一种测定Luc2P系列报告基因细胞系中萤光素酶基因拷贝数的新方法

摘要

本发明涉及一种测定Luc2P系列报告基因细胞系中萤光素酶基因拷贝数的新方法。所述方法基于新型的数字定量PCR技术，设计合成Luc2P系列萤光素酶基因特异的引物、探针，采用优化的PCR反应体系和反应程序，定量检测Luc2P系列萤光素酶报告基因细胞中萤光素酶基因拷贝数，用于评价外源基因修饰的稳定性。本发明针对活性测定用Luc2P系列报告基因细胞系建立了一种快速的萤光素酶基因修饰稳定性评价方法，与传统的外源基因拷贝数检测方法Southern blot和荧光定量PCR相比，新方法实验周期短、操作简便，无需标准品、绝对定量、特异性和重复性好。