症的作用。然而，目前尚无关于何首乌或制何首乌的混悬液、提取物在制备治疗抑郁症药物中的应用的公开报导。

三、发明内容

针对上述情况，为克服现有技术之缺陷，本发明之目的就是提供何首乌或制何首乌的混悬液、提取物在制备治疗抑郁症药物中的应用，可有效解决抑郁症的防治问题。

本发明解决的技术方案是，通过研究发现中药何首乌或制何首乌的混悬液、提取物具有较好的抗抑郁症的作用，是较有发展前途的抗抑郁剂，可用于制备治疗抑郁症的药物。本发明中的混悬液或提取物的制备，是将中药何首乌或制何首乌粉碎，加水制成混悬液，混悬液浓度为相当于含生药1g/mL，或将中药何首乌或制何首乌粉碎，用水或20％～75％乙醇的一种按常规方法回流提取所得。在应用时可按本发明中所述混悬液或提取物的制备工艺，并加入常规药用辅料，制成任何一种药学上所称的浓度为相当于含生药1g/mL的浸膏、流浸膏、酒剂、酊剂、口服液或丸剂、散剂、滴丸、片剂或胶囊剂。

本发明中药何首乌或制何首乌制成的混悬液或提取物，用于制备治疗抗抑郁症的药物，从而解决抑郁症的防治问题，开辟了何首乌及制何首乌用于防治抑郁症的新用途，这是中药上的一大创新。

四、具体实施方式

以下结合具体情况和实施例对本发明的具体实施方式作详细说明。

实施例1

由上述发明内容的技术方案中给出，所述的混悬液是采用何首乌或制何首乌的饮片粗粉，分别混悬于蒸馏水，使混悬液以生药计，相当于含何首乌或制何首乌1g/mL。

实施例2

由上述发明内容的技术方案中给出，所述的提取物为：

A-1、制何首乌水提液：采用制何首乌(将生何首乌照中国药典2010版·一部之清蒸法所制)饮片粗粉，每1g制何首乌粗粉加10mL水(W/V＝1∶10)，回流提取3次，每次2h，过滤，合并滤液，回收水，使药液浓度以生药计，相当于含制何首乌1g/mL。

B-1、制何首乌20％乙醇提取液：采用制何首乌(将生何首乌照中国药典2010版·一部之清蒸法所制)饮片粗粉，每1g制何首乌粗粉加10mL的20％乙醇(W/V＝1∶10)，回流提取3次，每次2h，过滤，合并滤液，回收乙醇至无醇味，使药液浓度以生药计，相当于含制何首乌1g/mL。

C-1、制何首乌75％乙醇提取液：采用制何首乌(将生何首乌照中国药典2010版·一部之清蒸法所制)饮片粗粉，每1g制何首乌粗粉加10mL的75％乙醇(W/V＝1∶10)，回流提取3次，每次2h，过滤，合并滤液，回收乙醇至无醇味，使药液浓度以生药计，相当于含制何首乌1g/mL。

D-1、制何首乌95％乙醇提取液：采用制何首乌(将生何首乌照中国药典2010版·一部之清蒸法所制)饮片粗粉，每1g制何首乌粗粉加10mL的95％乙醇(W/V＝1∶10)，回流提取3次，每次2h，过滤，合并滤液，回收乙醇至无醇味，使药液浓度以生药计，相当于含制何首乌1g/mL。

E-1、制何首乌乙酸乙酯提取液：采用制何首乌(将生何首乌照中国药典2010版·一部之清蒸法所制)饮片粗粉，每1g制何首乌粗粉加10mL乙酸乙酯(W/V＝1∶10)，回流提取3次，每次2h，过滤，合并滤液，回收乙酸乙酯至无有机溶媒味，以生药计，相当于含制何首乌1g/mL。

F-1、制何首乌丙酮提取液：采用制何首乌(将生何首乌照中国药典2010版·一部之清蒸法所制)饮片粗粉，每1g制何首乌粗粉加10mL丙酮(W/V＝1∶10)，回流提取3次，每次2h，过滤，合并滤液，回收丙酮至无有机溶媒味，使药液浓度以生药计，相当于含制何首乌1g/mL。

G-1、制何首乌120#汽油提取液：采用制何首乌(将生何首乌照中国药典2010版·一部之清蒸法所制)饮片粗粉，每1g制何首乌粗粉加10mL的120#汽油(W/V＝1∶10)，回流提取3次，每次2h，过滤，合并滤液，回收120#汽油至无有机溶媒味，使药液浓度以生药计，相当于含制何首乌1g/mL。

