一种能早期、准确评价肝脏功能的检测试剂盒

摘要

本发明提供一种能早期、准确评价肝脏功能的检测试剂盒，即对乙酰氨基酚与对乙酰氨基苯乙醚色谱－分光光度检测试剂盒及其制备和用途。试剂盒由色谱柱、解吸液、水解液、水和显色剂组成，其特征在于色谱柱内充填有能吸附对乙酰氨基酚及对乙酰氨基苯乙醚的填料；解吸液为35％乙醇；水解液为2N盐酸；水为双蒸去离子水；显色剂分别为0.1％1－2奈醌－4－磺酸钠试液、1N NaOH和1N Na

说明书

技术领域

本发明涉及医用检测试剂技术领域，涉及一种能早期、准确评价肝脏功能的检测试剂盒，即对乙酰氨基酚(acetaminophen)与对乙酰氨基苯乙醚(phenacetin)色谱-分光光度检测试剂盒及其制备和用途。

背景技术

在临床工作中，经常遇到一些病人，过去只是乙肝病毒携带者，与肝脏相关的各项检查都正常。体检时，一发现就是肝硬化，甚至肝癌。有些脂肪肝、长期饮酒或慢性肝病的病人，组织学或影像学检查，肝脏的组织结构已明显破坏，但肝功能试验正常。其中部分病人一旦接受肝脏手术或介入治疗，常出现严重肝功能衰竭。

在我国，慢性肝病是常见病和多发病，仅乙型肝炎病毒携带者就高达一亿多人，占我国总人口的10％以上。每年有100万新生儿由于母婴垂直传播，可能会感染乙肝病毒。另外，药物、环境污染以及自身免疫性疾病也是引起肝损害的常见原因。由于慢性肝损害主要发生在青壮年，一旦转变成肝硬化，除诱发肝癌外，其自身也是一种不可逆转的病理过程；给社会和家庭在经济和精神上造成极大的负担和痛苦。

目前，临床上将谷丙转氨酶(SGPT)、谷草转氨酶(SGOT)、γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)和乳酸脱氧酶等测定，统称为肝功能检查，这是不正确的。正如Rochling等人(Clin Cornerstone 2001；3(6)：1-12)指出的那样，这些检查是肝细胞受到损害的指标，并不能反映肝脏的功能。肝脏功能是指：肝脏的解毒功能、肝脏的消化功能、肝脏的生物转化功能、肝脏的排泄功能、肝脏的三大物质代谢功能和肝脏在胚胎期的造血功能。而与这些功能相关的常规检查主要有三个指标，即血浆白蛋白含量测定、血清胆红素含量测定和凝血酶原时间测定。但这三项指标的灵敏度低，特异性差，不能满足临床的需要。

正确评价肝脏功能，是肝脏疾病早期诊断、早期预防和早期治疗的关键。正如Schneider最近在北美临床外科杂志(Surg Clin North Am 2004；84(2)：355-373)撰文所说：开发研制一种能早期、准确评价肝脏功能的诊断试剂非常必要。

发明内容

本发明的目的是提供一种能够同时测定药物制剂或生物样品中的对乙酰氨基酚与对乙酰氨基苯乙醚含量，从而能早期、准确评价肝脏功能的检测试剂盒。

近年来，我们在这一领域进行了探索性研究，取得重大进展。主要包括：(1)建立了一个研究肝外代谢的在体模型，解决了以往无法采用在体实验(invivo experiment)论证肝外代谢的难题。(2)以CYP450 3A2酶为靶点，研究了肝外组织中利多卡因氮位去乙基酶活性。发现利多卡因氮位去乙基代谢产物(MEGX)有30％以上来自肝外代谢。说明采用利多卡因氮位去乙基代谢实验(MEGX test)评价肝脏功能有明显缺陷。(3)以CYP450 1A2酶为靶点，研究了大鼠肝外组织中对乙酰氨基苯乙醚氧位去乙基酶活性及其首过效应。发现对乙酰氨基苯乙醚肝外代谢率极低，且不被经典肝药酶诱导剂苯巴比妥钠所诱导。说明CYP450 1A2酶是评价大鼠肝脏功能或肝脏贮备功能的理想靶点。(4)研究了探针药物代谢的种族差异及其在肝硬化病人的代谢变化。(5)研究了探针药物在肝癌大鼠的代谢变化；并进行了相关的分子药理学研究。(6)最近，我们采用对乙酰氨基苯乙醚氧位去乙基代谢试验，评价了肝硬化和肝癌病人的肝脏功能或肝脏贮备功能。发现正常人口服对乙酰氨基苯乙醚后2小时，其血浆中氧位去乙基代谢产物对乙酰氨基酚含量高达80％，而失代偿肝硬化病人小于25％。说明CYP450 1A2酶也是评价人肝脏功能或肝脏贮备功能的理想靶点。

