一种粘虫的生物防治方法

摘要

本发明公开了一种粘虫的生物防治方法。本发明所提供的粘虫的生物防治方法，是用伞裙追寄蝇对粘虫进行生物防治；所述伞裙追寄蝇与所述粘虫的数量比为1：50；温度为25℃；所述伞裙追寄蝇在每头所述粘虫上的产卵数为8-10粒。本发明是利用伞裙追寄蝇防控粘虫进行了较为系统的研究，通过实验室饲养观察发现伞群追寄蝇对控制粘虫种群数量起主要作用。

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域，涉及一种粘虫的生物防治方法。

背景技术

粘虫Mythimna separata Walker，又称行军虫、夜盗虫、五色虫，隶属鳞翅目夜蛾 科行军虫亚科粘虫属,是我国及其它亚洲国家粮食作物的主要害虫之一，是一种迁飞 性害虫，具有突发性、暴发性、区域性集中危害的特点，目前仍在局部地区暴发成灾。 粘虫是一种典型的多食性害虫，危害寄主植物种类广泛，幼虫取食多年生各种禾本科 植物。幼虫主要蚕食叶片，大发生时可在短时间内将大面积作物叶片吃光，只剩下光 秆或仅留底茬。每年在我国南北地区往返迁飞为害，目前仍在局部地区暴发成灾，给 农业生产造成严重损失。粘虫繁殖速度快、短期内暴发成灾，3龄后食量暴增、抗药 性增强等特性，给防治带来了很大的困难。因此，防治粘虫应采取积极的生物防治措 施。生物防治不仅可以减少化学农药对环境的污染，而且可以降低害虫的抗药性。到 目前没有对粘虫的生物防治报道。

伞裙追寄蝇（Exorista civilis Rond.）属双翅目寄蝇科（Diptera:Tachinidae）。国内 报道伞裙追寄蝇主要是用来防治粘虫的一种重要优势寄生性天敌。对伞裙追寄蝇的研 究也只是停留在种类的描述、寄生率、寄生特征及其存活率的调查上。

发明内容

本发明的目的是提供一种粘虫的生物防治方法。

伞裙追寄蝇在防治粘虫中的应用也属于本发明的保护范围。

本发明所提供的粘虫的生物防治方法，是用伞裙追寄蝇对粘虫进行生物防治。

在所述方法中，所述伞裙追寄蝇与所述粘虫的数量比具体为1：50。

在所述方法中，进行生物防治时的温度具体为25℃，空气相对湿度（RH）为 60%-70%。

在所述方法中，进行生物防治时，最好控制所述伞裙追寄蝇在每头所述粘虫上的 产卵数为8-10粒，具体如9粒。

在实际应用中，控制所述伞裙追寄蝇在每头所述粘虫上的产卵数为8-10粒，具体 是通过控制寄生蝇与粘虫的比例实现的。若寄生比例为1:30时，其寄生的卵粒数可达 到8-10粒，可羽化3-4头伞裙追寄蝇，而寄生比例为1:50时，其寄生卵粒数基本为 1-2粒，可以保证出1头伞裙追寄蝇。如果是室内扩繁寄生蝇，选用1:30，而田间控 制的话，为1:50。

在对粘虫进行生物防治时，可通过包括如下步骤的方法对所述伞裙追寄蝇进行滞 育诱导和滞育维持，实现对伞裙追寄蝇发育时间的控制，以便更好的对粘虫进行生物 防治。

（1）将待进行滞育诱导的所述伞裙追寄蝇置于温度17±1℃（如17℃）、光周期 L8:D16至L12:D12（如L8:D16、L10:D14或L12:D12）的条件下进行诱导，使所述伞 裙追寄蝇进入滞育态；

（2）将步骤（1）得到的进入滞育态的所述伞裙追寄蝇转入温度4℃、黑暗的条 件下贮存。

步骤（1）中，所述待进行滞育诱导的伞裙追寄蝇为伞裙追寄蝇的卵；进行所述 诱导的时间为9-12天。

步骤（1）中，光照强度为4000-5000LX；所述条件中的空气相对湿度为60%-70%。

步骤（2）中，所述贮存的时间可为120天以内，最好为60天以内，如30-60天。 所述条件中的光照强度为4000-5000LX；所述条件中的空气相对湿度为60%-80%。

