Construction of engineered CHO DG44 strains for stable and high production of recombinant proteins

摘要

目前单克隆抗体（mAbs）已经成为世界生物工程制药业的支柱产品。能够大规模生产单克隆抗体的一个重要前提是获得稳定高产细胞株，然而筛选持续稳定表达外源蛋白的重组细胞株是费时费力的过程。研究者需要不断优化表达载体和细胞株筛选方式。本实验室已研制出的流感病毒、肝炎病毒中和抗体需要大量的抗体用于临床前研究，因此需要建立一个高产、稳定的细胞株表达平台。本研究以乙肝嵌合抗体E6F6cAb为模式蛋白，以CHODG44（dhfr-）作为宿主细胞，构建嵌合抗体E6F6cAb稳定高产细胞株，从而建立起稳定细胞株筛选系统，包括质粒构建、潮霉素加压筛选、MTX加压诱导基因扩增、细胞克隆化（单克隆有限稀释法、流式分选法...