一种猪种布鲁氏菌BI-1基因缺失菌株及其构建方法和应用

摘要

一株猪种布鲁氏菌BI‑1基因缺失菌株及其构建方法和应用，该菌株是通过卡那霉素抗性基因替换猪种布鲁氏菌BI‑1基因得到的，其主要步骤为：以猪种布鲁氏菌S2疫苗株基因组为模板，PCR扩增得到BI‑1基因上、下游同源臂，与同样PCR扩增得到的卡那霉素抗性基因片段一起克隆入pUC18质粒，获得同源重组缺失质粒pUC18‑BI1‑KanR。将该质粒电转化猪种布鲁氏菌感受态细胞，经PCR鉴定，所得阳性转化子即为猪种布鲁氏菌BI‑1缺失菌株。与野生型菌株相比，该缺失菌株表现出生长速度减缓，菌落减小，细胞膜通透性增加，细胞聚合性增强等特点，提示该缺失菌株具有作为布鲁氏菌减毒活疫苗的潜质。