灵芝孢子油的制备方法

摘要

本发明属于生物工程技术领域，公开一种灵芝孢子油的制备方法。一种灵芝孢子油的制备方法，其步骤包括：选用经水洗破壁的段木灵芝孢子粉为原料，用溶剂润湿制粒，在30～55℃温度下干燥至含水量小于3％；投料于超临界二氧化碳萃取釜中，采用超临界二氧化碳萃取，萃取压力为28～35MPa，温度为42～48℃，二氧化碳流量20－30L/H，萃取时间为1.5～2小时，然后二级分离，第一级分离压力8～10MPa，分离温度53～57℃，第二级分离压力3～5MPa，分离温度30～40℃；将二级分离后的混合物于常温下静置10～20天，其后取上清液过滤，得到浅黄色油状物；得到的油状物，进一步经过分离纯化，得到产物。本发明灵芝孢子油的制备方法，萃取时间短，产物收率高，有效成分含量高，压力适宜，操作条件温和，容易工业化生产。

说明书

技术领域

本发明涉及灵芝孢子油的制备方法，尤其是用超临界二氧化碳萃取灵芝孢子油的方法。

背景技术

灵芝[Ganoderma Lucidum(Curtis:Fr)P.Karst]，俗称灵芝草，瑞草，属担子菌纲，多孔菌科，是传统扶正固本，滋补强壮的名贵中药，在我国有5000多年的药用食用历史。在不同生态环境均有相适宜的种类分布，已构成了丰富的灵芝类群，尤其赤灵芝效用最为突出。

灵芝孢子是灵芝在成熟时期不断从菌盖下喷射出的生殖细胞，这些微细胞子是繁殖下一代灵芝的种子，它是灵芝的全部遗传物质和孕育新生命所必须的营养精华。

灵芝孢子有坚韧的外壳，由几丁质、钙、磷、铁等构成，不溶解于水、弱酸等，不容易被胃酸所破坏，成为人体吸收其有效成分的主要障碍。通常采用超微粉破壁或酶解破壁技术对灵芝孢子进行破壁、破壁率达99％以上，粒度达到1500目以上。

破壁灵芝孢子中的主要成分为三萜类化合物及脂肪酸等，均为亲脂性碳氢化合物和类脂有机化合物，能溶于CHCl₃、CH₃OH等有机溶剂，在超临界CO₂流体中有较佳溶解性。超临界CO₂流体萃取工艺，因为CO₂无色、无味、无毒，不易燃易爆，避免了有机溶剂提取的危险，使用较安全，而且萃取结束后无溶剂残留问题；另外萃取温度较低，可避免常规提取过程可能产生的分解、形成未知化合物沉淀等反应，适合于灵芝孢子有效成分的萃取。专利CN 1194079C公开了一种灵芝孢子油超临界CO₂萃取制备方法，将灵芝孢子膨化、制粒和经超临界CO2萃取孢子油，该方法采用了灵芝孢子膨化过程，其中温度较高(达80-140℃)，加速了破壁后灵芝孢子年油脂累物质的氧化及酸化过程，影响了孢子油的品质。专利CN 1114446C也公开了一种灵芝孢子有效性物质的萃取方法，涉及将灵芝孢子破壁、超临界CO₂萃取过程。但超临界CO₂流体萃取压力为5MPa-60MPa、萃取温度为32-85℃、CO₂流体流量为5Kg/h-80Kg/h，在实际生产中难以在如此宽泛的工艺条件下得到高纯度和高出油率的孢子油产品。专利CN 1094766C公开了一种灵芝孢子油的超临界CO₂萃取加工方法，涉及将灵芝孢子与水、明胶或淀粉的混合物为粘合剂制粒成型后进行超临界萃取。涉及的超临界萃取温度、压力较宽，生产时难以掌握好工艺条件制得高纯度孢子油产品，同时萃取时间也长达35小时，难以真正实现工业化。

发明内容

本发明的目的是克服现有技术的不足，提供一种简单、高效、易于工业化的灵芝孢子油制备方法。

本发明解决技术问题的技术方案为：

一种灵芝孢子油的制备方法，其特征在于包括：

(1)选用经水洗破壁的段木灵芝孢子粉为原料，用溶剂润湿制粒，在30～55℃温度下干燥至含水量小于3％；

(2)投料于超临界二氧化碳萃取釜中，采用超临界二氧化碳萃取，萃取压力为28～35MPa，温度为42～48℃，二氧化碳流量为20-30L/H，萃取时间为1.5～2小时，然后二级分离，第一级分离压力8～10MPa，分离温度53～57℃，第二级分离压力3～5Mpa，分离温度30～40℃；

(3)将二级分离后的混合物于常温下静置10～20天，然后取上清液过滤，得到浅黄色油状物；

(4)得到的油状物，进一步经过分离纯化，得到产物。

在一种优选的技术方案中，所述溶剂为纯净水。

在一种优选的技术方案中，制粒成20目或更小的颗粒。

本发明的方法具有如下有益效果：萃取时间短，产物收率高，有效成分含量高，压力适宜，操作条件温和，容易工业化生产。

具体实施方式

本发明选段木赤灵芝孢子粉为原料，经过水洗，去除泥沙等杂质和不饱满的灵芝孢子粉。具体工艺：将新鲜的段木赤灵芝孢子粉倒入瓦缸，加入8倍重量的自来水，充分搅拌均匀静置5小时，去掉水、上面的飘浮物及底层的泥沙等杂质，得到饱满纯净的灵芝孢子粉，烘干后低温物理破壁，破壁率99％以上备用。

