含1,2,3-噻二唑的双三唑并噻二唑类化合物及其制备方法和用途

摘要

本发明提供了制备一类含1，2，3-噻二唑的双三唑并噻二唑的衍生物及其合成方法和用途，本发明涉及含1，2-二唑的杂环化合物，它们具有如下的化学结构通式：

说明书

技术领域

本发明的技术方案涉及含1，2-二唑的杂环化合物，具体涉及双三唑并噻二唑类衍生物。

背景技术

1，2，3-噻二唑衍生物有广泛的生物活性，但商品化的医药品种和农药品种均不多见，发明人的前期研究发现，这类衍生物具有很好的诱导植物抗病毒病和真菌病害的活性，其中，甲噻诱胺属低毒化合物，正在产业化开发过程中；苯并噻二唑(BTH)和噻酰菌胺(TDL)是商品化开发最成功植物激活剂，也是1，2，3-噻二唑的衍生物。1，2，4-三唑衍生物也有相当广泛的生物活性，将这两类活性基团联接到同一分子中形成的化合物均三唑并噻二唑在1977年即有合成和文献报道(Shafiee，A.；Lalezari，I.；Mirrashed，M.；Nercesian，D.1，2，3-Selenadiazolyl-1，3，4-oxadiazole，1，2，3-thiadiazolyl-1，3，4-oxadiazole and 5-(1，2，3-thiadiazolyl)-s-triazolo[3，4-b]-1，3，4-thiadiazole.J.Heterocyclic.Chem.1977，14，567-571)，其后，文献报道了含吡啶基团的均三唑并噻二唑衍生物及其抗菌活性(张自义，陈新，稠杂环化合物研究—I.3-(4′-吡啶基)-6-芳基-均-三唑并[3，4-b]-1，3，4-噻二唑的合成及其抗菌性能，化学学报，1991，49(5)：513-520)；部分芳基取代的均三唑并噻二唑衍生物具有一定的生物活性(张自义，李明，赵岚，李正名，廖仁安，稠杂环化合物的研究(X)—3-芳基-6-苯甲酰氨基均三唑并[3，4-b]-1，3，4-噻二唑类化合物的合成及生物活性.高等学校化学学报，1994，15(2)：220-223；张力学，张安将，周光强，张自义.3-芳基-6-三氯甲基-1，2，4-三唑并[3，4-b]-1，3，4-噻二唑的合成与波谱表征.有机化学，2002，22(9)：663-666)；含吡喃葡萄糖的均三唑并噻二唑衍生物及其生物活性(含葡萄糖取代基均三唑并[3，4-b]-1，3，4-噻二唑稠杂环化合物的合成及生物活性研究.北京理工大学学报，2002，22(6)：761-764)。发明人前期的研究设计合成了一类含1，2，3-噻二唑的三唑并噻二唑衍生物(200810054334.1)，其化学结构如下：

生物活性筛选发现，这类化合物具有很好的杀菌活性。为了寻找更高生物活性的化合物，本发明设计合成了一类含1，2，3-噻二唑的双三唑并噻二唑类化合物，同时进行生物活性的筛选和评价，为新农药的创制研究提供侯选化合物。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是：提供新的含1，2，3-噻二唑的双三唑并噻二唑衍生物的合成方法，提供这类化合物抑制农业和园艺以及林业植物病原物和植物病毒的生物活性及其测定方法，同时提供这些化合物在农业领域和园艺领域以及林业领域的中应用。

本发明解决该技术问题所采用的技术方案是：具有农业、园艺和林业杀菌活性或抗病毒活性或诱导植物产生抗病毒活性的双[3-(4-甲基-1，2，3-噻二唑-5-基)均三唑并噻二唑]衍生物的化学结构通式如下：

其中：X为0或选自1，2-亚乙基、1，3-亚丙基、1，4-亚丁基、1，5-亚戊基、1，6-亚己基、1，7-亚庚基、1，2-亚苯基、1，3-亚苯基1，4-亚苯基、2，5-亚呋喃基、2，5-亚噻吩基、2，6-亚吡啶基、顺-1，2-亚乙烯基、反-1，2-亚乙烯基、2，2′-亚联二苯基、1，1-环丁基、1，1-二亚甲基环己烷、3，5-亚咪唑基的基团。

本发明的双[3-(4-甲基-1，2，3-噻二唑-5-基)均三唑并噻二唑]衍生物的合成方法如下：

其中：X为0或选自1，2-亚乙基、1，3-亚丙基、1，4-亚丁基、1，5-亚戊基、1，6-亚己基、1，7-亚庚基、1，2-亚苯基、1，3-亚苯基1，4-亚苯基、2，5-亚呋喃基、2，5-亚噻吩基、2，6-亚吡啶基、顺-1，2-亚乙烯基、反-1，2-亚乙烯基、2，2′-亚联二苯基、1，1-环丁基、1，1-二亚甲基环己烷、3，5-亚咪唑基的基团。

具体实施方式

本发明的实施具体分为以下步骤：

A.3-(4-甲基-1，2，3-噻二唑-5-基)-4-氨基-5-巯基-1，2，4-均三唑的制备：

3-(4-甲基-1，2，3-噻二唑-5-基)-4-氨基-5-巯基-1，2，4-均三唑的制备参照中国专利200810054334.1的方法进行。

B.双[3-(4-甲基-1，2，3-噻二唑-5-基)均三唑并噻二唑]衍生物的制备：

将1-2.2毫摩尔3-(4-甲基-1，2，3-噻二唑-5-基)-4-氨基-5-巯基-1，2，4-均三唑、0.5-1.1毫摩尔的二羧酸和0.25-0.5毫摩尔四丁基溴化铵加入50毫升圆底烧瓶，再加入15毫升POCl₃，电磁搅拌下，油浴加热到60摄氏度，保温4小时，然后升温至120摄氏度下回流10小时，反应毕，冰水浴冷却下，缓慢滴加冰水，析出大量固体，静置过夜，抽滤，用饱和NaHCO₃溶液洗涤产物，再用水洗至中性，干燥得粗产物，根据所得纯品计算收率、测定熔点和¹HNMR，合成化合物的用量可以按相应比例扩大或缩小；化合物的化学结构见表1；

