Modification and applications of Taq DNA polymerase

摘要

本论文对TaqDNA聚合酶展开了研究，从TaqDNA聚合酶表达载体出发，对其进行定向改造，分别用于探针检测PCR体系和焦磷酸水解激活的聚合酶反应（PAP）技术，最后制备其抗体达到热启动PCR的目的。 第一章，概述了TaqDNA聚合酶在PCR中的应用，普通TaqDNA聚合酶虽然得到广泛使用，但是仍然存在不足。各个实验室针对TaqDNA聚合酶的不足进行了不同形式的改造，以降低或消除酶的5'→3'核酸外切酶活性，提高酶的续进性、忠实性、特异性和耐热性等。 第二章，我们也通过定点突变和缺失突变的方法在基因水平对TaqDNA聚合酶进行改造，以消除酶的5'→3'核酸外切酶活性和降低TaqDNA聚合酶对...