青蒿琥酯与乌司他丁联合治疗胰腺炎的用途

摘要

本发明涉及一种现有抗疟药青蒿琥酯与乌司他丁联合用药，治疗胰腺炎的用途。青蒿琥酯与乌司他丁联合用药治疗急性胰腺炎产生协同作用，增强乌司他丁的疗效，同时可降低乌司他丁用量，也为抗疟疾药青蒿琥酯提供了一种新的治疗用途。

说明书

技术领域

本发明属于医药和药物制剂领域，具体涉及青蒿琥酯与乌司他丁联合治疗急性胰腺炎的用途。 

背景技术

急性胰腺炎(Acute Pancreatitis，AP)是临床常见病，发病率高。由于急性胰腺炎发病急，病情发展快而复杂：可从最初的胰腺组织的局部病变迅速发展成为全身炎症反应综合征(systematic inflammatory response syndrome,SIRS)、脓毒症、脓毒症休克乃至多器官功能衰竭，甚至死亡，治疗非常棘手，虽然临床采用综合疗法进行治疗，但效果并不满意，总体死亡率仍然高达5％～13.6％。 

AP的治疗以内科综合治疗为主，仅2%的患者最终接受外科手术治疗。2013年国际胰腺病学学会强烈推荐的内科治疗措施包括维持水电解质平衡、营养支持等。虽然并未强烈推荐甚至未推荐抗菌药物和减少胰液分泌的药物、抑制多种酶活性的药物，但如减少胰液分泌的奥曲肽、抑制多种酶活性的乌司他丁等仍在临床广泛使用。 

由于炎症贯穿整个急性胰腺炎的病理生理过程，如果SIRS得不到控制，则由于感染因素的出现导致脓毒症、脓毒症休克和MOF，因此针对SIRS的药物的研发和使用受到大家的重视。乌司他丁（ulinastatin）简称“US”，是从健康成年男性新鲜尿液中分离纯化出来的一种糖蛋白，由143个氨基酸组成，相对分子质量约6.7KDa。该糖蛋白由肝脏分泌，为人体内源性抑炎物质，它能够抑制胰蛋白酶、糜蛋白酶和粒细胞弹性蛋白酶等多种蛋白水解酶的活性，通过抑制酶活性达到控制SIRS发生或减轻SIRS严重程度的目的，有文献报道乌司他丁具有一定效果。但 近年来，不断有循证医学结果质疑抑制多种酶活性的药物乌司他丁的疗效，认为乌司他丁并无较其他药物如生长抑素等更好的疗效。此外，由于乌司他丁可引起过敏反应乃至过敏性休克、血液系统、消化系统以及注射部位的不良反应，尤其是注射部位的疼痛或针刺感、血管痛、发红、瘙痒感、皮疹使得病人依从性不佳，因此,乌司他丁在临床上的使用受到一定限制。 

青蒿琥酯(Artesunate)简称“AS”，是青蒿素的衍生物，为有效的抗疟药物。化学名为二氢青蒿素-1,2-α-琥珀酸单酯，分子式为C₁₉O₈H₂₈，分子量384Da，略溶于水，易溶于有机溶剂。其给药途径包括口服、肌肉或静脉注射。 

在进行AS治疗SIRS和脓毒症的体外研究中发现，AS可抑制诱导SIRS和脓毒症发生的重要致病因子内毒素（LPS）和CpG DNA诱导的单核/吞噬细胞的激活，显著减少TNF-α、IL-6等炎症细胞因子的产生，其作用机制与其调控LPS和CpG DNA活化的TLRs信号转导途径有关。在体内试验中发现，青蒿琥酯可显著保护LPS和CpG DNA、热灭活细菌（革兰阴性菌、革兰阳性菌）和活菌（革兰阴性菌、革兰阳性菌）攻击的脓毒症模型动物以及盲肠结扎穿刺法脓毒症模型（cecal ligation perforation,CLP）动物，显著降低模型小鼠体内血清内毒素、血清TNF-α、IL-6等炎症细胞因子的水平。 