对乙酰氨基苯乙醚是肝脏细胞色素P450 1A2氧化酶的特异性底物。该酶在肝脏呈组成型表达。正常人口服或注射对乙酰氨基苯乙醚后，肝脏的细胞色素P450 1A2氧化酶能将其全部或绝大部分转化成代谢产物对乙酰氨基酚。在慢性肝病病人，由于肝脏P450 1A2氧化酶活性降低，口服或注射对乙酰氨基苯乙醚后，其代谢产物对乙酰氨基酚的生成减少，因此，血液中对乙酰氨基酚的浓度比正常人明显降低。

对乙酰氨基苯乙醚副作用少，不良反应小，是临床实验的一个理想探针药物。令人遗憾的是，对乙酰氨基酚与对乙酰氨基苯乙醚的测定，基本上都是采用高效液相色谱等精密仪器分析法进行的。这些方法的技术要求高，操作复杂，很难走出实验室，被临床推广应用。本发明采用色谱柱技术，特异性吸附药物制剂或生物样品中的对乙酰氨基酚与对乙酰氨基苯乙醚，用洗脱液解吸后，将对乙酰氨基酚与对乙酰氨基苯乙醚衍生成能够被分光光度计测定的衍生物，以便采用差示光谱法，进行定量分析。实验证明，本发明的一种能早期、准确评价肝脏功能的检测试剂盒，即对乙酰氨基酚与对乙酰氨基苯乙醚色谱-分光光度检测试剂盒操作简便，结果准确，能够同时测定药物制剂或生物样品中的对乙酰氨基酚与对乙酰氨基苯乙醚含量，具有极大的临床实用价值。

本发明的技术方案是：一种能早期、准确评价肝脏功能的检测试剂盒，由色谱柱、解吸液、水解液、水和显色剂组成，其特征在于色谱柱内充填有能吸附对乙酰氨基酚及对乙酰氨基苯乙醚的填料；解吸液为35％乙醇；水解液为2N盐酸；水为双蒸去离子水；显色剂分别为0.1％1-2奈醌-4-磺酸钠试液、1N NaOH和1N Na₂CO₃试液；用分光光度法检测。

在选择色谱柱填料时，我们验证了活性炭、球形活性炭、炭纤维、乙烯树脂、丙烯树脂、苯乙烯树脂和聚氨脂树脂等填料，这些填料对对乙酰氨基酚与对乙酰氨基苯乙醚有较好的吸附性，解吸完全。考虑到外观观感，性价比和临床实用性等综合因素，本发明最后选择了LMHS 180树脂，生产树脂的公司为ROHM AND HAAS。

本发明的一种能早期、准确评价肝脏功能的检测试剂盒，即对乙酰氨基酚与对乙酰氨基苯乙醚色谱-分光光度检测试剂盒属于体外药物浓度测定试剂，主要是由色谱柱、解吸液、水解液和显色液所组成。

试剂盒的组成见下表：

 名称  主要成分  规格  数量 色谱柱  树脂  LMHS 180  0.5ml 水  水  双蒸去离子  6ml 解吸液  35％乙醇  分析纯  2ml 水解液  2N盐酸  分析纯  200μl 显色剂1号  0.1％1-2奈醌-4-磺酸钠  化学试剂  200μl 显色剂2号  1N NaOH  分析纯  200μl 显色剂3号  1N Na2CO₃  分析纯  200μl

色谱柱和试液的制备与质控：

1、装柱与质控

(1)用水清洗柱套(3*10cm)，将其晾干，

(2)吸取LMHS 180树脂0.5毫升，填充色谱柱，

加样误差为±15％

(3)用封口纸封闭色谱柱加样口，室温保存。

(4)质量控制：吸取10μg/ml的对乙酰氨基酚水溶液1毫升上柱，用35％乙醇1毫升解吸。用10μg/ml的对乙酰氨基酚乙醇溶液作对照，解吸液在245nm处的吸光度不低于对照管的95％。

