一种代谢物-蛋白质相互作用体系筛选和表征方法

摘要

本发明公开了一种基于代谢组学及结构质谱技术的代谢物‑蛋白质相互作用体系筛选和表征方法，通过亲和固载方法将异源表达的带有标签的靶标蛋白进行固定，再将其与代谢物提取物共同孵育，最后将靶标蛋白‑代谢物复合物分离及变性洗脱后进行非靶向代谢组学分析，对比其与对照组(没有固定蛋白的亲和载体)差异，从而筛选出与靶标蛋白具有潜在相互作用的代谢物。继而利用结构质谱对潜在相互作用体系进行直接验证。该结合方法即能够高通量筛选与靶标蛋白具有潜在相互作用代谢物，利用结构质谱的直接表征又能筛除间接表征过程中可能引入的假阳性互作结果。该方法是一种可靠的蛋白质‑代谢物相互作用高通量研究手段。