以下用实施例来描述本发明，但实施例不构成对本发明的任何限制。

实施例1

取破壁的灵芝孢子粉1Kg，用纯水作湿润剂，制成软材，挤压造成20目粒后，在60℃下干燥3小时，得含水量为2.8％的孢子粉颗粒。置于10升超临界二氧化碳萃取釜中，二氧化碳经高压泵加压，循环萃取。萃取釜的压力为35MPa，温度为42℃。二氧化碳流量25L/H，一级分离压力为10MPa，温度为57℃。二级分离压力为5MPa，温度为32℃。连续萃取2小时后，于分离器中收集得到的油状物。在常温下静置15天，取上层淡黄色具有孢子粉特殊气味的油状液体，用超滤膜设备过滤，过滤精度0.1微米，得到油状物0.283Kg，收率28.3％。其检测结果见表1。

实施例2

取经水洗破壁的灵芝孢子粉1Kg，用纯水作湿润剂，制成软材，挤压造成20目粒后，在45℃下干燥2小时，得含水量小于3％的孢子粉颗粒。置于10升超临界二氧化碳萃取釜中，二氧化碳经高压泵加压，循环萃取。萃取釜的压力为34MPa，温度为47℃，二氧化碳流量29L/H，一级分离压力为9MPa，温度为56℃。二级分离压力为4MPa，温度为31℃。连续萃取1.5小时后，于分离器中收集得到的混合物。在常温下静置20天，取上层淡黄色具有孢子粉特殊气味的油状液体，用超滤膜设备过滤，过滤精度0.1微米，得到油状物0.285Kg，收率28.5％。其检测结果见表1。

实施例3

取破壁的灵芝孢子粉1Kg，用纯水作湿润剂，制成软材，挤压造成20目粒后，在45℃下干燥2小时，得含水量为2.9％的孢子粉颗粒。置于10升超临界二氧化碳萃取釜中，二氧化碳经高压泵加压，循环萃取。萃取釜的压力为33MPa，温度为44℃，二氧化碳流量30L/H，一级分离压力为8MPa，温度为57℃。二级分离压力为3MPa，温度为32℃。连续萃取4小时后，于分离器中收集得到的混合物。在常温下静置10天，取上层淡黄色具有孢子粉特殊气味的油状液体，用超滤膜设备过滤，过滤精度0.1微米，得到油状物0.282Kg，收率28.2％。其检测结果见表1。

实施例4

取破壁的灵芝孢子粉1Kg，用纯水作湿润剂，制成软材，挤压造成20目粒后，在60℃下干燥3小时，得含水量为2.9％的孢子粉颗粒。置于10升超临界二氧化碳萃取釜中，二氧化碳经高压泵加压，循环萃取。萃取釜的压力为32MPa，温度为44℃，二氧化碳流量26L/H，一级分离压力为10MPa，温度为53℃。二级分离压力为5MPa，温度为28℃。连续萃取3小时后，于分离器中收集得到的混合物。在常温下静置12天，取上层淡黄色具有孢子粉特殊气味的油状液体，用超滤膜设备过滤，过滤精度0.1微米，得到油状物0.280Kg，收率28.0％。其检测结果见表1。

实施例5

取破壁的灵芝孢子粉1Kg，用纯水作湿润剂，制成软材，挤压造成20目粒后，在60℃下干燥3小时，得含水量小于2.9％的孢子粉颗粒。置于10升超临界二氧化碳萃取釜中，二氧化碳经高压泵加压，循环萃取。萃取釜的压力为30MPa，温度为46℃，二氧化碳流量28L/H，一级分离压力为9MPa，温度为55℃。二级分离压力为4MPa，温度为30℃。连续萃取3小时后，于分离器中收集得到的混合物。在常温下静置15天，取上层淡黄色具有孢子粉特殊气味的油状液体，用超滤膜设备过滤，过滤精度0.1微米，得到油状物0.286Kg，收率28.6％。其检测结果见表1。

实施例6

取破壁的灵芝孢子粉1Kg，用纯水作湿润剂，制成软材，挤压造成20目粒后，在60℃下干燥2小时，得含水量为2.9％的孢子粉颗粒。置于10升超临界二氧化碳萃取釜中，二氧化碳经高压泵加压，循环萃取。萃取釜的压力为28Mpa，温度为48℃，二氧化碳流量20L/H，一级分离压力为10MPa，温度为53℃。二级分离压力为5MPa，温度为28℃。连续萃取3小时后，于分离器中收集得到的混合物。在常温下静置15天，取上层淡黄色具有孢子粉特殊气味的油状液体，用超滤膜设备过滤，过滤精度0.1微米，得到油状物0.278Kg，收率27.8％。其检测结果见表1。

采用常规方法，检测各实施例中得到产物的总三萜含量(经高氯酸-香草素反应后，以色谱法作三萜类含量分析，以齐墩果酸计)、酸价、相对密度(20℃、4℃)和折光率，得到结果如表1所示。

表1