本发明人在研究青蒿琥酯治疗SIRS和脓毒症的作用过程中发现，青蒿琥酯与乌司他丁联合治疗急性胰腺炎,具有协同作用，可明显提高青蒿琥酯治疗急性胰腺炎的活性。但是，目前青蒿琥酯与乌司他丁联合治疗急性胰腺炎未见报道。 

我国是青蒿素和其衍生物的主要生产地，由于该药物疗效高、毒性低，WHO已经将青蒿素列为世界治疗疟疾的主要药物，我国正在扩大青 蒿种植和青蒿素生产，因此发现或扩宽青蒿素类衍生物的适应症，将其应用急性胰腺炎疾病的治疗，无疑对提高青蒿素类衍生物的利用、增加其经济价值并改善急性胰腺炎的治疗现状具有重要意义。 

发明内容

本发明的目的在于提供一种将青蒿琥酯与乌司他丁联合治疗胰腺炎的用途，具体涉及青蒿琥酯与乌司他丁联合在制造治疗胰腺炎的药物中的应用。 

在一实施方案中，本发明的青蒿琥酯与乌司他丁联合在制造治疗胰腺炎的药物中的应用。 

在上述实施方案中，本发明的应用,所述联合包括青蒿琥酯与乌司他丁不分次序先后单独给药或青蒿琥酯与乌司他丁同时一并给药。 

在上述实施方案中，本发明的应用，青蒿琥酯与乌司他丁重量比为0.25-2：1。 

在上述实施方案中，本发明的应用，所述急性胰腺炎，其诊断符合以下三个特征中的两个，(1)腹痛符合急性胰腺炎特征，所述急性胰腺炎特征为急性持续严重的上腹部疼痛常向背部放射；（2）血清脂肪酶活性或淀粉酶活性至少大于正常值上限3倍；(3)增强CT、CECT、MRI或腹部超声发现有急性胰腺炎的特征性。 

在上述实施方案中，本发明的应用，优选地，所述急性胰腺炎为感染性或非感染性急性胰腺炎，更优选地，所述非感染性急性胰腺炎是由胆道疾病或酒精所致。 

在上述实施方案中，本发明的应用，所述青蒿琥酯与乌司他丁联合，是以复合包装形式或复方药物组合物形式，所述复合包装或复方药物组合物形式包含青蒿琥酯和乌司他丁。 

本发明另一目的在于提供一种青蒿琥酯复方药物组合物，包含青蒿 琥酯、乌司他丁和药用辅料。 

上述本发明的青蒿琥酯复方药物组合物，青蒿琥酯与乌司他丁的重量比为0.25-2:1。 

上述本发明的青蒿琥酯复方药物组合物，制剂形式可以是口服片剂、胶囊、注射液、冻干粉针等。 

上述本发明的青蒿琥酯复方药物组合物,所述药用辅料包括填充剂、崩解剂、pH调节剂、磷酸缓冲液、注射用水、赋形剂等，这些都是本领域常规药用辅料，其用量也是常规用量。 

本发明再一目的在于提供一种复合包装，该包装中含有青蒿琥酯粉针和乌司他丁冻干或注射液。 

上述复合包装，还包含有5%碳酸氢钠溶液。作为青蒿琥酯粉针的溶剂。 

在上述复合包装中，青蒿琥酯和乌司他丁的重量比为0.25-2:1。 

本发明的青蒿琥酯与乌司他丁联合治疗胰腺炎的用途，青蒿琥酯与乌司他丁可以是两种单独的药剂，也可是含有青蒿琥酯和乌司他丁的复方药物组合物。青蒿琥酯与乌司他丁联合能够产生协同治疗胰腺炎的作用，能够降低急性胰腺炎动物的死亡率，改善胰腺状态。 