以上对所述伞裙追寄蝇进行滞育诱导或滞育维持时的寄主为粘虫，如5-6龄粘虫。

在本发明所提供的粘虫的生物防治方法中，所述伞裙追寄蝇具体可为待产卵的伞 裙追寄蝇；所述粘虫可为5-6龄粘虫。

本发明所提供的粘虫的生物防治方法，也适用于扩繁伞裙追寄蝇。

本发明是利用伞裙追寄蝇防控粘虫进行了较为系统的研究。通过实验室饲养观察 发现伞群追寄蝇对控制粘虫种群数量起主要作用。

具体实施方式

下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。

下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。

下述实施例实施数据分析时，均利用DPS进行方差分析，差异显著性检验采用 Duncans新复极差法。

下述实施例中，光周期Lx：Dy表示每天光照时长x小时，黑暗时长y小时，x+y=24。

伞群追寄蝇：记载于“相红燕,刘爱萍,高书晶,徐林波,刘长仲.粘虫优势寄生性 天敌—伞裙追寄蝇生物学特性研究[J].草业学报,2013,22(3):92-98”一文中公众可从中 国农业科学院草原研究所获得。

实施例1、用伞裙追寄蝇对粘虫进行生物防治

一、伞裙追寄蝇的实验室饲养

将羽化后的伞裙追寄蝇成虫在240ml的一次性透明水杯中雌雄分开饲养，杯口用 纱网覆盖，纱网上缝有脱脂棉球，并且用15%蜂蜜水浸湿。在室内人工繁殖到6-7代 后，寄蝇的寄生率大为降低，能够寄生的也表现出雌蝇产卵量低、寿命变短、幼虫死 亡率高、发育历期变长、飞行能力下降，其结果是每雌育出的子代蝇数量趋于减少， 且生活力下降，直接影响蝇种的质量和防治效果。通过有效的复壮措施，来提高伞裙 追寄蝇寄生率。主要采用以下2种方法进行复壮：一是引进不同来源的蝇种杂交促进 蝇种复壮，即将第二年从野外采集回来的寄蝇与室内扩繁的寄蝇进行交配，羽化的下 代寄蝇即可复壮；二是采用自然寄主回接促进蝇种复壮，即每年7-9月份从野外采集 粘虫或粘虫的做为供试寄主，伞裙追寄蝇在野外的寄主产卵，羽化的次代寄蝇也可复 壮。

二、粘虫的饲养和复壮

将带有粘虫卵的红色尼龙绳置于铺有滤纸的半径为15cm的玻璃培养皿中，保持 滤纸湿润。粘虫孵化后，用新鲜的小麦叶或玉米叶饲养，待粘虫幼虫为3龄时，移至 半径为12cm的保鲜盒中饲养，湿度控制在50%-60%。每天饲喂2-3次，每天彻底筛 除虫粪一次。粘虫发育速率较快，种群可以快速的增长，饲养方便而且繁育出的寄蝇 量大十分经济。粘虫的卵可在4℃的冷藏箱中保存30天，仍可孵化。

但在实验室繁殖多代后，粘虫也会出现生命力、产量能力等的下降，导致寄生所 得的伞裙追寄蝇的蝇种质量下降。因此在繁殖多代后，采取复壮措施，来提供优质的 寄主。通过引进不同来源的寄主杂交促进粘虫复壮，即将第二年从野外采集回来的粘 虫与室内扩繁的粘虫进行交配，羽化的下代粘虫即可复壮。也可通过饲喂不同的营养， 来进行复壮。室内长期扩繁使用小麦苗饲养，通过饲养玉米叶或者从野外采集的禾本 科植物，也可将粘虫复壮。

三、用伞裙追寄蝇对粘虫进行生物防治

本发明的发明人从接蝇比例、温度、每头粘虫上寄生的伞裙追寄蝇虫卵的数量几 个方面研究了用伞裙追寄蝇对粘虫进行生物防治的效果。具体如下：

1、接蝇比例的确定

取发育到5龄-6龄的粘虫幼虫（寄主），共设6个密度处理，在6个养虫盒（长 ×宽×高，29cm×15cm×15cm）分别放入10头、20头、30头、40头、50头、60头 粘虫幼虫，每个养虫盒各接入1头伞裙追寄蝇雌蝇（已完成交配、健壮且待产卵），给 蝇饲喂15%蜂蜜水，给幼虫饲喂新鲜小麦或玉米叶，将养虫盒置于培养箱内（温度23 ℃，空气相对湿度70%，光周期L：D=14h:10h）。在蝇和寄主接触24h后，将雌蝇从 养虫盒中移出，剩余粘虫幼虫分别饲养至其羽化或死亡。5-8天后，观察并统计平均 被寄生的数量，所述平均被寄生的数量是指体表有伞群追寄蝇卵粒的粘虫数量。

结果如表1所示，从表中可以看出，伞裙追寄蝇对粘虫幼虫的寄生数量随粘虫幼 虫密度的增大而增加，当数量增加到一定水平时，寄生量趋向稳定。即伞裙追寄蝇与 粘虫的最佳比例为1:50合适。

