一种牛、羊粪便发酵复合菌、制备方法以及使用所述复合菌发酵制备有机肥的方法

摘要

本发明公开了一种牛、羊粪便发酵复合菌、制备方法以及使用所述复合菌发酵制备有机肥的方法,发酵复合菌包含以下原料菌种：枯草芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、绿色木霉和里氏木霉。将牛、羊粪便与稻壳混合，将发酵复合菌按照1～2Kg/t的用量添加进去混合均匀，混合原料的水分为50～65wt％；将混合原料码堆成条形肥堆，维持温度为55～65℃开始发酵，每隔1～2天进行一次翻堆，发酵期间保持水分含量50～65wt％；至发酵堆温度降为常温后，发酵结束，得到含水率为20～30wt％的有机肥。本发明用于牛、羊粪便发酵，相比现有技术，生产投资小，生产成本低，使用方便，无臭味，发酵腐熟效果好。

说明书

技术领域

本发明涉及微生物发酵技术领域，具体涉及一种用于对牛、羊粪便发酵制 备有机肥的复合菌及其发酵技术。

背景技术

规模化、集约化畜禽养殖业的迅速发展，为人民生活水平的提高作出了巨 大贡献，同时也产生了大量的畜禽粪便，造成了严重的环境污染。然而目前集 约化养殖场的有机废弃物只有30％左右得到初步处理和利用，70％则直接向环境 中排放。解决畜禽粪便的排放和环境污染问题，已成为关系到人类生存和发展 以及21世纪中国生态农业发展的大问题。畜禽粪便特别是牛(羊)粪中的有机 物含量很高，而且还含有一定量的氮、磷、钾、钙、镁以及各种微量元素等营 养成分。可以做为有机肥料的原料。

传统的堆肥腐熟过程是一个由自然微生物参与的生理生化过程，由于土著 微生物的数量和种类有限，在堆肥初期难以快速繁殖，导致堆肥升温慢，发酵 周期长，肥效低等问题。人工加入外源微生物菌剂可以调节堆肥的微生态环境， 优化菌群结构，提高微生物活性，加强菌株间的协调作用，加快堆肥有机质的 降解，从而有效的解决了传统堆肥所存在的问题。

发明内容

本发明所要解决的第一个技术问题是：针对现有技术存在的不足，提供一 种生产成本低、发酵效果好、发酵周期短、发酵得到的有机肥肥效高、对农作 物无伤害的牛、羊粪便发酵复合菌。

本发明所要解决的第二个技术问题是：针对现有技术存在的不足，提供一 种生产成本低、发酵效果好、发酵周期短、发酵得到的有机肥肥效高、对农作 物无伤害的牛、羊粪便发酵复合菌的制备方法。

本发明所要解决的第三个技术问题是：针对现有技术存在的不足，提供一 种使用发酵复合菌发酵牛、羊粪便制备有机肥的方法，该方法生产投资小、生 产成本低、发酵效果好、发酵周期短、发酵得到的有机肥肥效高、对农作物无 伤害。

为解决上述第一个技术问题，本发明的技术方案是：

一种牛、羊粪便发酵复合菌，包含以下重量份数的原料菌种：

为解决上述第二个技术问题，本发明的技术方案是：

制备牛、羊粪便发酵复合菌的方法，包括以下步骤：分别将枯草芽孢杆菌、 凝结芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、绿色木霉和里氏木霉的菌种进行高密度培养， 首先接种至装有体积比为15～30％的培养基的摇瓶中活化培养，将培养好的菌 种接种到发酵罐内进行发酵扩大培养，将扩大培养得到的各种单菌脱水干燥， 制备成休眠体微生物干粉，然后按照枯草芽孢杆菌20～30份，地衣芽孢杆菌 20～25份，凝结芽孢杆菌10～25份，巨大芽孢杆菌10～20份和绿色木霉8～ 15份的重量比，混合得到所述发酵复合菌。

其中，所述枯草芽孢杆菌的休眠体微生物干粉的制备包括以下步骤：

将纯化培养的斜面培养基上的枯草芽孢杆菌菌种接种至装有体积比为 15～30％的活化培养基的摇瓶中，所述活化培养基的配方为葡萄糖18～22g/L、 蛋白胨12～18g/L、氯化钠3～7g/L和牛肉膏0.2～0.8g/L，在培养温度为36～ 40℃,摇瓶转速180～220rpm培养20～32h；