C.含1，2，3-噻二唑的双三唑并噻二唑类衍生物对病原真菌生长活性影响的测定：

本发明的含1，2，3-噻二唑的双三唑并噻二唑衍生物杀菌或抑菌活性的测定方法如下：

采用菌体生长率测定法，具体过程是，取5毫克样品溶解在适量二甲基甲酰胺内，然后用含有一定量吐温20乳化剂水溶液稀释至500微克/毫升的药剂，将供试药剂在无菌条件下各吸取1毫升注入培养皿内，再分别加入9毫升培养基，摇匀后制成50微克/毫升含药平板，以添加1毫升灭菌水的平板做空白对照，用直径4毫米的打孔器沿菌丝外缘切取菌盘，移至含药平板上，呈等边三角形摆放，每处理重复3次，将培养皿放在24±1摄氏度的恒温培养箱内培养，待对照菌落直径扩展到2-3厘米后调查各处理菌盘扩展直径，求平均值，与空白对照比较计算相对抑菌率，供试菌种包括9种农业上常见植物病原菌，如：F：番茄早疫病菌(Alternaria solani)；D：花生褐斑病菌(Cercospora arachidicola)；I：苹果轮纹病菌(Physalospora piricola)；L：黄瓜灰霉病菌(Botrytis cinerea)；T：水稻纹枯病菌(Pellicularia sasakii)；G：小麦赤霉病菌(Gibberella zeae)；AK：马铃薯晚疫病菌(Phytophthorainfestans(Mont.)de Bary)；N：油菜菌核病菌(Sclerotinia sclerotiorum)；RC：禾谷丝核菌(Rhizoctonia cerealis)；

D.本发明的含1，2，3-噻二唑的双三唑并噻二唑类衍生物诱导抗病活性的测定：

本发明的含1，2，3-噻二唑的双三唑并噻二唑类衍生物诱导烟草抗烟草花叶病毒(TMV)活性的筛选方法如下：离体直接抗病毒活性的测定采用半页法进行；活体诱导是将苗龄一致的普通烟，3盆为一组，分别于接种前7天前处理过的烟苗，处理方式包括：喷施供试化合物溶液2到3次，每次10毫升，或土壤处理，每次10毫升，第7天于新长出的烟叶上摩擦接种TMV，将烟苗置于其生长适宜温度及光照下培养3天后，检查发病情况，综合病斑数目按下式计算出供试化合物对TMV的诱导抗病毒效果，每一处理设3次重复，对照分空白对照和标准药剂处理对照2种；选择噻酰菌胺(TDL)(纯度大于99.5％)为标准的植物诱导抗病激活剂：

$R=\frac{\mathrm{CK}-I}{\mathrm{CK}}\times 100$

其中，R为新化合物对烟草抗TMV的诱导效果，单位：％

CK为清水对照叶片的平均枯斑数，单位：个

I为经化合物诱导处理后叶片的平均枯斑数，单位：个；

本发明的有益效果是：本发明对含1，2，3-噻二唑的双三唑并噻二唑进行了先导结构的优化，并对合成的新化合物进行抑菌活性的筛选，这类化合物可以用于农业领域和林业领域以及园艺领域病害进行的植物保护。

本发明将通过特定制备和生物活性测定实施例更加具体地说明含1，2，3-噻二唑的双三唑并噻二唑衍生物的合成和生物活性及其应用，但所述实施例仅用于具体说明本发明而非限制本发明，尤其是其生物活性仅仅是举例说明，而非限制本专利，具体实施方式如下：

实施例1

化合物3-(4-甲基-1，2，3-噻二唑-5-基)-4-氨基-5-巯基-1，2，4-均三唑的制备及结构鉴定

将6.25克80％水合肼加入到50毫升无水乙醇中，搅拌下，缓慢滴加17.2克4-甲基-1，2，3-噻二唑-5-甲酸乙酯，滴毕剧烈搅拌，约15分钟，瞬间析出大量固体，抽滤并用无水乙醇洗，旋干滤液，得到黄色固体，石油醚洗，合并固体，红外灯下干燥，得到橙黄色4-甲基-1，2，3-噻二唑-5-甲酰肼14.9克，产率94.2％；将11.6克4-甲基-1，2，3-噻二唑-5-甲酰肼加入到溶有7.5克82％KOH的150毫升无水乙醇溶液中，搅拌使之溶解，再滴加CS₂8.36克，逐渐有橙黄色固体析出，室温搅拌4小时；静置，抽滤，得到橙黄色4-甲基-1，2，3-噻二唑-5-甲酰肼基二硫代甲酸钾盐19.57克，产率98％，直接用于下一步反应；将19克4-甲基-1，2，3-噻二唑-5-甲酰肼基二硫代甲酸钾盐加入到120毫升无水乙醇中，搅拌为黄色乳浊液，再加入8.6克80％水合肼，加热回流6小时，冷却加入100毫升水，得到黄绿色溶液，浓盐酸酸化至pH＝2-3，大量白色固体析出，静置过夜，抽滤并用水洗至中性，红外灯下干燥得3-(4-甲基-1，2，3-噻二唑基)-4-氨基-5-巯基-1，2，4-均三唑10.4克，产率70％；¹H NMR(δ，DMSO-d₆)：14.338(s，H，NH)，6.805(s，2H，N-NH₂)，2.948(s，3H，thiadiazolyl-CH₃)。