青蒿琥酯单独使用可改善急性胰腺炎动物的胰腺病理变化，与乌司他丁联合应用后可明显提高急性胰腺炎动物的治疗效果，减少乌司他丁的使用剂量；实验表明青蒿琥酯与乌司他丁联合应用可明显降低雨蛙素联合LPS致急性胰腺炎小鼠胰腺系数，明显改善胰腺组织的病变情况和降低模型小鼠的血清淀粉酶，以及胰腺组织蛋白酶和脂肪酶活性。 

因此，本发明的青蒿琥酯与乌司他丁联合治疗胰腺炎的用途，特别是治疗急性胰腺炎的用途，拓宽了青蒿琥酯的用途，为急性胰腺炎的治疗提供了新方法，同时，由于二者联用产生协同作用，可减少乌司他丁 的使用剂量,从而降低副作用。 

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步的说明，但所述实施例仅用于理解本发明而不是限制本发明的范围。 

附图说明

图1表示青蒿琥酯协同乌司他丁对雨蛙素联合脂多糖致急性胰腺炎模型小鼠的胰腺组织炎症反应的影响 

图2表示青蒿琥酯协同乌司他丁对雨蛙素联合脂多糖致急性胰腺炎模型小鼠的胰腺组织病理改变的的影响 

具体实施方式

实施例1青蒿琥酯与乌司他丁联用协同作用试验 

首先建立雨蛙素联合脂多糖致急性胰腺炎小鼠模型，观察单独使用青蒿琥酯和青蒿琥酯联合乌司他丁对模型的治疗作用，是否能改善急性胰腺炎模型动物的胰腺炎症反应，降低酶活性。 

青蒿琥酯（AS）与乌司他丁（US）按照表1的质量或质量配比使用，治疗胰腺炎模型小鼠，青蒿琥酯采用肌肉注射方式给药，乌司他丁（每一万单位相当于2.857mg）采用静脉注射方式给药。 

表1青蒿琥酯与乌司他丁的质量比 

研究不同剂量的青蒿琥酯与乌司他丁联合应用，治疗急性胰腺炎的作用效果。 

采用雨蛙素联合LPS(脂多糖)建立急性胰腺炎小鼠模型。实验小鼠制模前禁食12h，不禁水。将132只小鼠，雌雄各半，完全随机方法分成11个组，每组12只。以100μg/kg的雨蛙素，连续6次，每次间隔1h，末次注射LPS（10mg/kg）制备急性胰腺炎小鼠模型。分组为：正常组、模型组、乌司他丁单独治疗组（US组）、四个剂量青蒿琥酯单独治疗组（AS7.5mg/kg组、AS5.0mg/kg组、AS2.5mg/kg组、AS1.5mg/kg组）、青蒿琥酯联合4mg/kg乌司他丁治疗组4组（AS+US组）。建模成功后，立即进行青蒿琥酯治疗或青蒿琥酯联合乌司他丁进行治疗。青蒿琥酯采用肌肉注射给药，并于第一次给药后4h重复肌肉注射；乌司他丁采用静脉注射给药一次。造模后18h，分别对小鼠眼球取血，4℃放置1h，3500r/min、10min、4℃离心，取上清，测定血清淀粉酶；采用颈椎脱臼法处死小鼠，切取胰腺：计算胰腺系数胰、大体病理变化、并测定胰组织脂肪酶和蛋白酶。 

胰腺系数=胰腺湿重(mg)/小鼠体重(g)。 

病理切片按照Rongione病理评分标准进行评分。 

实验结果： 

正常组的胰腺组织呈浅粉色(见图1中A)，模型组小鼠的胰腺组织与周围组织粘连，腺体肿胀，色灰暗，表面可见多处皂化斑点，有较多出血点的表现为严重水肿、血管充血甚至出血(图1中B)；此外，模型组胰腺系数较正常组显著增加(P<0.01,表2)。上述结果说明采用100μg/kg雨蛙素联合脂多糖可成功建立急性水肿型胰腺炎模型。 

