一种获得FSHR多种剪接形式全长编码区序列的方法

摘要

本发明提供的一种获得FSHR多种剪接形式全长编码区序列的方法，提取绵羊颗粒细胞的总RNA，反转录成cDNA；依据绵羊FSHR基因cDNA序列的起始密码子上游和终止密码子下游，设计两对引物：上游引物F1：CAAAAGGGCTCAGTGTGGAG;F2：CGTCTGCAGAAGCAGAAGCA；下游引物R1：CTTATGGATGTGCCAGGGAG;R2：AGTGCTCTGTCAGCTCTTGC；用获得的cDNA为模板，进行PCR扩增FSHR基因,采用天根胶回收试剂盒回收PCR产物；PCR产物加A尾及T载体克隆测序验证；获得的FSHR多种剪接形式完整编码区的序列特征为oFSHR695,oFSHR694,oFSHR648,oFSHR633,oFSHR595。