云南红梨PyMYB基因及其原核表达载体和应用

摘要

本发明公开了一种云南红梨色素合成调控和毛状体发生发育调控蛋白PyMYB基因及其原核表达载体，及原核表达载体的应用；本发明利用RT-PCR技术从云红梨1号红色果皮中克隆PyMYB基因，然后再利用原核表达载体将该基因在大肠杆菌Rosetta(DE3)中进行表达，采用GST凝胶柱纯化法纯化，获得云南红梨PyMYB纯化蛋白，云南红梨PyMYB纯化蛋白用于制备PyMYB特异性抗体和其在PyMYB蛋白表达检测中及免疫沉淀、染色质免疫共沉淀和融合蛋白沉降实验中的应用；本发明中所制备的抗体特异性强，能够准确的检测PyMYB蛋白的亚细胞定位、用于免疫共沉淀实验中验证蛋白互作、高效分离PyMYB蛋白所结合的蛋白和DNA片段及检测其在转基因植物中的表达情况。