一种突变NfpAB纳米孔、测试系统及制作方法与应用

摘要

本发明公开了一种突变NfpAB纳米孔，其为由至少一个NfpA蛋白突变单体和NfpB蛋白突变单体组成的蛋白复合体，或为由至少两个NfpA与NfpB融合突变基因表达的突变单体组成的蛋白复合体。其具有与已知纳米孔不同的结构和识别位点，能用于核酸、多肽、蛋白质等多聚物的鉴定、浓度检测及测序其允许捕捉及转移单链DNA并区分腺嘌呤(A)，胸腺嘧啶(T)，胞嘧啶(C)及鸟嘌呤(G)。NfpAB突变体由两个不同单体组合而成，丰富了孔道内部的改造空间，孔道具有类似MspA的锥形孔道结构，是核酸测序的理想孔道。还公开了含有该纳米孔的测试系统、制作方法及应用，通过对纳米孔内部的工程化定点突变，调整孔道内部的电荷分布，降低核酸穿过孔道时的速度，实现了碱基精准识别。