将活化培养好的枯草芽孢杆菌菌种接种到装有体积比为50～70％的发酵培 养基的发酵罐内，体积接种量为1～3％，所述发酵培养基的配方为玉米粉10～ 15g/L、葡萄糖3～8g/L、豆饼粉18～22g/L、鱼粉3～8g/L、碳酸钙5～9g/L、 硫酸铵0.8～1.2g/L、磷酸氢二钾0.1～0.5g/L、硫酸镁0.1～0.3g/L和硫酸 锰0.1～0.3g/L，在培养温度为36～40℃,发酵罐搅拌转速200～220rpm培养 20～32h，发酵罐中枯草芽孢杆菌含量≥10⁹个/ml，然后将发酵得到的枯草芽孢 杆菌单菌经干燥制备成休眠体微生物干粉。

其中，所述凝结芽孢杆菌的休眠体微生物干粉的制备包括以下步骤：

将纯化培养的斜面培养基上的凝结芽孢杆菌菌种接种至装有体积比为 15～30％的活化培养基的摇瓶中，所述活化培养基的配方为葡萄糖10～12g/L、 蛋白胨8～12g/L、牛肉膏1～5g/L和氯化钠3～7g/L，在培养温度为36～40℃, 摇瓶转速180～220rpm培养20～32h；

将活化培养好的凝结芽孢杆菌菌种接种到装有体积比为50～70％的发酵培 养基的发酵罐内，体积接种量为1～3％，所述发酵培养基的配方为麸皮20～ 25g/L、葡萄糖11～15g/L、豆饼粉12～18g/L、磷酸氢二钾0.05～0.15g/L、 硫酸镁0.05～0.15g/L和氯化钙2～6g/L，在培养温度为36～40℃,发酵罐搅拌 转速200～220rpm培养30～40h，发酵罐中凝结芽孢杆菌含量≥10⁹个/ml，然后 将发酵得到的凝结芽孢杆菌单菌经干燥制备成休眠体微生物干粉。

其中，所述巨大芽孢杆菌的休眠体微生物干粉的制备包括以下步骤：

将纯化培养的斜面培养基上的巨大芽孢杆菌菌种接种至装有体积比为 15～30％的活化培养基的摇瓶中，所述活化培养基的配方为蛋白胨8～12g/L、 牛肉膏1～5g/L和氯化钠3～7g/L，在培养温度为36～40℃,摇瓶转速180～ 220rpm培养20～32h；

将活化培养好的巨大芽孢杆菌菌种接种到装有体积比为50～70％的发酵培 养基的发酵罐内，体积接种量为1～3％，所述发酵培养基的配方为豆饼粉20～ 26g/L、玉米粉12～20g/L、磷酸氢二钾0.05～0.15g/L、磷酸二氢钾0.05～ 0.15g/L和氯化钙2～6g/L，在培养温度为36～40℃,发酵罐搅拌转速200～ 220rpm培养20～32h，发酵罐中巨大芽孢杆菌含量≥10⁹个/ml，然后将发酵得到 的巨大芽孢杆菌单菌经干燥制备成休眠体微生物干粉。

其中，所述绿色木霉的休眠体微生物干粉的制备包括以下步骤：

将纯化培养的斜面培养基上的绿色木霉菌种接种至装有体积比为15～30％ 的活化培养基的摇瓶中，所述活化培养基为麦芽汁马铃薯蔗糖培养基，在培养 温度为28～30℃、摇瓶转速140～180rpm，活化培养32～48h；

将活化培养好的绿色木霉菌种接种到装有体积比为50～70％的发酵培养基 的发酵罐内，接种量为体积比1～3％，所述发酵培养基的配方为葡萄糖8～ 12g/L、玉米芯5～6g/L、氯化钙0.2～0.6g/L、硫酸镁0.1～0.5g/L、磷酸二 氢钾18～22g/L、酵母膏8～12g/L、硫酸亚铁3～7mg/L、硫酸锌1.0～1.8mg/L、 氯化钴3.5～4.0mg/L和硫酸锰1.2～1.8mg/L，在培养温度为28～30℃,发酵罐 搅拌转速140～180rpm，扩大培养68～84h，至发酵罐中绿色木霉含量≥10⁸个 /ml，然后将发酵得到的绿色木霉单菌经冷冻干燥制备成休眠体微生物干粉。