2、35％乙醇(解吸液)

(1)购置市售95％的乙醇，AR级，

(2)每次分装时稀释，用酒精比重计测定其浓度。

乙醇浓度＞30％

3、2N的盐酸溶液(水解液，按中华人民共和国药典2005年版配制)

(1)吸取AR级盐酸180毫升，

(2)加水至1000毫升。

浓度误差＜±5％

4、0.1％1-2奈醌-4-磺酸钠试液(显色液1)的配制与质控

(1)称取1-2奈醌-4-磺酸钠1克，

(2)加水溶解后，定容至1000毫升。

(3)质量控制：吸取1毫升，定容至10毫升。在405nm处的吸光度为0.7±0.035。

避光保存

5.1N Na₂CO₃试液(按中华人民共和国药典2005年版配制)

(1)取一水合Na₂CO₃12.5g或无水Na₂CO₃10.5g(AR级)，

(2)加水使其溶解，定容至100毫升。

6.1N NaOH试液(按中华人民共和国药典2005年版配制)

56毫升NaOH饱和液加水定容至100毫升。

测定原理

对乙酰氨基酚与对乙酰氨基苯乙醚色谱-分光光度检测试剂盒适用于检测药物制剂或生物样品中对乙酰氨基酚与对乙酰氨基苯乙醚的含量。其特点是能够同时准确定量测定对乙酰氨基酚与对乙酰氨基苯乙醚含量，特异性强。生物样品通过色谱柱，对乙酰氨基酚与对乙酰氨基苯乙醚被特异性吸附。解吸后，对乙酰氨基酚与对乙酰氨基苯乙醚被水解、显色，用分光光度计在535、600、610和735nm处读数，通过标准曲线计算其浓度。药物制剂不需要上柱，可直接水解、显色，然后用分光光度计测定。

操作步骤如下：

将色谱柱置于试管架上，打开上下盖；血浆、血清或其它样品1ml上柱，弃去流出液；加去离子水6ml，弃去流出液；滴完后加解吸液2ml，同时收集流出液；加水解液200μl；96-99℃水浴2小时；依次加显色剂1号、2号和3号各200μl；735nm调零后读数。

技术性能指标

1准确度

1.1仪器：岛津2450型UV-分光光度计，比色杯光径为1cm。

1.2测定步骤  取高浓度和低浓度的对乙酰氨基酚与对乙酰氨基苯乙醚定值血清作为检测标本进行检测，每一检测标本进行五次重复测定，计算每个检测标本的测定结果平均值，用相对偏差表示。以定值血清为样品时，测试值与标定值的相对偏差应小于10％。

计算方法如下：

$\mathrm{RE}\%=\frac{|\bar{X}-\mathrm{TV}|}{\mathrm{TV}}\times 100\%$

式中：

RE％-相对偏差

X-每个定值血清测定结果平均值

TV-定值血清标定值

2精密度

2.1仪器：同1.1

2.2测定步骤  取高浓度和低浓度的对乙酰氨基酚与对乙酰氨基苯乙醚定值血清作为检测标本进行检测，每一检测标本进行20次重复测定，计算每个检测标本的测定结果平均值与标准差，用变异系数表示结果。以定值血清为样品时，测试值与标定值的相对偏差应小于10％。计算方法如下：

$\bar{X}=\frac{{\mathrm{\Sigma X}}_i}{n}$

$\mathrm{SD}=\sqrt{\frac{\Sigma {(X_i-\bar{X})}^2}{n-1}}$

$\mathrm{CV}=\frac{\mathrm{SD}}{\bar{x}}\times 100\%$

式中：CV-变异系数，重复性指标

      X_i-定值血清的对乙酰氨基酚与对乙酰氨基苯乙醚浓度测定值；

      X-定值血清浓度的平均值；

      SD-绝对标准差

      i-1，2，3，……，(本实验n＝20)；

3批间差

取三批试剂，每批取三份，分别测定血清标本或定值血清，计算9份试剂测定的平均值(x_p)和每批试剂的测定平均值(x_p1，x_p2，x_p3)，按下列公式求出三个批号试剂测定平均值的相对极差(％)，批间相对极差应小于10％。公式：相对极差

