铜铁试剂对菜青虫多酚氧化酶的抑制作用

摘要

以菜青虫 Pieris rapae (L.) 为试材, 冰浴匀浆, 4℃下 6 403 ×g 离心, 取上清液, 经 35%饱和度 (NH4)2SO4 沉淀,Sephadex G-100凝胶过滤柱层析等分离步骤, 获得部分纯化的菜青虫多酚氧化酶制剂。研究不同浓度铜离子及铜铁试剂对该酶的影响, 结果表明: Cu2+在0~0.100 mmol/L范围内对酶活力表现激活作用; 浓度大于0.125 mmol/L时表现抑制作用, 其IC50为0.651±0.022 mmol/L; 铜铁试剂对该酶抑制作用的IC50为0.100±0.012 mmol/L。抑制动力学研究结果表明: 铜铁试剂对该酶表现为可逆抑制效应, 为竞争性抑制类型, 其抑制常数Ki 为0.076±0.013 mmol/L。