A-2、生何首乌水提液：采用何首乌块根饮片粗粉，每1g生何首乌粗粉加10mL水(W/V＝1∶10)，回流提取3次，每次2h，过滤，合并滤液，回收水，使药液浓度以生药计，相当于含生何首乌1g/mL。

B-2、生何首乌20％乙醇提取液：采用何首乌块根饮片粗粉，每1g生何首乌粗粉加10mL的20％乙醇(W/V＝1∶10)，回流提取3次，每次2h，过滤，合并滤液，回收乙醇至无醇味，使药液浓度以生药计，相当于含生何首乌1g/mL。

C-2、生何首乌75％乙醇提取液：采用何首乌块根饮片粗粉，每1g生何首乌粗粉加10mL的75％乙醇(W/V＝1∶10)，回流提取3次，每次2h，过滤，合并滤液，回收乙醇至无醇味，使药液浓度以生药计，相当于含生何首乌1g/mL。

D-2、生何首乌95％乙醇提取液：采用何首乌块根饮片粗粉，每1g生何首乌粗粉加10mL的95％乙醇(W/V＝1∶10)，回流提取3次，每次2h，过滤，合并滤液，回收乙醇至无醇味，使药液浓度以生药计，相当于含生何首乌1g/mL。

E-2、生何首乌乙酸乙酯提取液：采用何首乌块根饮片粗粉，每1g生何首乌粗粉加10mL乙酸乙酯(W/V＝1∶10)，回流提取3次，每次2h，过滤，合并滤液，回收乙酸乙酯至无有机溶媒味，以生药计，相当于含生何首乌1g/mL。

F-2、生何首乌丙酮提取液：采用何首乌块根饮片粗粉，每1g生何首乌粗粉加10mL丙酮(W/V＝1∶10)，回流提取3次，每次2h，过滤，合并滤液，回收丙酮至无有机溶媒味，使药液浓度以生药计，相当于含生何首乌1g/mL。

G-2、生何首乌120#汽油提取液：采用何首乌块根饮片粗粉，每1g生何首乌粗粉加10mL的120#汽油(W/V＝1∶10)，回流提取3次，每次2h，过滤，合并滤液，回收120#汽油至无有机溶媒味，使药液浓度以生药计，相当于含生何首乌1g/mL。

上述各提取液可根据需要制成浸膏、流浸膏、酒剂、酊剂、口服液。

实施例3

由上述发明内容的技术方案中给出，所述的丸剂、散剂、滴丸、片剂或胶囊剂的一种，为分别取何首乌粗粉250g或制何首乌粗粉250g，每250g加入2500mL(W/V＝1∶10)的任一溶媒的水或20％～75％乙醇，回流提取3次，每次2小时，过滤合并滤液，回收溶媒至浸膏，干燥，粉碎，过100目筛，加入12.5g硬脂酸镁或淀粉、糊精，混匀，制成丸剂、散剂、滴丸、片剂或胶囊剂。

申请人要指出的是，上述实施例应理解为仅用于说明本发明而不用于限制本发明的保护范围。在阅读了本发明记载的内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等效变化和修饰同样落入本发明权利要求所限定的范围。

本发明中药何首乌或制何首乌的混悬液或提取物经试验和分析，可用于制备治疗抑郁症的药物中的应用，有效解决抑郁症的防治问题。并经试验取得了满意的技术效果，有关试验资料如下：

小鼠悬尾实验(tail suspension test，TST)和强迫游泳实验(forced swim test，FST)均是验证药物具有抗抑郁作用常用的动物实验，故本发明首先用其验证中药何首乌或制何首乌对实验性动物抑郁症的防治作用。由于具有中枢兴奋作用的药物在TST或(和)FST实验中也可能表现为阳性结果，而开野实验(open field test，OFT)能排除这种假阳性的情况。因此，本发明随后考察了何首乌或制何首乌在OFT实验的情况，以确保验证结果的科学、可靠。

1.1实验材料

1.1.1受试动物

昆明(KM)小鼠，，体重18～22g，由河北省实验动物中心提供[SCXK(冀)2008-1-003]。

1.1.2受试药物

制何首乌全粉混悬液(A-11)：采用制何首乌饮片粗粉，混悬于蒸馏水，使混悬液以生药计，相当于含制何首乌1g/mL。

制何首乌水提液(B-11)：采用制何首乌饮片粗粉，加10倍(W/V＝1∶10)量水，回流提取3次，每次2h，过滤合并滤液，回收水，使药液浓度以生药计，相当于含制何首乌1g/mL。

