Construction of Normalized cDNA Library from Hepatopancreas of Abalone Haliotis diversicolor supertexta Exposure to Tributyltin

摘要

用rdP试剂提取三丁基锡暴露诱导的杂色鲍肝胰腺总rnA,经OlIgOTEX纯化得到MrnA;应用SMArT技术合成双链CdnA,双链特异核酸酶(dSn)进行双链CdnA的均一化,构建了杂色鲍三丁基锡暴露诱导下的均一化CdnA文库。原始文库的库容为4.3x106Cfu/Ml,重组率为97.9%。从文库中随机挑选了3288个克隆进行测序,得到3048个高质量EST序列,其中有370条COnTIgS,2103条SInglETS,unIgEnES共2473条,冗余率为18.86%。以上结果说明该文库质量较好,为进一步筛选相关功能基因打下基础;较低的冗余率说明该文库值得继续使用大规模ESTS测序的方法寻找相关功能基因,并为进一步使用基因芯片技术研究相关功能基因的表达谱提供便利。