$(\%)=\frac{{\bar{x}}_{\max }-{\bar{x}}_{\min }}{{\bar{X}}_P}\times 100\%$

式中：x_max为x_p1，x_p2，x_p3的最大值

      x_min为x_p1，x_p2，x_p3的最小值

4线性范围

4.1仪器：同1.1

4.2不同浓度对乙酰氨基酚与对乙酰氨基苯乙醚混合血清的制备取5支试管依次编号，按表1配制不同浓度对乙酰氨基酚与对乙酰氨基苯乙醚的混合血清，并分别混匀。

表1.不同浓度对乙酰氨基酚与对乙酰氨基苯乙醚的混合血清(ml)

  试管号  1  2  3  4  5  含20μg/ml对乙酰氨基  酚的血清  0.1  0.25  0.5  0.75  0.9  含20μg/ml对乙酰氨基  苯乙醚的血清  0.9  0.75  0.5  0.25  0.1  对乙酰氨基酚/对乙酰氨  基苯乙醚(μg/ml)  2/18  5/15  10/10  15/5  18/2

4.3测定步骤

对表1中配制的5个不同浓度标本进行测定，每一浓度重复3次，根据下列公式计算相关系数r，截距b和斜率a：

$r=\frac{\mathrm{n\Sigma }{x}_i{y}_i-\Sigma x_i·\Sigma y_i}{\sqrt{[\mathrm{n\Sigma }{x_i}^2-{\left(\Sigma x_i\right)}^2]·[\mathrm{n\Sigma }{y_i}^2-{\left(\Sigma y_i\right)}^2}]}$

$a=\frac{\mathrm{n\Sigma }{x}_i{y}_i-\Sigma x_i·y_i}{\mathrm{n\Sigma }{x_i}^2-{\left(\Sigma x_i\right)}^2}$

$b=\frac{\Sigma y_i-\mathrm{a\Sigma }{x}_i}{n}$

式中：r-相关系数；

      a-回归方程的斜率；

      b-回归方程截距的绝对值；

      x_i-测定管溶液的对乙酰氨基酚与对乙酰氨基苯乙醚浓度的测定值；

      y_i-与测定管溶液浓度相适应的吸光度；

      i-1，2，3，……n；

      n-测定样品数；

线性范围：对乙酰氨基酚为2-18μg/ml，对乙酰氨基苯乙醚为2-18μg/ml，相关系数r应大于0.999。

5装量

色谱柱中的树脂和每个试管中的试液装量不少于标示量的95％。

6干扰试验

在对乙酰氨基酚与对乙酰氨基苯乙醚定值血清中，分别加入临床67种治疗浓度的常用药物作为检测标本进行检测，每一检测标本进行3次重复测定，计算每个检测标本的测定结果平均值，用均数±标准差表示测定结果。以定值血清为样品时，测试值与标定值的相对偏差小于10％。

7稳定性

试剂盒在室温下避光保存18个月，质量检查符合有关规定。

在整个研制过程中，我们同时采用高效液相色谱仪，随机抽样检测，比较两种不同方法的测定结果，以确保实验的准确、可靠。

与其它肝功能试验的比较

●Child-Pugh分级法是目前临床评价肝脏功能最常用的方法。正如Rochling等人所说，该方法是以血浆白蛋白含量、胆红素含量、凝血酶原时间、体重、腹水、精神状态等综合指标为标准，所以灵敏度低，特异性差。

●探针药物(Probe drug)和鸡尾酒试验(cock-tail test)。探针药物和鸡尾酒试验的基本原理是，口服或静脉注射一种或几种探针药物，测定其代谢产物或体内动力学过程，评价肝脏的生物转化功能。该方法的主要缺点是：①对绝大多数探针药物来说，肝脏不是其唯一的代谢器官，甚至肝外代谢的能力还很强；②代谢产物的形成及探针药物的动力学过程除与肝脏功能有关外，还受吸收、组织分布、血浆蛋白结合率、肾脏排泄功能等因素的影响。

