牛支原体、牛结核分枝杆菌、牛多杀性巴氏杆菌的三重PCR快速诊断试剂盒

摘要

本发明涉及一种牛支原体、牛结核分枝杆菌、牛多杀性巴氏杆菌的三重PCR快速诊断试剂盒。所述试剂盒的PCR引物为牛支原体oppD基因序列、牛多杀性巴氏杆菌Pm‑kmt基因序列、牛结核分枝杆菌IS6110基因序列的特异性引物。本发明通过对单一PCR进行优化后建立了三重PCR，通过优化试验，确定该三重PCR的最佳扩增条件为：94℃10min预变性；94℃1min，58℃50s,72℃1min，循环30次；72℃10min延伸。本发明提供的试剂盒，可用于牛支原体、牛多杀性巴氏杆菌、牛结核分枝杆菌单一和混合感染的鉴别诊断。试验结果证明试剂盒具有准确、快速、特异强、灵敏度高的特点，能有效检出牛支原体、牛多杀性巴氏杆菌、牛结核分枝杆菌，具有较好的重复性。