实施例2

化合物WSX-8：1，6-二[3-(4-甲基-1，2，3-噻二唑-5-基)均三唑并-[3，4-b]-1，3，4-噻二唑-6-基]己烷的合成及结构鉴定

将2.2毫摩尔3-苯基-4-氨基-5-巯基-1，2，4-均三唑、1毫摩尔辛二酸和0.5毫摩尔四丁基溴化铵加入到50毫升圆底烧瓶中，再加入15毫升POCl₃，电磁搅拌下，油浴加热保持温度60摄氏度，保温4小时，然后升温至120摄氏度下回流10小时，反应毕，冰水浴冷却下，缓慢滴加冰水，析出大量固体，静置过夜，抽滤，用饱和NaHCO₃溶液洗涤产物，再用水洗至中性，干燥得粗产物，产率90％，用DMF-C₂H₅OH重结晶得白色晶体；熔点大于250摄氏度，¹HNMR(δ，DMSO-d₆)：1.496-1.859(m，8H，4CH₂)，3.137-3.173(t，4H，2CH₂)，3.064(s，6H，2thiadiazolyl-CH₃)。

实施例3

化合物WSX-11：1，1-二[3-(4-甲基-1，2，3-噻二唑-5-基)均三唑并-[3，4-b]-1，3，4-噻二唑-6-亚甲基]环己烷的合成及结构鉴定

将1.1毫摩尔3-苯基-4-氨基-5-巯基-1，2，4-均三唑、0.5毫摩尔1，1-环己基二乙酸和0.25毫摩尔四丁基溴化铵加入到25毫升圆底烧瓶中，再加入8毫升POCl₃，电磁搅拌下，油浴加热保持温度60摄氏度，保温4小时，然后升温至120摄氏度下回流10小时，反应毕，冰水浴冷却下，缓慢滴加冰水，析出大量固体，静置过夜，抽滤，用饱和NaHCO₃溶液洗涤产物，再用水洗至中性，干燥得粗产物，产率76％，用DMF-C₂H₅OH重结晶得白色晶体；熔点：247-248度，¹HNMR(δ，DMSO-d₆)1.605-1.710(m，10H，cyclohexyl-H)，3.115-3.139(t，4H，2CH₂)，3.083(s，6H，2thiadiazolyl-CH₃)。

实施例4

化合物WSX-12：1，1-二[3-(4-甲基-1，2，3-噻二唑-5-基)均三唑并-[3，4-b]-1，3，4-噻二唑-6-基]环丁烷的合成及结构鉴定

将1.1毫摩尔3-苯基-4-氨基-5-巯基-1，2，4-均三唑、0.5毫摩尔1，1-环丁基二甲酸和0.25毫摩尔四丁基溴化铵加入到25毫升圆底烧瓶中，再加入8毫升POCl₃，电磁搅拌下，油浴加热保持温度60摄氏度，保温4小时，然后升温至120摄氏度下回流10小时，反应毕，冰水浴冷却下，缓慢滴加冰水，析出大量固体，静置过夜，抽滤，用饱和NaHCO₃溶液洗涤产物，再用水洗至中性，干燥得粗产物，产率89％，用DMF-C₂H₅OH重结晶得黄棕色晶体；熔点大于250摄氏度。

实施例5

化合物WSX-16：2，6-二[3-(4-甲基-1，2，3-噻二唑-5-基)均三唑并-[3，4-b]-1，3，4-噻二唑-6-基]吡啶的合成及结构鉴定

将1.5毫摩尔3-苯基-4-氨基-5-巯基-1，2，4-均三唑、0.7毫摩尔2，6吡啶二甲酸和0.35毫摩尔四丁基溴化铵加入到50毫升圆底烧瓶中，再加入10毫升POCl₃，电磁搅拌下，油浴加热保持温度60摄氏度，保温4小时，然后升温至120摄氏度下回流10小时，反应毕，冰水浴冷却下，缓慢滴加冰水，析出大量固体，静置过夜，抽滤，用饱和NaHCO₃溶液洗涤产物，再用水洗至中性，干燥得粗产物，产率90％，用DMF-C₂H₅OH重结晶得浅黄色晶体；熔点大于250摄氏度。

实施例6

化合物WSX-17：1，2-二[3-(4-甲基-1，2，3-噻二唑-5-基)均三唑并-[3，4-b]-1，3，4-噻二唑-6-基]乙烷的合成及结构鉴定

将1.5毫摩尔3-苯基-4-氨基-5-巯基-1，2，4-均三唑、0.7毫摩尔丁二酸和0.35毫摩尔四丁基溴化铵加入到50毫升圆底烧瓶中，再加入10毫升POCl₃，电磁搅拌下，油浴加热保持温度60摄氏度，保温4小时，然后升温至120摄氏度下回流10小时，反应毕，冰水浴冷却下，缓慢滴加冰水，析出大量固体，静置过夜，抽滤，用饱和NaHCO₃溶液洗涤产物，再用水洗至中性，干燥得粗产物，产率79％，用DMF-C₂H₅OH重结晶得白色晶体；熔点大于250摄氏度，¹HNMR(δ，DMSO-d₆)：3.764(s，4H，2CH₂)，3.023(s，6H，2thiadiazolyl-CH₃)。

实施例7

化合物WSX-18：联二[3-(4-甲基-1，2，3-噻二唑-5-基)均三唑并-[3，4-b]-1，3，4-噻二唑]的合成及结构鉴定

将1.5毫摩尔3-苯基-4-氨基-5-巯基-1，2，4-均三唑、0.7毫摩尔草酸和0.35毫摩尔四丁基溴化铵加入到50毫升圆底烧瓶中，再加入10毫升POCl₃，电磁搅拌下，油浴加热保持温度60摄氏度，保温4小时，然后升温至120摄氏度下回流10小时，反应毕，冰水浴冷却下，缓慢滴加冰水，析出大量固体，静置过夜，抽滤，用饱和NaHCO₃溶液洗涤产物，再用水洗至中性，干燥得粗产物，产率55％，用DMF-C₂H₅OH重结晶得黄棕色晶体；熔点大于250摄氏度，¹HNMR(δ，DMSO-d₆)：3.023(s，6H，2thiadiazolyl-CH₃)。