不同剂量青蒿琥酯治疗组小鼠胰腺组织血管充血情况有一定减轻、 出血点减少，颜色接近正常对照组(图1中D)，胰腺系数均较模型组有显著降低(P<0.05或P<0.01,表2)；不同剂量青蒿琥酯与乌司他丁联合治疗，组织血管充血不明显，出血点不明显，颜色与正常组相近(图1中E)，胰腺系数均较单用乌司他丁组有显著降低(P<0.01,表2)。 

组织病理学显示，正常组腺泡排列规则，胰腺小叶间隔清晰（图2中A）；而模型组腺体结构紊乱，小叶间隔明显增大，腺体实质内可见大片凝固性坏死并伴有出血，坏死灶及周围有大量炎细胞浸润（图2中B）。青蒿琥酯治疗组胰腺出血、坏死和炎性浸润较模型组呈不同程度减轻，胰腺损伤的组织病理学评分均降低，有显著性差异(P<0.05,图2中D,表2)。各剂量青蒿琥酯与乌司他丁联合治疗，胰腺出血、坏死和炎性浸润较单用青蒿琥酯治疗组有进一步减轻，胰腺损伤的组织病理学评分均降低，均较单用乌司他丁组有显著降低(P<0.01,图2中E,表2)。 

模型组小鼠血清淀粉酶、胰脂肪酶和胰蛋白酶活力增加明显，与正常组比较有非常显著差异（P<0.01,表3）；单用青蒿琥酯治疗组与模型组比较，各剂量组中血清淀粉酶、组织匀浆中脂肪酶和胰蛋白酶的活力都有不同程度的降低（P<0.05或P<0.01，表3）；不同剂量青蒿琥酯与乌司他丁联合治疗与单用乌司他丁组比较，各联合组中血清淀粉酶有显著降低（P<0.01，表3），7.5mg/kg剂量青蒿琥酯与乌司他丁联合治疗组织匀浆中脂肪酶与单用乌司他丁组比较有非常显著差异（P<0.01，表3），其他剂量组有显著差异（P<0.05，表3）；7.5mg/kg和5.0mg/kg剂量青蒿琥酯与乌司他丁联合治疗胰蛋白酶与单用乌司他丁组比较有非常显著差异（P<0.01，表3）。 

表2青蒿琥酯对雨蛙素联合LPS致急性胰腺炎模型小鼠胰腺系数的影响

与模型组相比，′P＜0.05，′′P＜0.01；与正常组比较，#P＜0.05，##P＜0.01，与单用乌司他丁相比，

表3青蒿唬酯对雨蛙素联合LPS致急性胰腺炎模型小鼠酶活性的影响

与模型组相比，′P＜0.05，′′P＜0.01;与正常组比较，#P＜0.05，##P＜0.01，与单用乌司他丁相比，

实施例2复合包装 

青蒿琥酯粉针    2500mg 

乌司他丁冻干    5000万单位 

5%碳酸氢钠溶液   0.6ml 

复合物形式，该包装中包含1瓶乌司他丁冻干剂、1瓶青蒿琥酯粉针剂、1支5%碳酸氢钠溶液。 

制备方法： 

将乌司他丁用800ml注射用水溶解，加入甘露醇50g溶清，加入余下的注射用水，再加入配液量0.05％的针用活性碳，保温30℃搅拌10分钟，过滤脱炭；0.22微米的微孔滤膜精滤；澄明度检查；半成品检验；澄明度检查合格后将药液灌装于无菌玻璃瓶中；置冻干机中冻干：冻干结束，加塞、轧盖即得1000瓶注射用乌司他丁冻干针剂。青蒿琥酯无 菌粉分装到玻璃瓶中，得到25mg/瓶的青蒿琥酯粉针。将制得的乌司他丁冻干针剂和青蒿琥酯粉针各1支装入一包装中，每个包装配1支0.6ml5%碳酸氢钠溶液。