表1伞裙追寄蝇对不同密度粘虫的寄生作用

寄主密度（N） 平均被寄生的数量（Na） 理论寄生量 1/N 1/Na 10 7.2±0.51Ef 7.15 0.100 0.1389 20 12.4±0.93De 12.88 0.050 0.0806 30 17.1±0.68Cd 17.58 0.033 0.0585 40 23.5±1.03Bc 21.49 0.025 0.0426 50 28.1±0.66Aa 24.82 0.020 0.0356 60 24.6±0.86Bb 27.66 0.017 0.0407

注：表中数据（平均值±标准误）经Duncan氏新复极差检验，每行数据后不同 大写字母表示差异极显著（P＜0.01）；不同小写字母表示差异显著（P＜0.05）。

2、温度的确定

取发育到5龄-6龄的粘虫幼虫（寄主），在4个养虫盒（长×宽×高， 29cm×15cm×15cm）各放入50头粘虫幼虫，每个养虫盒各接入1头伞裙追寄蝇雌蝇 （已完成交配、健壮且待产卵），给蝇饲喂15%蜂蜜水，给幼虫饲喂新鲜小麦或玉米 叶，将4个养虫盒分别置于不同温度（15℃、20℃、25℃、30℃）的培养箱内（空气 相对湿度均为70%，光周期均为L：D=14h:10h）。在蝇和寄主接触24h后，将雌蝇从 养虫盒中移出，剩余粘虫幼虫分别饲养至其羽化或死亡。5-8天后，观察并统计寄生 数量，所述寄生数量是指体表有伞群追寄蝇卵粒的粘虫数量。并将所被寄生的粘虫放 入盛有蛭石与泥土的养虫盒中（半径为12cm），此过程仍在每组各自温度的培养箱内 进行，每天喷水保湿并观察伞裙追寄蝇的虫茧数及出蝇数，从而计算羽化率（羽化率= 出蝇数/虫茧数×100%）。

结果如表3所示，可见伞裙追寄蝇在25℃时的羽化率最高，达到64.4%。说明伞 裙追寄蝇在此条件下，对粘虫的控治效果最好。

表3不同温度伞裙追寄蝇的羽化率

温度 寄生数量 出蝇数量 羽化率(%) 15℃ 15.6±0.51Cc 13.4±1.02Cc 26.8±0.02Cc 20℃ 23.6±0.93Bb 22.4±1.36Bb 44.8±0.03Bb 25℃ 33.8±1.24Aa 32.2±1.16Aa 64.4±0.03Aa 30℃ 18.0±0.71Cc 16.2±1.39Cc 32.4±0.03Cc

注：表中数据（平均值±标准误）经Duncan氏新复极差检验，每行数据后不同 大写字母表示差异极显著（P＜0.01）；不同小写字母表示差异显著（P＜0.05）。

3、每头粘虫上寄生的伞裙追寄蝇虫卵数量的确定

取被寄生不同伞裙追寄蝇虫卵数量的粘虫幼虫（5龄-6龄），分别设置每头粘虫上 寄生的伞裙追寄蝇虫卵数量为1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、13、15的12个组。 将每组粘虫幼虫分别放入半径为5.5cm的养虫盒中，并放入湿润的棉花球，保持湿度， 观察并记录每组虫伞裙追寄蝇的羽化情况。

结果如表4所示，随着每头粘虫上寄生的伞裙追寄蝇虫卵数量的增加，出蝇数量 也逐渐增加，但是增加到一定水平时，开始下降。当伞裙追寄蝇在一头粘虫上产8-10 粒卵时，即可孵化3-4头伞裙追寄蝇。在用伞裙追寄蝇对粘虫进行生物防治时，在控 制一头粘虫的同时，可以孵化4-5头伞裙追寄蝇，其优点在于不仅可以降低饲养伞裙 追寄蝇的成本，而且在控制害虫的同时，天敌的种群数量也明显增加，对下一代的粘 虫控制有着良好的效果。

表4每头粘虫上寄生不同数量的伞裙追寄蝇虫卵时伞裙追寄蝇的出蝇数量

寄生数量 出蝇数（头） 1 0.71±0.18e 2 1.43±0.20de 3 1.71±0.26cde 4 2.14±0.26cd 5 2.14±0.34cd 6 2.43±0.29bcd 7 2.57±0.37bc 8 2.71±0.42bc 9 3.86±0.40a 10 3.29±0.52ab 13 2.0±0.31cd 15 1.86±0.34cd

注：表中数据（平均值±标准误）经Duncan氏新复极差检验，每行数据后不同 小写字母表示差异显著（P＜0.05）。

实施例2、伞裙追寄蝇的滞育调控

在对粘虫进行生物防治时，可通过对所述伞裙追寄蝇进行滞育诱导，实现对伞裙 追寄蝇发育时间的控制，以便更好的对粘虫进行生物防治。

下述实施例均采用国际通用的寄生蝇滞育判断标准，基本原理是基于有效积温法 则，当某寄生蝇的某虫态在最短发育历期的三倍时间内仍未完成发育，即认定是进入 滞育状态。更加具体的，本发明中判定伞裙追寄蝇是否进入滞育状态是按照如下方法 确定的：若伞裙追寄蝇“幼虫”这一虫态在最短发育历期的三倍时间（即27天）内仍 未完成发育，即自卵孵化成幼虫时起，在27天内伞裙追寄蝇的幼虫未能进入“蛹”这 一虫态，则认定伞裙追寄蝇进入滞育状态。

