T细胞免疫检查点PD-1的适配体筛选、鉴定方法及抗肿瘤应用

摘要

本发明涉及一种T细胞免疫检查点PD‑1的适配体筛选、鉴定方法及抗肿瘤应用，包括以下步骤：1）干粉ss DNA文库的预处理；2）正筛选；3）反筛选；4）PCR扩增；5）单链DNA制备；6）多轮筛选；7）克隆与测序；8）流式细胞术检测；9）免疫荧光检测；10）检测及分离；11）切片；12）检测中Bi‑Apt的封闭性，本发明通过细胞筛选针对于PD‑1蛋白的适配体，采用将靶蛋白表达在细胞膜表面，通过自行构建293T细胞系实现对靶标分子PD‑1的稳定表达，选取T细胞并将其表面免疫抑制性靶点PD‑1进行封闭，在靶分子方面选择的是特异表达的PD‑1分子，完成整个筛选过程，本发明可以在人体抗肿瘤临床中试验应用，为人类对抗肿瘤的临床使用提供了一种很好的方法。