实施例8

化合物WSX-19：顺-1，2-二[3-(4-甲基-1，2，3-噻二唑-5-基)均三唑并-[3，4-b]-1，3，4-噻二唑-6-基]乙烯的合成及结构鉴定

将1.5毫摩尔3-苯基-4-氨基-5-巯基-1，2，4-均三唑、0.7毫摩尔顺丁烯二酸和0.35毫摩尔四丁基溴化铵加入到50毫升圆底烧瓶中，再加入10毫升POCl₃，电磁搅拌下，油浴加热保持温度60摄氏度，保温4小时，然后升温至120摄氏度下回流10小时，反应毕，冰水浴冷却下缓慢滴加冰水，析出大量固体，静置过夜，抽滤，用饱和NaHCO₃溶液洗涤后再用水洗至中性，干燥得粗产物，产率45％，用DMF-C₂H₅OH重结晶得黄色晶体；熔点大于250摄氏度，¹HNMR(δ，DMSO-d₆)：8.180(s，2H，CH＝CH)，3.102(s，6H，2thiadiazolyl-CH₃)。

实施例9

化合物WSX-20：反-1，2-二[3-(4-甲基-1，2，3-噻二唑-5-基)均三唑并-[3，4-b]-1，3，4-噻二唑-6-基]乙烯的合成及结构鉴定

将1.5毫摩尔3-苯基-4-氨基-5-巯基-1，2，4-均三唑、0.7毫摩尔反丁烯二酸和0.35毫摩尔四丁基溴化铵加入到50毫升圆底烧瓶中，再加入10毫升POCl₃，电磁搅拌下，油浴加热保持温度60摄氏度，保温4小时，然后升温至120摄氏度下回流10小时，反应毕，冰水浴冷却下，缓慢滴加冰水，析出大量固体，静置过夜，抽滤，用饱和NaHCO₃溶液洗涤产物，再用水洗至中性，干燥得粗产物，产率61％，用DMF-C₂H₅OH重结晶得浅黄色晶体；熔点大于250摄氏度。

实施例10

化合物WSX-22：1，3-二[3-(4-甲基-1，2，3-噻二唑-5-基)均三唑并-[3，4-b]-1，3，4-噻二唑-6-基]苯的合成及结构鉴定

将1.5毫摩尔3-苯基-4-氨基-5-巯基-1，2，4-均三唑、0.7毫摩尔间苯二甲酸和0.35毫摩尔四丁基溴化铵加入到50毫升圆底烧瓶中，再加入10毫升POCl₃，电磁搅拌下，油浴加热保持温度60摄氏度，保温4小时，然后升温至120摄氏度下回流10小时，反应毕，冰水浴冷却下，缓慢滴加冰水，析出大量固体，静置过夜，抽滤，用饱和NaHCO₃溶液洗涤产物，再用水洗至中性，干燥得粗产物，产率88％，用DMF-C₂H₅OH重结晶得白色针状晶体；熔点大于250摄氏度。元素分析结果：计算值(％)，C₁₈H₁₀N₁₂S₄：C，41.37；H，1.93；N，32.16.实验测定值：C，41.09；H，1.96；N，31.48。

实施例11

化合物WSX-25：1，4-二[3-(4-甲基-1，2，3-噻二唑-5-基)均三唑并-[3，4-b]-1，3，4-噻二唑-6-基]苯的合成及结构鉴定

将1.5毫摩尔3-苯基-4-氨基-5-巯基-1，2，4-均三唑、0.7毫摩尔对苯二甲酸和0.35毫摩尔四丁基溴化铵加入到50毫升圆底烧瓶中，再加入10毫升POCl₃，电磁搅拌下，油浴加热保持温度60摄氏度，保温4小时，然后升温至120摄氏度下回流10小时，反应毕，冰水浴冷却下，缓慢滴加冰水，析出大量固体，静置过夜，抽滤，用饱和NaHCO₃溶液洗涤产物，再用水洗至中性，干燥得粗产物，产率91％，用DMF-C₂H₅OH重结晶得白色晶体；熔点大于250摄氏度。元素分析结果：计算值(％)，C₁₈H₁₀N₁₂S₄：C，41.37；H，1.93；N，32.16.实验测定值：C，41.05；H，1.96；N，30.31。

实施例12

化合物WSX-26：2，5-二[3-(4-甲基-1，2，3-噻二唑-5-基)均三唑并-[3，4-b]-1，3，4-噻二唑-6-基]噻吩的合成及结构鉴定

将1.5毫摩尔3-苯基-4-氨基-5-巯基-1，2，4-均三唑、0.7毫摩尔2，5-噻吩二甲酸和0.35毫摩尔四丁基溴化铵加入到50毫升圆底烧瓶中，再加入10毫升POCl₃，电磁搅拌下，油浴加热保持温度60摄氏度，保温4小时，然后升温至120摄氏度下回流10小时，反应毕，冰水浴冷却下，缓慢滴加冰水，析出大量固体，静置过夜，抽滤，用饱和NaHCO₃溶液洗涤后再用水洗至中性得粗产物，产率90％，用DMF-C₂H₅OH重结晶得黄色晶体；熔点大于250摄氏度，¹HNMR(δ，DMSO-d₆)：7.953(s，2H，thienyl-H)，3.107(s，6H，2thiadiazolyl-CH₃)。