其中，所述里氏木霉的休眠体微生物干粉的制备包括以下步骤：

将纯化培养的斜面培养基上的里氏木霉菌种接种至装有体积比为15～30％ 的活化培养基的摇瓶中，所述活化培养基为马铃薯葡萄糖培养基，在培养温度 为28～30℃、摇瓶转速140～180rpm，活化培养32～48h；

将活化培养好的里氏木霉菌种接种到装有体积比为50～70％的发酵培养基 的发酵罐内，接种量为体积比1～3％，所述发酵培养基的配方为葡萄糖8～ 12g/L、酵母粉7～12g/L、氯化钙0.2～0.6g/L、硫酸镁0.1～0.5g/L、磷酸二 氢钾18～22g/L、硫酸亚铁3～7mg/L、硫酸锌1.0～1.8mg/L、氯化钴3.5～ 4.0mg/L和硫酸锰1.2～1.8mg/L，在培养温度为28～30℃,发酵罐搅拌转速 140～180rpm，扩大培养68～84h，至发酵罐中里氏木霉含量≥10⁸个/ml，然后 将发酵得到的里氏木霉单菌经冷冻干燥制备成休眠体微生物干粉。

本发明中的枯草芽孢杆菌是α-淀粉酶和中性蛋白酶的重要生产菌，枯草芽 孢杆菌菌体生长过程中产生的枯草菌素、多粘菌素、制霉菌素、短杆菌肽等活 性物质，对致病菌或内源性感染的条件致病菌有明显的抑制作用；可以抑制粪 便中的致病菌；枯草芽孢杆菌菌体自身合成α-淀粉酶、蛋白酶等酶类，可以分 解牛(羊)粪中的淀粉、蛋白质等大颗粒。

本发明中的凝结芽孢杆菌在生长繁殖过程中可以产生一些酸性物质，抑制 牛(羊)粪中致病菌的生长，还可以活化土壤，为植物提供营养。

本发明中的巨大芽孢杆菌可以将牛(羊)粪中的蛋白质等大颗粒分解成氨 基酸等小分子物质，还可用来生产解磷固钾有机肥。巨大芽孢杆菌具有很好的 降解土壤中有机磷的功效，是生产生物有机肥的常用菌种，巨大芽孢杆菌会分 泌有机酸类等物质溶解土壤中作物不易吸收的钙磷化合物、铁磷化合物及铝磷 化合物，促使土壤无效磷的溶解及利用，进而协助土壤中微生物的增长，预防 土壤病害发生，减少连作障碍等问题，以达到土壤改良的功效。

本发明中的绿色木霉能产生多种具有生物活性的酶系，如：纤维素酶、几 丁质酶、木聚糖酶等。绿色木霉是产纤维素酶活性最高的菌株之一，所产生的 纤维素酶可以降解牛(羊)粪中未被动物消化的大量植物纤维，效果非常好， 又是一种资源丰富的拮抗微生物，在生物防治中具有重要的作用，具有保护和 治疗双重功效，可有效防治土传性病害。

本发明中的里氏木霉也是产纤维素酶活性最高的菌株之一，还可以产生木 聚糖酶、葡聚糖酶等。所产生的各种酶可以降解牛(羊)粪中或者填料中的大 量植物纤维、木聚糖等大分子物质，效果很好。而且该菌对人没有毒性，在产 酶的条件下也不产生真菌毒素和抗生素。

为解决上述第三个技术问题，本发明的技术方案是：

使用发酵复合菌发酵牛、羊粪便制备有机肥的方法，包括以下步骤：

(1)将牛粪便或者羊粪便与稻壳混合，将所述发酵复合菌按照1～2Kg/t 的用量添加进去混合均匀得到混合原料，混合原料的水分为50～65wt％；

(2)将步骤(1)的混合原料码堆成条形肥堆，维持温度为55～65℃开始 发酵，发酵两天后进行第一次翻堆，次后每隔1～2天进行一次翻堆，发酵期间 保持水分含量50～65wt％；

