Establishment of homogeneous fluorescence resonance immunoassay based on green fluorescent protein

摘要

荧光共振能量转移（FRET）提供了一种独特的能够用于实时测量生物分子之间距离的方法，在1～10nm的空间范围内两个特定荧光团之间的距离或距离变化可以通过FRET技术得以确定，因此获得了广泛的生物学应用。绿色荧光蛋白（GFP）及其一系列突变体能够与目的基因融合而表达GFP融合蛋白，并且具有活体表达和检测的特点。由于其自身的稳定性和优良的光谱性质使之非常适合作为FRET的能量供体或受体，并大大拓展了FRET在包括均相荧光免疫检测在内的应用范围。完整抗体的重链可变区和轻链可变区等小分子抗体片段之间可以发生相互作用，能够与相应抗原发生特异结合，生成免疫复合物。用GFP和荧光淬灭剂分别标记相互作用的小分...