实施例13

化合物WSX-28：2，5-二[3-(4-甲基-1，2，3-噻二唑-5-基)均三唑并-[3，4-b]-1，3，4-噻二唑-6-基]呋喃的合成及结构鉴定

将1.5毫摩尔3-苯基-4-氨基-5-巯基-1，2，4-均三唑、0.7毫摩尔2，5呋喃二甲酸和0.35毫摩尔四丁基溴化铵加入到50毫升圆底烧瓶中，再加入10毫升POCl₃，电磁搅拌下，油浴加热保持温度60摄氏度，保温4小时，然后升温至120摄氏度下回流10小时，反应毕，冰水浴冷却下，缓慢滴加冰水，析出大量固体，静置过夜，抽滤，用饱和NaHCO₃溶液洗涤后再用水洗至中性得粗产物，产率70％，用DMF-C₂H₅OH重结晶得黄色晶体；熔点大于250摄氏度，¹HNMR(δ，DMSO-d₆)：8.011(s，2H，furyl-H)，3.116(s，6H，2thiadiazolyl-CH₃)。

实施例14

化合物WSX-29：2，2′-二[3-(4-甲基-1，2，3-噻二唑-5-基)均三唑并-[3，4-b]-1，3，4-噻二唑-6-基]联二苯的合成及结构鉴定

将1.5毫摩尔3-苯基-4-氨基-5-巯基-1，2，4-均三唑、0.7毫摩尔2，2′联苯二甲酸和0.35毫摩尔四丁基溴化铵加入到50毫升圆底烧瓶中，再加入10毫升POCl₃，电磁搅拌下，油浴加热保持温度60摄氏度，保温4小时，然后升温至120摄氏度下回流10小时，反应毕，冰水浴冷却下，缓慢滴加冰水，析出大量固体，静置过夜，抽滤，用饱和NaHCO₃溶液洗涤产物，再用水洗至中性，干燥得粗产物，产率67％，用DMF-C₂H₅OH重结晶得浅黄色晶体；熔点大于250摄氏度，¹HNMR(δ，DMSO-d₆)：7.714-7.947(m，8H，ArH)，2.906(s，6H，2thiadiazolyl-CH₃)。

实施例15

化合物WSX-30：1，7-二[3-(4-甲基-1，2，3-噻二唑-5-基)均三唑并-[3，4-b]-1，3，4-噻二唑-6-基]庚烷的合成及结构鉴定

将1.5毫摩尔3-苯基-4-氨基-5-巯基-1，2，4-均三唑、0.7毫摩尔壬二酸和0.35毫摩尔四丁基溴化铵加入到50毫升圆底烧瓶中，再加入10毫升POCl₃，电磁搅拌下，油浴加热保持温度60摄氏度，保温4小时，然后升温至120摄氏度下回流10小时，反应毕，冰水浴冷却下，缓慢滴加冰水，析出大量固体，静置过夜，抽滤，用饱和NaHCO₃溶液洗涤产物，再用水洗至中性，干燥得粗产物，产率92％，用DMF-C₂H₅OH重结晶得白色晶体；熔点大于250摄氏度，¹HNMR(δ，DMSO-d₆)：1.429-1.804(m，10H，5CH₂)，3.127-3.163(t，4H，2CH₂)，3.055(s，6H，2thiadiazolyl-CH₃)。

实施例16

化合物WSX-32：1，3-二[3-(4-甲基-1，2，3-噻二唑-5-基)均三唑并-[3，4-b]-1，3，4-噻二唑-6-基]丙烷的合成及结构鉴定

将1.5毫摩尔3-苯基-4-氨基-5-巯基-1，2，4-均三唑、0.7毫摩尔戊二酸和0.35毫摩尔四丁基溴化铵加入到50毫升圆底烧瓶中，再加入10毫升POCl₃，电磁搅拌下，油浴加热保持温度60摄氏度，保温4小时，然后升温至120摄氏度下回流10小时，反应毕，冰水浴冷却下，缓慢滴加冰水，析出大量固体，静置过夜，抽滤，用饱和NaHCO₃溶液洗涤产物，再用水洗至中性，干燥得粗产物，产率85％，用DMF-C₂H₅OH重结晶得灰色针状晶体；熔点大于250摄氏度。元素分析结果：计算值(％)，C₁₅H₁₂N₁₂S₄：C，36.87；H，2.48；N，34.40.实验测定值：C，36.51；H，2.73；N，33.17。

实施例17

化合物WSX-33：1，5-二[3-(4-甲基-1，2，3-噻二唑-5-基)均三唑并-[3，4-b]-1，3，4-噻二唑-6-基]戊烷的合成及结构鉴定

将1.5毫摩尔3-苯基-4-氨基-5-巯基-1，2，4-均三唑、0.7毫摩尔庚二酸和0.35毫摩尔四丁基溴化铵加入到50毫升圆底烧瓶中，再加入10毫升POCl₃，电磁搅拌下，油浴加热保持温度60摄氏度，保温4小时，然后升温至120摄氏度下回流10小时，反应毕，冰水浴冷却下，缓慢滴加冰水，析出大量固体，静置过夜，抽滤，用饱和NaHCO₃溶液洗涤产物，再用水洗至中性，干燥得粗产物，产率78％，用DMF-C₂H₅OH重结晶得浅黄色晶体；熔点：229-231度，¹HNMR(δ，DMSO-d₆)：1.550-1.910(m，6H，3CH₂)，3.155-3.190(t，4H，2CH₂)，3.060(s，6H，2thiadiazolyl-CH₃)。

实施例18

化合物WSX-35：3，5-二[3-(4-甲基-1，2，3-噻二唑-5-基)均三唑并-[3，4-b]-1，3，4-噻二唑-6-基]吡唑的合成及结构鉴定

将1.5毫摩尔3-苯基-4-氨基-5-巯基-1，2，4-均三唑、0.7毫摩尔3，5-吡唑二酸和0.35毫摩尔四丁基溴化铵加入到50毫升圆底烧瓶中，再加入10毫升POCl₃，电磁搅拌下，油浴加热保持温度60摄氏度，保温4小时，然后升温至120摄氏度下回流10小时，反应毕，冰水浴冷却下，缓慢滴加冰水，析出大量固体，静置过夜，抽滤，用饱和NaHCO₃溶液洗涤产物，再用水洗至中性，干燥得粗产物，产率78％，用DMF-C₂H₅OH重结晶得白色晶体；熔点大于250摄氏度，¹HNMR(δ，DMSO-d₆)：7.952(s，1H，pyrazolyl-NH)，3.110(s，1H，pyrazolyl-CH)，2.730(s，3H，thiadiazolyl-CH₃)，2.890(s，3H，thiadiazolyl-CH₃)。