(3)至步骤(2)的发酵堆温度降为常温后，发酵结束，得到含水率为20～ 30wt％的有机肥。

作为一种改进，发酵期间，在条形肥堆上设置多个直径为1.5～2cm的通风 孔。

作为一种优选，所述混合原料中粪便与稻壳的混合重量比为3～5:1～2。

由于采用了上述技术方案，本发明的有益效果是：

本发明的牛、羊粪便发酵复合菌，包含以下重量份数的原料菌种：枯草芽 孢杆菌10～20份，凝结芽孢杆菌10～25份，巨大芽孢杆菌10～20份，绿色木 霉15～25份和里氏木霉10～30份，将枯草芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌、巨大芽 孢杆菌、绿色木霉和里氏木霉的菌种采用合理配比混合，得到牛、羊粪便发酵 复合菌，各菌种复配后经拮抗性试验证明相互之间没有拮抗性，而且，各菌种 之间相互协同，绿色木霉和里氏木霉分泌的纤维素酶活性最高，其次为木聚糖 酶、几丁质酶，枯草芽孢杆菌分泌的淀粉酶活性最高，其次为蛋白酶、脂肪酶， 这三种菌产生的酶系可以将牛(羊)粪便中未被动物利用的大量的纤维素、少 量的蛋白质、淀粉、脂肪、进行彻底分解，转化成植物易吸收利用的小分子物 质。而凝结芽孢杆菌和巨大芽孢杆菌则可以产生各种酸性物质，抑制牛(羊) 粪中致病菌的生长，且巨大芽孢杆菌还有解磷解钾的作用。它们还可以协助土 壤中微生物的增长，预防土壤病害发生，减少连作障碍等问题，以达到土壤改 良的功效。牛(羊)粪便通过这些菌种之间的相互协同作用，最终变成了富含 有机质和有益微生物的生物有机肥。并且在发酵腐熟过程中，发酵物料升温较 快，温度可快速达到60～70度，能有效杀死粪便中的虫卵、草籽等有害物质， 发酵周期短，夏季一般7天左右可发酵完成，冬季20天左右完成，发酵后的粪 便无臭味，含水率为30wt％以下，氮磷钾总养分含量达52g/㎏以上，有机质含 量为40％以上，大肠杆菌值无法检出，寄生虫卵死亡率为97％以上。

本发明用于牛、羊粪便发酵，相比现有技术，生产投资小，生产成本低， 使用方便，无臭味，发酵腐熟效果好。

具体实施方式

下面结合具体的实施例来进一步阐述本发明。

实施例1

一种牛、羊粪便发酵复合菌，包含以下重量份数的原料菌种：

实施例2

一种牛、羊粪便发酵复合菌，包含以下重量份数的原料菌种：

实施例3

一种牛、羊粪便发酵复合菌，包含以下重量份数的原料菌种：

实施例4

将纯化培养的斜面培养基上的枯草芽孢杆菌菌种接种至装有体积比为20％ 的活化培养基的摇瓶中，所述活化培养基的配方为葡萄糖20g/L、蛋白胨13g/L、 氯化钠4g/L和牛肉膏0.7g/L，在培养温度为38℃,摇瓶转速200rpm培养24h；

将活化培养好的枯草芽孢杆菌菌种接种到装有体积比为55％的发酵培养基 的发酵罐内，体积接种量为1.5％，所述发酵培养基的配方为玉米粉12g/L、葡 萄糖4g/L、豆饼粉22g/L、鱼粉4g/L、碳酸钙6g/L、硫酸铵1.2g/L、磷酸氢 二钾0.3g/L、硫酸镁0.15g/L和硫酸锰0.1g/L，在培养温度为38℃,发酵罐搅 拌转速200rpm培养24h，发酵罐中枯草芽孢杆菌含量≥10⁹个/ml，然后将发酵 得到的枯草芽孢杆菌单菌经干燥制备成休眠体微生物干粉。