制何首乌20％乙醇提取液(C-11)：采用制何首乌饮片粗粉，加10倍(W/V＝1∶10)量20％乙醇，回流提取3次，每次2h，过滤合并滤液，回收乙醇至无醇味，使药液浓度以生药计，相当于含制何首乌1g/mL。

制何首乌75％乙醇提取液(D-11)：采用制何首乌饮片粗粉，加10倍(W/V＝1∶10)量75％乙醇，回流提取3次，每次2h，过滤合并滤液，回收乙醇至无醇味，使药液浓度以生药计，相当于含制何首乌1g/mL。

制何首乌95％乙醇提取液(E-11)：采用制何首乌饮片粗粉，加10倍(W/V＝1∶10)量95％乙醇，回流提取3次，每次2h，过滤合并滤液，回收乙醇至无醇味，使药液浓度以生药计，相当于含制何首乌1g/mL。

制何首乌乙酸乙酯提取液(F-11)：采用制何首乌饮片粗粉，加10倍(W/V＝1∶10)量乙酸乙酯，回流提取3次，每次2h，过滤合并滤液，回收乙酸乙酯至无有机溶媒味，以生药计，相当于含制何首乌1g/mL。

制何首乌丙酮提取液(G-11)：采用制何首乌饮片粗粉，加10倍(W/V＝1∶10)量丙酮，回流提取3次，每次2h，过滤合并滤液，回收丙酮至无有机溶媒味，使药液浓度以生药计，相当于含制何首乌1g/mL。

制何首乌120#汽油提取液(H-11)：采用制何首乌饮片粗粉，加10倍(W/V＝1∶10)量120#汽油，回流提取3次，每次2h，过滤合并滤液，回收120#汽油至无有机溶媒味，使药液浓度以生药计，相当于含制何首乌1g/mL。

生何首乌全粉混悬液(A-12)：采用生何首乌块根饮片粗粉，混悬于蒸馏水，使混悬液以生药计，相当于含生何首乌1g/mL。

生何首乌水提液(B-12)：采用生何首乌块根饮片粗粉，加10倍(W/V＝1∶10)量水，回流提取3次，每次2h，过滤合并滤液，回收水，使药液浓度以生药计，相当于含生何首乌1g/mL。

生何首乌20％乙醇提取液(C-12)：采用生何首乌块根饮片粗粉，加10倍(W/V＝1∶10)量20％乙醇，回流提取3次，每次2h，过滤合并滤液，回收乙醇至无醇味，使药液浓度以生药计，相当于含生何首乌1g/mL。

生何首乌75％乙醇提取液(D-12)：采用生何首乌饮片粗粉，加10倍(W/V＝1∶10)量75％乙醇，回流提取3次，每次2h，过滤合并滤液，回收乙醇至无醇味，使药液浓度以生药计，相当于含生何首乌1g/mL。

生何首乌95％乙醇提取液(E-12)：采用生何首乌饮片粗粉，加10倍(W/V＝1∶10)量95％乙醇，回流提取3次，每次2h，过滤合并滤液，回收乙醇至无醇味，使药液浓度以生药计，相当于含生何首乌1g/mL。

生何首乌乙酸乙酯提取液(F-12)：采用生何首乌饮片粗粉，加10倍(W/V＝1∶10)量乙酸乙酯，回流提取3次，每次2h，过滤合并滤液，回收乙酸乙酯至无有机溶媒味，以生药计，相当于含生何首乌1g/mL。

生何首乌丙酮提取液(G-12)：采用生何首乌饮片粗粉，加10倍(W/V＝1∶10)量丙酮，回流提取3次，每次2h，过滤合并滤液，回收丙酮至无有机溶媒味，使药液浓度以生药计，相当于含生何首乌1g/mL。

生何首乌120#汽油提取液(H-12)：采用生何首乌饮片粗粉，加10倍(W/V＝1∶10)量120#汽油，回流提取3次，每次2h，过滤合并滤液，回收120#汽油至无有机溶媒味，使药液浓度以生药计，相当于含生何首乌1g/mL。