实施例19

化合物WSX-39：1，2-二[3-(4-甲基-1，2，3-噻二唑-5-基)均三唑并-[3，4-b]-1，3，4-噻二唑-6-基]苯的合成及结构鉴定

将1.5毫摩尔3-苯基-4-氨基-5-巯基-1，2，4-均三唑、0.7毫摩尔邻苯二甲酸和0.35毫摩尔四丁基溴化铵加入到50毫升圆底烧瓶中，再加入10毫升POCl₃，电磁搅拌下，油浴加热保持温度60摄氏度，保温4小时，然后升温至120摄氏度下回流10小时，反应毕，冰水浴冷却下，缓慢滴加冰水，析出大量固体，静置过夜，抽滤，用饱和NaHCO₃溶液洗涤产物，再用水洗至中性，干燥得粗产物，产率45％，用DMF-C₂H₅OH重结晶得黄棕色晶体；熔点大于250摄氏度。

实施例20

化合物WSX-73：1，4-二[3-(4-甲基-1，2，3-噻二唑-5-基)均三唑并-[3，4-b]-1，3，4-噻二唑-6-基]丁烷的合成及结构鉴定

将1.5毫摩尔3-苯基-4-氨基-5-巯基-1，2，4-均三唑、0.7毫摩尔己二酸和0.35毫摩尔四丁基溴化铵加入到50毫升圆底烧瓶中，再加入10毫升POCl₃，电磁搅拌下，油浴加热保持温度60摄氏度，保温4小时，然后升温至120摄氏度下回流10小时，反应毕，冰水浴冷却下，缓慢滴加冰水，析出大量固体，静置过夜，抽滤，用饱和NaHCO₃溶液洗涤产物，再用水洗至中性，干燥得粗产物，产率91％，用DMF-C₂H₅OH重结晶得白色晶体；熔点大于250摄氏度。

实施例21

本发明的含1，2，3-噻二唑的双三唑并噻二唑衍生物的抑菌活性：

本发明测试的常见植物病原真菌的名称和代号包括AS：番茄早疫病菌(Alternariasolani)；BC：黄瓜灰霉病菌(Botrytis cinerea)；CA：花生褐斑病菌(Cercospora arachidicola)；GZ：小麦赤霉病菌(Gibberella zeae)；PI：马铃薯晚疫病菌(Phytophthora infestans(Mont.)deBary)；PP：苹果轮纹病菌(Physalospora piricola)；PS：水稻纹枯病菌(Pellicularia sasakii)；SS：油菜菌核病菌(Sclerotinia sclerotiorum)；RC：禾谷丝核菌(Rhizoctonia cerealis)，这些菌种具有很好的代表性，能够代表农业生产中田间发生的大部分病原菌的种属。菌体生长率法测定结果见表2，表2表明，本发明合成的部分化合物对测定的部分病原真菌的生长具有不同程度抑菌作用：在50微克/毫升时，发明人已经申请的专利文件200810054334.1中活性最好的对比化合物YZK-C-22在同等条件下对测试的大部分病原菌的活性较好，但对测试的GZ、BC、SS和RC四种病原真菌的抑制作用较差；而WSX-26对GZ的抑制作用为35.29％％，远远高于对比化合物YZK-C-22；WSX-12、WSX-16、WSX-33和WSX-35对BC的抑制作用分别为：34.38％、43.75％、68.75％和43.75％，也远远高于对比化合物YZK-C-22；WSX-8、WSX-18、WSX-26、WSX-30和WSX-35以及WSX-73对SS的抑制率分别为：41.67％、33.33％、69.44％、88.89％和61.11％以及38.89％，也远远高于对比化合物YZK-C-22；其他化合物对其他病原真菌的抑制作用均不显著。以上结果表明，含1，2，3-噻二唑的双三唑并噻二唑衍生物由于亲酯性联接基团的引入改变了目标分子的亲酯性，从而使得化合物的生物活性得到显著的提高。

实施例22

本发明的含1，2，3-噻二唑的双三唑并噻二唑衍生物抗烟草抗烟草花叶病毒的效果：

抗TMV活性的测定结果见表3，表3表明，商品化的植物抗烟草花叶病毒药剂病毒唑对TMV有一定的活性，本发明的大部分双三唑并噻二唑衍生物具有较好的直接抗TMV的活性，WSX-8、WSX-18、WSX-20、WSX-25、WSX-26和WSX-32部分化合物在500微克/毫升和100微克/毫升时的抗病毒效果均在40％以上，这些化合物在500微克/毫升的活性均远远高于同类的药剂TDL的测定结果，测定结果几乎是TDL的两倍；也高于广泛使用的常规抗病毒药剂病毒唑和抗病毒效果最好的宁南霉素的测定结果。而在100微克/毫升时这些药剂的抗病毒效果也显著高于测定的三个对照药剂TDL和病毒唑以及宁南霉素。因此，上述化合物可以与农业上可接受的助剂制备成抗病毒药剂，用于植物病毒病的防治。选择抗病毒活性好的化合物进行了诱导活性的测定，结果发现，上述WSX-8、WSX-18、WSX-20、WSX-25、WSX-26和WSX-32在相同浓度下的诱导活性均比发明人已经申请的专利文件200810054334.1中的对比化合物YZK-C-22的诱导活性高，也高于对照药剂TDL在相同浓度下的诱导效果，YZK-C-22的诱导活性与TDK相当；因此，上述化合物可以与农业上可接受的助剂制备成植物激活剂，用于植物病毒病的防治。在试验过程中，发现这些化合物对烟草表现出不同程度的药害，因此，这类化合物可能表现出一定的除草活性。本发明的化合物WSX-8、WSX-18、WSX-20、WSX-25、WSX-26和WSX-32诱导烟草抗TMV的活性比只有一个三唑并噻二唑活性结构单元的化合物高，最多的高出20％以上，这些化合物具有比对比化合物YZK-C-22突出的诱导活性的优势，其原因在于含1，2，3-噻二唑的双三唑并噻二唑衍生物由于亲酯性联接基团的引入改变了目标分子的亲酯性，从而使得化合物的生物活性得到显著的提高。