将纯化培养的斜面培养基上的凝结芽孢杆菌菌种接种至装有体积比为15％ 的活化培养基的摇瓶中，所述活化培养基的配方为葡萄糖12g/L、蛋白胨8g/L、 牛肉膏2g/L和氯化钠4g/L，在培养温度为38℃,摇瓶转速190rpm培养24h；

将活化培养好的凝结芽孢杆菌菌种接种到装有体积比为55％的发酵培养基 的发酵罐内，体积接种量为1％，所述发酵培养基的配方为麸皮23g/L、葡萄糖 13g/L、豆饼粉14g/L、磷酸氢二钾0.15g/L、硫酸镁0.15g/L和氯化钙2g/L， 在培养温度为38℃,发酵罐搅拌转速220rpm培养38h，发酵罐中凝结芽孢杆菌 含量≥10⁹个/ml，然后将发酵得到的凝结芽孢杆菌单菌经干燥制备成休眠体微 生物干粉。

将纯化培养的斜面培养基上的巨大芽孢杆菌菌种接种至装有体积比为30％ 的活化培养基的摇瓶中，所述活化培养基的配方为蛋白胨12g/L、牛肉膏1g/L 和氯化钠3g/L，在培养温度为38℃,摇瓶转速220rpm培养26h；

将活化培养好的巨大芽孢杆菌菌种接种到装有体积比为60％的发酵培养基 的发酵罐内，体积接种量为1.5％，所述发酵培养基的配方为豆饼粉25g/L、玉 米粉15g/L、磷酸氢二钾0.05g/L、磷酸二氢钾0.15g/L和氯化钙4g/L，在培养 温度为38℃,发酵罐搅拌转速200rpm培养28h，发酵罐中巨大芽孢杆菌含量≥ 10⁹个/ml，然后将发酵得到的巨大芽孢杆菌单菌经干燥制备成休眠体微生物干 粉。

将纯化培养的斜面培养基上的绿色木霉菌种接种至装有体积比为30％的活 化培养基的摇瓶中，所述活化培养基为麦芽汁马铃薯蔗糖培养基，在培养温度 为30℃、摇瓶转速160rpm，活化培养36h；

将活化培养好的绿色木霉菌种接种到装有体积比为70％的发酵培养基的发 酵罐内，接种量为体积比1.5％，所述发酵培养基的配方为葡萄糖10g/L、玉米 芯5.5g/L、氯化钙0.4g/L、硫酸镁0.3g/L、磷酸二氢钾18g/L、酵母膏10g/L、 硫酸亚铁4mg/L、硫酸锌1.3mg/L、氯化钴3.5mg/L和硫酸锰1.5mg/L，在培养 温度为28℃,发酵罐搅拌转速180rpm，扩大培养68h，至发酵罐中绿色木霉含 量≥10⁸个/ml，然后将发酵得到的绿色木霉单菌经冷冻干燥制备成休眠体微生 物干粉。

将纯化培养的斜面培养基上的里氏木霉菌种接种至装有体积比为15～30％ 的活化培养基的摇瓶中，所述活化培养基为马铃薯葡萄糖培养基，在培养温度 为28～30℃、摇瓶转速140～180rpm，活化培养32～48h；

将活化培养好的里氏木霉菌种接种到装有体积比为60％的发酵培养基的发 酵罐内，接种量为体积比1.5％，所述发酵培养基的配方为葡萄糖10g/L、酵母 粉9g/L、氯化钙0.5g/L、硫酸镁0.3g/L、磷酸二氢钾20g/L、硫酸亚铁4mg/L、 硫酸锌1.2mg/L、氯化钴3.6mg/L和硫酸锰1.5mg/L，在培养温度为28℃,发酵 罐搅拌转速150rpm，扩大培养72h，至发酵罐中里氏木霉含量≥10⁸个/ml，然 后将发酵得到的里氏木霉单菌经冷冻干燥制备成休眠体微生物干粉。

分别将制备得到的枯草芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、绿色木 霉和里氏木霉的休眠体微生物干粉，按照枯草芽孢杆菌16份、凝结芽孢杆菌 20份、巨大芽孢杆菌16份、绿色木霉18份和里氏木霉18份的重量比，混合 得到所述发酵复合菌。

