纯化丙酮酸激酶的方法

摘要

本发明提供一种纯化诊断用丙酮酸激酶的方法，其包括如下步骤：(1)将发酵液调节pH、匀浆，(2)稳定化处理，(3)热冷处理，(4)加酸碱处理，(5)用PEG(聚乙二醇)沉淀法将酶从含有杂离子的酶中沉淀出来，将沉淀重悬，继续用PEG沉淀法洗去其中残余的杂离子，(6)酶沉淀经重悬，加入单宁酸使残留的部分PEG和单宁酸结合生成沉淀并离心除去，上清经冷冻升华干燥获得符合试剂盒纯度要求的诊断酶。该方法简单易行，可以很方便地从含有钠、钾、氨等离子和杂蛋白的发酵粗酶液中将酶提纯出来，获得符合诊断原料要求的酶。该方法酶的得率高，杂离子水平可控制，无需上柱脱盐，无需透析，易于扩大生产。