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快速检测DNA聚合酶3′-5′外切活性或错配的方法和试剂盒

摘要

快速检测DNA聚合酶3'‑5'外切活性或错配的方法和试剂盒。本方法包括:提供一段已知序列的核酸,以及检测引物,其与已知序列的核酸互补配对且3'羟基端的最后一个脱氧核苷酸和待聚合的前两位脱氧核苷酸互不相同;使已知序列的核酸和检测引物杂交,加入待测DNA聚合酶以及带荧光标记的、与待聚合的脱氧核苷酸不同的脱氧核苷酸进行第一次信号收集;加入无外切活性的Taq DNA聚合酶,并且分别加入带荧光标记的第一位待聚合的脱氧核苷酸和带荧光标记的第二位待聚合的脱氧核苷酸,进行第二次信号收集;综合分析第一次信号和第二次信号,判断待测DNA聚合酶是否发生外切或错配。可检测在四种核苷酸单独存在于反应体系时DNA聚合酶3'‑5'外切活性或错配。

著录项

法律信息

  • 法律状态公告日

    法律状态信息

    法律状态

  • 2019-05-14

    实质审查的生效 IPC(主分类):C12Q1/6816 申请日:20171012

    实质审查的生效

  • 2019-04-19

    公开

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