对乙酰氨基酚与对乙酰氨基苯乙醚色谱-分光光度检测试剂盒比现有其它方法灵敏度高，特异性好的主要原因：①对乙酰氨基苯乙醚氧位去乙基酶在肝脏呈组成型表达，肝外活性极低；②我们对传统研究方法-即口服或注射探针药物→测定其代谢产物→评价肝脏功能，做了重大改进。我们采用探针药物与代谢产物的比值，替代单纯测定代谢产物作为指标，评价肝脏功能。由于母核药物与其代谢产物理化性质极为近似，采用探针药物与代谢产物的浓度比值作为指标，消除了因组织分布，血浆蛋白结合率、肾脏排泄功能等个体间差异造成的非特异性干扰，使检测方法的特异性大大增加。

临床应用范围

该发明填补了临床评价肝脏功能的空白，其应用范围十分广泛。对乙酰氨基酚与对乙酰氨基苯乙醚色谱-分光光度检测试剂盒的临床应用至少包括：

●检查乙肝病毒携带者肝脏功能是否受到影响；

●评价慢性肝病病人肝脏功能的损害程度；

●脂肪肝和长期饮酒者肝脏功能是否正常；

●为肝移植病人选择一个好的供肝；

●在肝脏手术时，确定病人肝脏是否能接受手术，肝脏能切除多少；

●肝癌的病人能否接受介入治疗；

●药物损害和自身免疫性疾病病人的肝功能受损程度；

●其他：动物实验、新药设计与开发、药物不良反应的检测等。

具体实施方式

实施例一：

《对乙酰氨基酚与对乙酰氨基苯乙醚色谱-分光光度检测试剂盒》测定药物中对乙酰氨基酚与对乙酰氨基苯乙醚含量实验

目的：研究《对乙酰氨基酚与对乙酰氨基苯乙醚色谱-分光光度检测试剂盒》是否能够用于测定药物制剂中对乙酰氨基酚与对乙酰氨基苯乙醚含量。

仪器与试验药物：岛津2450型UV-分光光度计(日本岛津公司制造)；复方阿斯匹林片(APC，每片含对乙酰氨基苯乙醚0.15克、阿斯匹林0.22克和咖啡因0.035克，武汉远大制药集团股份有限公司生产，H42021758)；对乙酰氨基酚片(0.3克/片，东北制药集团有限责任公司提供)。

操作步骤：随机抽取复方阿斯匹林9片和对乙酰氨基酚9片，分别分成三份，每份三片。充分研磨后，加适量双蒸去离子水混匀。过滤后，定容至1000毫升。

样品1：取复方阿斯匹林水溶液20毫升，定容至1000毫升，每毫升含对乙酰氨基苯乙醚9μg。

样品2：取对乙酰氨基酚水溶液10毫升，定容至1000毫升，每毫升含对乙酰氨基酚9μg。

样品3：取复方阿斯匹林水溶液20毫升和对乙酰氨基酚水溶液10毫升，定容至1000毫升，每毫升含对乙酰氨基苯乙醚9μg和对乙酰氨基酚9μg。

对照品：对乙酰氨基酚和对乙酰氨基苯乙醚的标准品(购于Sigma Co)。

使用《对乙酰氨基酚与对乙酰氨基苯乙醚色谱-分光光度检测试剂盒》，按《操作步骤》描述的方法操作。

实验结果：样品1、样品2和样品3的实验结果见表2。

表2.样品1、样品2和样品3的测定结果(μg/ml，均数±标准差)

复方阿斯匹林和对乙酰氨基酚是临床常用的解热镇痛药。复方阿斯匹林由三种成分组成，其中包括对乙酰氨基苯乙醚。本实施例的实验结果表明，无论是单一组分的对乙酰氨基酚，还是复方组分的对乙酰氨基苯乙醚，都能使用《对乙酰氨基酚与对乙酰氨基苯乙醚色谱-分光光度检测试剂盒》进行检测。其实测值与标示量的误差小于1.4％，变异系数小于1.6％，复方阿斯匹林片中的阿斯匹林和咖啡因不影响对乙酰氨基苯乙醚的测定。说明该方法准确、可靠，特异性强。样品3的测定结果表明，《对乙酰氨基酚与对乙酰氨基苯乙醚色谱-分光光度检测试剂盒》能够同时测定药物制剂中对乙酰氨基酚与对乙酰氨基苯乙醚的含量，其结果同样准确、可靠。