一、伞裙追寄蝇的滞育诱导

设置4个不同温度（17℃、21℃、25℃和29℃）和5个不同光周期（L8:D16、L10:D14、 L12:D12、L14:D10、L16:D8），共20个处理，每个处理50头5龄～6龄的粘虫幼虫（寄 主），重复3次。将交尾1d后的伞裙追寄蝇雌蝇和粘虫幼虫一同置于养虫盒（长×宽× 高，29cm×15cm×15cm）中，在养虫盒中铺一层小麦苗或玉米叶，放入不同光周期和 温度处理的人工气候箱中（其中，光照时的光照强度为4000～5000LX、空气相对湿度 为60%-70%），对伞裙追寄蝇进行滞育诱导（滞育诱导自“卵”这一虫态开始），诱导 9-12天。诱导完成后，转入正常的饲养条件，即23℃、L16:D8、RH为60%的光照培 养箱中进行饲养，观察记录各处理组伞裙追寄蝇的滞育情况。

结果如表5，光周期和温度是伞裙追寄蝇滞育诱导的主要环境影响因子。随着温 度的升高，滞育率下降；17℃时滞育率最高，即17℃为最佳滞育温度。

表5室内条件下温度和光周期对伞裙追寄蝇滞育的影响

注：表中数据（平均值±标准误）经Duncan氏新复极差检验，每行数据后不同 大写字母表示差异极显著（P＜0.01）；不同小写字母表示差异显著（P＜0.05）。表中 “蛹数”中的“蛹”为粘虫化蛹，即调查蛹数，因为伞裙追寄蝇是在寄主体内发育， 最后羽化成成虫，故所观察为粘虫蛹。

二、伞裙追寄蝇的保护利用

1、伞裙追寄蝇的羽化率

将化蛹的粘虫（寄生有进入滞育态的伞裙追寄蝇幼虫）放置于盛有潮湿细沙的塑 料容器中，然后将其放入冰箱4±2℃中，于全黑暗条件下保存，每天喷水保湿，维持 空气相对湿度60%-80%。定期将寄生有滞育态伞裙追寄蝇幼虫的粘虫蛹从冰箱中取出 放入温度23±1℃、光周期L16∶D8的培养箱中进行伞裙追寄蝇的羽化，观察并统计 冷藏不同时间后寄生蝇的羽化率。实验共设8个处理（8个冷藏时间，见表6），每个 处理3-5粒寄生有滞育态伞裙追寄蝇幼虫的粘虫蛹。同时以未冷藏处理的寄生有非滞 育态伞裙追寄蝇幼虫的粘虫蛹作为对照（CK）。实验重复5次，结果取平均值。

2、羽化后的伞裙追寄蝇的寿命

将步骤1得到的羽化后的伞裙追寄蝇成蝇放入养虫盒中，每盒引入一对伞裙追寄 蝇（1雌蝇+1雄蝇），以质量分数15%的蜂蜜水作为补充营养，在温度23℃、光周期 L16∶D8的条件下交配24h，然后进行接种，即将交尾1d后的伞裙追寄蝇雌蝇寄生 于粘虫幼虫。重复3次。每对蝇接种50头5-6龄粘虫幼虫供雌蝇寄生，24h后取出雌 雄蝇继续接种，直到雌雄蝇死亡为止。统计伞裙追寄蝇羽化后的成蝇的寿命。

3、结果

发现储存时间越长可显著降低伞裙追寄蝇的羽化率（表6）。未经储存的伞裙追寄 蝇羽化率为85.1%。随着储存时间的推移，伞裙追寄蝇的羽化率明显降低，且在“0-150 天”的不同储存时间的羽化率间存在极显著差异（p＜0.01），雌、雄蝇寿命与对照组 有显著性差异（P>0.05），说明伞裙追寄蝇滞育虫茧低温贮藏30d、60d对其羽化率、 寿命、没有较大影响，因此时间30d或60d可以作为适宜的贮藏时间。因此，长时间 储存伞裙追寄蝇的羽化率显著降低。以上结果表明对伞裙追寄蝇滞育虫茧做短时期储 存30-60d较为适宜。

表6低温贮藏对伞裙追寄蝇的影响

注：表中数据（平均值±标准误）经Duncan氏新复极差检验，每行数据后不同 大写字母表示差异极显著（P＜0.01）；不同小写字母表示差异显著（P＜0.05）。