实施例23

本发明的含1，2，3-噻二唑的双三唑并噻二唑衍生物与抗病毒剂组合在防治农业和林业及园艺植物病毒病害中的应用：

初步的生物测定试验的结果表明，本发明的所有含1，2，3-噻二唑的双三唑并噻二唑衍生物与现有的抗植物病毒药剂苯并噻二唑(BTH)、噻酰菌胺(TDL)、4-甲基-1，2，3-噻二唑-5-甲酸(TDLA)、4-甲基-1，2，3-噻二唑-5-甲酸钠(TDLS)、4-甲基-1，2，3-噻二唑-5-甲酸乙酯(ETDLA)、DL-β-氨基丁酸(BABA)、病毒唑、安托芬、宁南霉素以及噻酰胺、甲噻诱胺和水杨酸中任意1个或2个化合物组合可以用于诱导烟草抗TMV或用于直接防治TMV，这些组合物之间均表现出相加作用或增效作用，其抗病毒活性的效果均大于任何一个化合物单独使用的效果；没有颉颃作用。产生这些效果的原因是本发明的化合物与其组合的化合物在作用机制上互补，既有直接作用于TMV的化合物，也有作用于植物本身，提高植物自身防御能力的化合物。

这些组合物适用的主要作物包括谷类作物(包括稻谷、小麦、大麦、燕麦、玉米、谷子、高粱等)、薯类作物(包括甘薯、马铃薯、木薯等)、豆类作物(包括大豆、蚕豆、豌豆、绿豆、小豆等)和纤维作物(棉花、麻类、蚕桑等)、油料作物(花生、油菜、芝麻、大豆、向日葵等)、糖料作物(甜菜、甘蔗等)、饮料作物(茶叶、咖啡、可可等)、嗜好作物(烟叶等)、药用作物(人参、贝母等)、热带作物(橡胶、椰子、油棕、剑麻等)等粮食作物和水果、花卉、油料、糖料以及棉、麻、茶、烟草、中药材等经济作物以及种植瓜、果、茶、蚕桑、蔬菜(含各种山野菜等)、竹笋、花卉及观赏植物、啤酒花、药材、胡椒、种苗及其他园艺作物等园艺作物如烟草(烤烟，晾烟、晒烟)、蔬菜、(番茄、辣椒、萝卜、黄瓜、白菜、芹菜、榨菜、甜菜、油菜、葱、蒜等)、瓜类(西瓜、甜瓜、哈密瓜、木瓜等)、豆类(大豆、蚕豆、荷兰豆等)、马铃薯、小麦、玉米、水稻、花生、果树、(苹果、香蕉、柑桔，桃树、番木瓜)、花卉(如兰花)、盆景等；病毒病害包括烟草花叶病毒病、各种瓜类病毒病、各种茄果类病毒病、豆类病毒病、十字花科病毒病、粮油作物病毒病、棉花病毒病及各种果树病毒病等，其中危害严重的主要有：烟草病毒病、辣椒病毒病、甜椒病毒病、番茄病毒病、大白菜病毒病、水稻病毒病包括水稻矮缩病、黄矮病、条纹叶枯病、番茄蕨叶病毒病、辣椒花叶病毒病和烟草脉坏死病毒病、玉米矮花叶病、花椰菜花叶病毒、柑橘病毒病、建兰花叶病毒、建兰环斑病毒等。这些药剂组合在上述作物上进行上述病毒病害的防治之所以具有显著效果的重要原因是，本发明的化合物具有很好的诱导活性，而诱导活性具有广谱和持效的特点。

实施例24

本发明的含1，2，3-噻二唑的双三唑并噻二唑衍生物与杀菌剂组合防治农业和林业及园艺植物病害中的应用：

初步的生物测定试验的结果表明，本发明的所有含1，2，3-噻二唑的双三唑并噻二唑衍生物与现有的杀菌剂如霜脲氰、福美双、福美锌、代森锰锌、乙磷铝、甲基硫菌灵、百菌清、敌可松、多菌灵、腐霉利、异菌脲、克菌丹、乙霉威、酯菌脲、氟酰胺、苯菌灵、环唑醇、磺菌威、苯锈啶、噁酰胺、三唑酮、甲基托布津、甲霜灵、精甲霜灵、苯霜灵、土菌消、烯酰吗啉、氟吗啉、十三吗啉、氟硅唑、烯唑醇、戊唑醇、噁霉灵、噁醚唑、嘧菌胺、嘧菌酯、丙环唑、苯并噻二唑、水杨酸、噻酰菌胺、噻酰胺、甲噻诱胺等其它已知任何可作为杀菌剂中的任意一种或两种组合使用可以用于农业植物病害和园艺植物病害的防治，防治对象包括卵菌纲的绵霉属、丝囊霉属、腐霉属、疫霉属、指梗霉属、单轴霉属、假霜霉属、霜霉属等二十余个属产生的病害，如稻苗绵腐病、番茄根腐病、马铃薯晚疫病、烟草黑胫病、谷子白粉病、葡萄霜霉病、莴苣霜霉病、黄瓜霜霉病等多种粮食作物和经济作物的其他病害等，使用的剂型可以是可湿性粉剂、缓释剂、粉剂、微胶囊悬浮剂、可分散浓剂、种子处理乳剂、水乳剂、大粒剂、颗粒剂、微乳剂、油剂、用农药包衣的种子、悬浮剂、悬乳剂、水溶性粒剂、可溶性浓剂、水分散性粒剂等等，本发明的含1，2，3-噻二唑的双三唑并噻二唑衍生物在组合物中的比例在1％-90％之间，药剂的防治效果好，这些组合物具有增效作用和相加作用，没有颉颃作用。