实施例5

将纯化培养的斜面培养基上的枯草芽孢杆菌菌种接种至装有体积比为25％ 的活化培养基的摇瓶中，所述活化培养基的配方为葡萄糖20g/L、蛋白胨14g/L、 氯化钠5g/L和牛肉膏0.3g/L，在培养温度为38℃,摇瓶转速220rpm培养30h；

将活化培养好的枯草芽孢杆菌菌种接种到装有体积比为60％的发酵培养基 的发酵罐内，体积接种量为2.5％，所述发酵培养基的配方为玉米粉15g/L、葡 萄糖6g/L、豆饼粉21g/L、鱼粉5g/L、碳酸钙6g/L、硫酸铵0.8g/L、磷酸氢 二钾0.5g/L、硫酸镁0.3g/L和硫酸锰0.2g/L，在培养温度为38℃,发酵罐搅 拌转速200rpm培养30h，发酵罐中枯草芽孢杆菌含量≥10⁹个/ml，然后将发酵 得到的枯草芽孢杆菌单菌经干燥制备成休眠体微生物干粉。

将纯化培养的斜面培养基上的凝结芽孢杆菌菌种接种至装有体积比为20％ 的活化培养基的摇瓶中，所述活化培养基的配方为葡萄糖11g/L、蛋白胨10g/L、 牛肉膏3g/L和氯化钠5g/L，在培养温度为38℃,摇瓶转速200rpm培养28h；

将活化培养好的凝结芽孢杆菌菌种接种到装有体积比为60％的发酵培养基 的发酵罐内，体积接种量为1.5％，所述发酵培养基的配方为麸皮22g/L、葡萄 糖13g/L、豆饼粉15g/L、磷酸氢二钾0.1g/L、硫酸镁0.1g/L和氯化钙4g/L， 在培养温度为38℃,发酵罐搅拌转速220rpm培养35h，发酵罐中凝结芽孢杆菌 含量≥10⁹个/ml，然后将发酵得到的凝结芽孢杆菌单菌经干燥制备成休眠体微 生物干粉。

将纯化培养的斜面培养基上的巨大芽孢杆菌菌种接种至装有体积比为25％ 的活化培养基的摇瓶中，所述活化培养基的配方为蛋白胨10g/L、牛肉膏3g/L 和氯化钠4g/L，在培养温度为38℃,摇瓶转速200rpm培养28h；

将活化培养好的巨大芽孢杆菌菌种接种到装有体积比为60％的发酵培养基 的发酵罐内，体积接种量为2％，所述发酵培养基的配方为豆饼粉25g/L、玉米 粉15g/L、磷酸氢二钾0.15g/L、磷酸二氢钾0.15g/L和氯化钙3g/L，在培养温 度为38℃,发酵罐搅拌转速210rpm培养28h，发酵罐中巨大芽孢杆菌含量≥10⁹个/ml，然后将发酵得到的巨大芽孢杆菌单菌经干燥制备成休眠体微生物干粉。

将纯化培养的斜面培养基上的绿色木霉菌种接种至装有体积比为20％的活 化培养基的摇瓶中，所述活化培养基为麦芽汁马铃薯蔗糖培养基，在培养温度 为28℃、摇瓶转速180rpm，活化培养48h；

将活化培养好的绿色木霉菌种接种到装有体积比为60％的发酵培养基的发 酵罐内，接种量为体积比2％，所述发酵培养基的配方为葡萄糖10g/L、玉米芯 6g/L、氯化钙0.2g/L、硫酸镁0.3g/L、磷酸二氢钾20g/L、酵母膏10g/L、硫 酸亚铁6mg/L、硫酸锌1.0mg/L、氯化钴4.0mg/L和硫酸锰1.2mg/L，在培养温 度为30℃,发酵罐搅拌转速160rpm，扩大培养80h，至发酵罐中绿色木霉含量 ≥10⁸个/ml，然后将发酵得到的绿色木霉单菌经冷冻干燥制备成休眠体微生物 干粉。

将纯化培养的斜面培养基上的里氏木霉菌种接种至装有体积比为15～30％ 的活化培养基的摇瓶中，所述活化培养基为马铃薯葡萄糖培养基，在培养温度 为28～30℃、摇瓶转速140～180rpm，活化培养32～48h；