实施例二：

《对乙酰氨基酚与对乙酰氨基苯乙醚色谱-分光光度检测试剂盒》测定人血液、唾液和尿液中对乙酰氨基酚与对乙酰氨基苯乙醚含量实验

目的：(1)研究《对乙酰氨基酚与对乙酰氨基苯乙醚色谱-分光光度检测试剂盒》是否能够用于测定人血液、唾液和尿液中对乙酰氨基酚与对乙酰氨基苯乙醚含量，(2)用《对乙酰氨基酚与对乙酰氨基苯乙醚色谱-分光光度检测试剂盒》作为检测方法，正常人与慢性肝病病人血液中对乙酰氨基酚和对乙酰氨基苯乙醚含量是否有差异，(3)《对乙酰氨基酚与对乙酰氨基苯乙醚色谱-分光光度检测试剂盒》的测定结果与高效液相色谱的测定结果是否吻合。

仪器与试验药物：岛津2450型UV-分光光度计(日本岛津公司制造)；20A型高效液相色谱仪(日本岛津公司制造，ODS_c18色谱柱4.6×250mm，流动相：乙腈-0.1％甲酸(30∶70)，等度洗脱，流速1mL/min，进样体积为20μL)；对乙酰氨基苯乙醚(佳木斯鹿灵制药有限公司提供)。

受试对象：12例慢性肝病病人，Child-Pugh分级为C级。年龄39-58岁，其中男性9例，女性3例。正常对照组8人，男女参半，年龄22-49岁。所有受试者均知情同意，并经伦理委员会讨论、同意。

操作步骤：所有受试者于晚饭后开始禁食，次日晨口服对乙酰氨基苯乙醚1.0克，用200毫升温开水服下。给药后二小时，抽取静脉血3毫升，置于抗凝管内。正常对照组同时收集唾液2毫升，并收集24的尿液，精确测定其体积后取样，-20℃保存。所有受试者抽血后进早餐，饮水不限。

使用《对乙酰氨基酚与对乙酰氨基苯乙醚色谱-分光光度检测试剂盒》，按《操作步骤》描述的方法操作，测定上述所有标本中对乙酰氨基酚和对乙酰氨基苯乙醚含量。另外，使用高效液相色谱法，测定肝硬化病人和正常人血液中对乙酰氨基酚和对乙酰氨基苯乙醚含量，比较两种不同测定方法的测定结果。

实验结果：

8例正常人唾液和尿液中对乙酰氨基酚与对乙酰氨基苯乙醚的含量见表3。

表3.8例正常人唾液和尿液中对乙酰氨基酚与对乙酰氨基苯乙醚的含量(μg/ml，均数±标准差)

  对乙酰氨基酚  对乙酰氨基苯乙醚  唾液  5.83±3.51  2.04±1.77  尿液  12.19±8.07  3.40±2.26

12例慢性肝病病人和8例正常人血液中对乙酰氨基酚与对乙酰氨基苯乙醚的含量见表4。

表4.慢性肝病病人和正常人血液中对乙酰氨基酚与对乙酰氨基苯乙醚的含量(μg/ml，均数±标准差)

与正常人比，^*P＜0.01

实验结果表明，《对乙酰氨基酚与对乙酰氨基苯乙醚色谱-分光光度检测试剂盒》能够用于测定人血液、唾液和尿液中对乙酰氨基酚与对乙酰氨基苯乙醚含量。与正常人相比，无论使用《对乙酰氨基酚与对乙酰氨基苯乙醚色谱-分光光度检测试剂盒》作为检测方法，还是使用高效液相色谱法，慢性肝病病人血液中对乙酰氨基酚含量明显减少，而对乙酰氨基苯乙醚含量显著增加。与高效液相色谱法比，使用《对乙酰氨基酚与对乙酰氨基苯乙醚色谱-分光光度检测试剂盒》测定血液中对乙酰氨基酚与对乙酰氨基苯乙醚含量，具有以下优点：(1)不需要用有机溶剂萃取血液中的对乙酰氨基酚和对乙酰氨基苯乙醚，(2)操作方便、简单。另外，本实施例还表明，使用《对乙酰氨基酚与对乙酰氨基苯乙醚色谱-分光光度检测试剂盒》测定血液中对乙酰氨基酚与对乙酰氨基苯乙醚含量，所得结果与高效液相色谱法极为近似，相对偏差小于5％。说明采用《对乙酰氨基酚与对乙酰氨基苯乙醚色谱-分光光度检测试剂盒》测定血液中对乙酰氨基酚与对乙酰氨基苯乙醚含量，方法准确、可靠。