利用类似的方法可以确定本发明的化合物与上述商品化的杀菌剂之间的组合可以用于诱导农业作物和林业植物以及园艺植物抗植物病原细菌和植物病原真菌引起的病害。这些作物包括：谷类作物(包括稻谷、小麦、大麦、燕麦、玉米、谷子、高粱等)、薯类作物(包括甘薯、马铃薯、木薯等)、豆类作物(包括大豆、蚕豆、豌豆、绿豆、小豆等)纤维作物(棉花、麻类、蚕桑等)、油料作物(花生、油菜、芝麻、大豆、向日葵等)、糖料作物(甜菜、甘蔗等)、饮料作物(茶叶、咖啡、可可等)、嗜好作物(烟叶等)、药用作物(人参、贝母、红花、荆芥、洋金花、川乌和板蓝根等)、热带作物(橡胶、椰子、油棕、剑麻等)等粮食作物和水果、花卉、油料、糖料以及棉、麻、茶、烟草、中药材等经济作物以及种植瓜、果、茶、蚕桑、蔬菜(含各种山野菜等)、竹笋、花卉及观赏植物、啤酒花、药材、胡椒、种苗及其他园艺作物等园艺作物。

这些药剂组合在上述作物上进行上述病害的防治之所以具有显著效果的重要原因是，本发明的化合物具有很好的诱导活性，而诱导活性具有广谱和持效的特点。

表1本发明合成的部分双三唑并噻二唑类衍生物的化学结构特征

表1本发明合成的部分双三唑并噻二唑类衍生物的化学结构特征(续)

表2本发明中的化合物的杀菌活性(/％)

  化合物   AS   CA   GZ   PP   BC   SS   RC   PS   PI   WSX-8   11.11   21.43   5.88   22.58   25.00   41.67   3.85   7.14   22.73   WSX-11   16.67   14.29   14.71   19.35   28.13   13.89   0   7.14   22.73   WSX-12   5.56   14.29   0   22.58   34.38   22.22   3.85   14.29   13.64   WSX-16   0   0   20.59   29.03   43.75   8.33   7.69   5.36   18.18   WSX-17   27.78   28.57   2.94   22.58   28.13   16.67   0   75.00   18.18   WSX-18   11.11   21.43   2.94   22.58   18.75   33.33   3.85   71.43   9.09   WSX-19   33.33   28.57   26.47   25.81   25.00   11.11   7.69   5.36   18.18   WSX-20   11.11   14.29   17.65   35.48   37.50   22.22   23.08   5.36   27.27   WSX-22   0   21.43   14.71   19.35   34.38   22.22   11.54   44.64   36.36   WSX-25   22.22   7.14   17.65   32.26   18.75   0   11.54   62.50   22.73   WSX-26   16.67   0   35.29   74.19   25.00   69.44   11.54   80.36   18.18   WSX-28   5.56   21.43   2.94   32.26   28.13   33.33   7.69   7.14   22.73   WSX-29   11.11   28.57   11.76   35.48   28.13   19.44   7.69   7.14   9.09   WSX-30   0   28.57   32.35   29.03   31.25   88.89   7.69   71.43   18.18   WSX-32   11.11   21.43   14.71   35.48   37.50   27.78   15.38   7.14   22.73   WSX-33   27.78   7.14   11.76   35.48   68.75   19.44   7.69   8.93   13.64   WSX-35   11.11   14.29   17.65   45.16   43.75   61.11   7.69   17.86   36.36   WSX-39   9.09   16.67   30.00   5.26   41.18   77.59   57.69   28.95   31.03   WSX-73   16.67   0   8.82   38.71   25.00   38.89   15.38   14.29   22.73   YZK-C-22   69.44   68.75   8.82   88.89   7.14   11.11   15.38   88.89   74.19

表中数据为50微克/毫升的测定结果；ND：未测定

表3本发明中的化合物诱导烟草抗烟草花叶病毒的活性

  化合物  浓度(微克/毫升)   平均抑制率±SD(％)   浓度(微克/毫升)   平均抑制率±SD(％)   WSX-8   500   56.40±3.53   100   45.13±2.87   WSX-23   500   19.93±2.82   100   43.15±2.74   WSX-11   500   43.22±15.90   100   22.99±4.67   WSX-16   500   28.70±8.36   100   43.01±0.95   WSX-17   500   33.53±7.55   100   35.95±4.53   WSX-18   500   48.50±6.75   100   51.08±7.29   WSX-19   500   19.29±8.78   100   21.77±1.59   WSX-20   500   48.50±6.75   100   41.90±23.81   WSX-22   500   30.44±13.05   100   60.54±4.49   WSX-25   500   57.09±2.56   100   43.31±10.73   WSX-26   500   60.78±4.11   100   42.90±13.52   WSX-28   500   37.43±1.89   100   36.21±2.62   WSX-29   500   38.21±0.95   100   32.46±5.43   WSX-30   500   39.35±4.98   100   29.98±5.81   WSX-32   500   53.82±5.95   100   40.85±4.65   WSX-33   500   37.29±3.09   100   32.65±2.75   WSX-35   500   27.55±4.62   100   21.77±1.59   WSX-39   500   25.03±2.91   100   18.07±3.73   WSX-73   500   21.08±6.12   100   33.74±11.98   YZK-C-22   500   33.05±5.37   100   38.99±3.52   TDL   500   32.09±2.97   100   37.00±2.08   宁南霉素   500   48.07±4.22   100   38.99±5.74   病毒唑   500   39.15±4.17   100   35.51±1.90