将活化培养好的里氏木霉菌种接种到装有体积比为65％的发酵培养基的发 酵罐内，接种量为体积比2％，所述发酵培养基的配方为葡萄糖11g/L、酵母粉 10g/L、氯化钙0.3g/L、硫酸镁0.3g/L、磷酸二氢钾20g/L、硫酸亚铁6mg/L、 硫酸锌1.3mg/L、氯化钴3.8mg/L和硫酸锰1.5mg/L，在培养温度为30℃,发酵 罐搅拌转速180rpm，扩大培养84h，至发酵罐中里氏木霉含量≥10⁸个/ml，然 后将发酵得到的里氏木霉单菌经冷冻干燥制备成休眠体微生物干粉。

分别将制备得到的枯草芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、绿色木 霉和里氏木霉的休眠体微生物干粉，按照枯草芽孢杆菌12份、凝结芽孢杆菌 15份、巨大芽孢杆菌14份、绿色木霉18份和里氏木霉16份的重量比，混合 得到所述发酵复合菌。

实施例6

分别将枯草芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、绿色木霉和里氏木 霉的菌种进行高密度培养，首先接种至装有体积比为25％的培养基的摇瓶中活 化培养，将培养好的菌种接种到发酵罐内进行发酵扩大培养，将扩大培养得到 的各种单菌脱水干燥，制备成休眠体微生物干粉，然后按照枯草芽孢杆菌20 份、凝结芽孢杆菌24份、巨大芽孢杆菌17份、绿色木霉20份和里氏木霉25 份的重量比，混合得到所述发酵复合菌。

实施例7

(1)将牛粪便与稻壳混合，将实施例2的发酵复合菌按照1Kg/t的用量添 加进去，按照底部一层牛粪、上面洒一层发酵复合菌、发酵复合菌上添加一层 稻壳。稻壳上面再加一层牛粪、上面再洒一层发酵复合菌、发酵复合菌上层再 添加稻壳，最后再添加一层牛粪的方式码堆，然后用翻堆机码堆成条状，混合 均匀得到混合原料，混合原料中粪便与稻壳的混合重量比为3:1，混合原料的 水分为55wt％。

(2)将混合原料码堆成的条形肥堆，维持温度为60～62℃开始发酵，发 酵两天后进行第一次翻堆，次后每隔1天进行一次翻堆，发酵期间保持水分含 量55～58wt％；如果水分含量高，添加适量稻壳来降低水分；发酵期间，在条 形肥堆上用木棍设置多个直径为1.5～2cm的通风孔。

(3)至发酵堆温度降为常温后，发酵结束，得到含水率为24wt％的有机肥， 腐熟的牛粪，其颜色是棕褐色，没有臭味，物料温度接近气温，松散度好；氮 磷钾总养分含量达53g/㎏，pH 7.1，有机质含量为43％，大肠杆菌值无法检出， 寄生虫卵死亡率为97.5％。

实施例8

(1)将羊粪便与稻壳混合，将实施例4制备得到的发酵复合菌按照1.5Kg/t 的用量添加进去，按照底部一层羊粪、上面洒一层发酵复合菌、发酵复合菌上 添加一层稻壳，稻壳上面再加一层羊粪、上面再洒一层发酵复合菌、发酵复合 菌上层再添加稻壳，最后再添加一层羊粪的方式码堆，然后用翻堆机码堆成条 状，混合均匀得到混合原料，混合原料中粪便与稻壳的混合重量比为3.5:1.5， 混合原料的水分为60wt％。

(2)将混合原料码堆成的条形肥堆，维持温度为58～60℃开始发酵，发 酵两天后进行第一次翻堆，次后每隔1.5天进行一次翻堆，发酵期间保持水分 含量58～60wt％；如果水分含量高，添加适量发酵好的物料来降低水分；发酵 期间，在条形肥堆上用木棍设置多个直径为2cm的通风孔。

(3)至发酵堆温度降为常温后，发酵结束，得到含水率为25.2wt％的有机 肥，腐熟的羊粪，其颜色是棕褐色，没有臭味，物料温度接近气温，松散度好； 氮磷钾总养分含量达54.5g/㎏，pH 7.2，有机质含量为43.5％，大肠杆菌值无 法检出，寄生虫卵死亡率为98.2％。