1.2实验方法

1.2.1TST实验

采用KM雄性小鼠，体重18～22g，每组10只。阳性药盐酸氟西汀(Fluoxetine hydrochloride，FH)及何首乌或制何首乌的各提取液(全粉混悬液、水提液、乙醇提取液、乙酸乙酯提取液丙酮提取液、120#汽油提取液)均以0.5％CMC-Na溶解或混悬至所需给药浓度，FH剂量0.01g/kg，何首乌或制何首乌各提取液组剂量均以3g/kg，模型组(CMC-Na)给予同等体积的0.5％CMC-Na，各组均连续灌胃(ig)给药7天，每天一次，末次给药1h后测试。测试方法如下。

将单个小鼠尾端(在距尾尖部2cm处)用胶布粘于悬尾箱(30cm×30cm×25cm)上部支架上，使其成倒挂状态，头部离箱底约5cm，一次悬挂2只小鼠，中间用隔板隔开。小鼠为了克服不正常体位而挣扎活动，但活动一段时间出现间断性不动，显示失望状态。悬挂时间为6min，统计后4min内悬尾累计不动时间(不动状态即小鼠停止挣扎不动或无任何活动)。

1.2.2 FST实验

采用KM雄性小鼠，体重18～22g，每组10只。阳性药FH及何首乌或制何首乌的各提取液(全粉混悬液、水提液、乙醇提取液、乙酸乙酯提取液、丙酮提取液、120#汽油提取液)均以0.5％CMC-Na溶解或混悬至所需给药浓度，FH剂量0.01g/kg，何首乌或制何首乌各提取液组剂量均以3g/kg，模型组(CMC-Na)给予同等体积的0.5％CMC-Na，各组均连续灌胃(ig)给药7天，每天一次，末次给药1h后测试。测试方法如下。

将小鼠单独放入高20cm、直径14cm的圆柱形玻璃缸中，缸内水深10cm，水温(25±2)℃，从小鼠入水后计时6min，记录后4min内游泳累计不动时间(指小鼠在水中停止挣扎，或显漂浮状态，仅有微小的肢体运动以保持头部浮在水面)。

1.2.3  OFT实验

采用KM雄性小鼠，体重18～22g，每组10只。阳性药FH及何首乌或制何首乌的各提取液(全粉混悬液、水提液、乙醇提取液、乙酸乙酯提取液、丙酮提取液、120#汽油提取液)均以0.5％CMC-Na溶解或混悬至所需给药浓度，FH剂量0.01g/kg，何首乌或制何首乌各提取液组剂量均以3g/kg，模型组(CMC-Na)给予同等体积的0.5％CMC-Na，各组均连续灌胃(ig)给药7天，每天一次，末次给药1h后测试。测试方法如下。

敞箱装置为长宽各50cm、高25cm、底面划分为25个等边方格的木箱，内面用黑漆涂满。在安静的房间内进行此试验观察。将小鼠放入中心方格内，观察记录小鼠在3分钟内穿格次数。

1.3实验结果

如表1和表2所示，与模型组比较，阳性药FH及制何首乌、生何首乌的混悬液、水提物或20％～75％乙醇提取液均可使小鼠TST不动时间和FST不动时间均显著降低(P＜0.05)，其中尤以制何首乌及何首乌的全粉混悬液和水提物的作用最强，与阳性药FH相比没有明显差异(P＞0.05)；而95％乙醇、乙酸乙酯、丙酮、汽油的任一提取液均无显著性差异(P＞0.05)。本实验结果表明何首乌或制何首乌的混悬液、水提物或20％～75％乙醇溶媒提取物均有防治动物抑郁症的作用，且以全粉混悬液和水提物作用最强，与阳性药FH作用也相当。

小鼠OFT穿格次数各组相比均无显著性差异(P＞0.05)，排除了可能因中枢兴奋作用所带来的在TST或(和)FST实验中假阳性的情况，表明各给药组的防治实验性抑郁症的作用的结果科学、可靠。

表1制何首乌对小鼠TST/FST不动时间及OFT穿格次数的影响(n＝10，)

与模型组比较，^＊P＜0.05，^＊＊P＜0.01

表2生何首乌对小鼠TST/FST不动时间及OFT穿格次数的影响(n＝10，)

与模型组比较，^＊P＜0.05，^＊＊P＜0.01

上述试验可以清楚的表明，本发明公开了中药何首乌或制何首乌具有抗抑郁作用的新用途，可用于制备安全高效的抗抑郁药物作为制备治疗抑郁症药物的应用，开拓了何首乌及制何首乌的药用价值，为中医药学的发展做出创造性贡献。