Determinação de sertralina, venlafaxina e seus metabolitos activos, em sangue e urina, por UPLC-MS/MS.

摘要

Os fármacos antidepressivos são hoje comercializados em grande número evariedade, o que culmina na frequente detecção destes em análises de triagem. A utilização defármacos antidepressivos no tratamento de transtornos mentais apresenta consequênciasadversas para o indivíduo, tanto a nível físico como psicológico do paciente. Estas alteraçõesculminam não raras vezes em comportamentos desviantes ou quadros clínicos graves. Apossibilidade de ocorrerem tais alterações torna fundamental a implementação de métodosanalíticos de determinação de antidepressivos em amostras biológicas, quer em contextoclínico quer no âmbito da toxicologia forense.A sertralina e a venlafaxina são dois fármacos antidepressivos de nova geração,distintos entre si. Estes dois compostos estão entre os mais comercializados não apenas emPortugal,mas também a nível mundial. A necessidade do desenvolvimento e validação de ummétodo analítico para a determinação destas duas substâncias surge devido à significativaprevalência de resultados com concentrações muito elevadas de sertralina ou venlafaxina.Possuindo ambos os compostos metabolitos activos, torna-se pertinente a determinaçãosimultânea destes, pois poderão contribuir terapêuticamente com as suas actividadesfarmacológicas. O direccionamento deste trabalho para a determinação em sangue e urinaassenta, essencialmente, no facto de cada uma destas matrizes ser a mais indicada para certotipo de análises, e por se pretender criar um método que possa ser utilizado para efectuaranálises toxicológicas de amostras reais, quer em contexto clínico quer forense.O método proposto inclui como passo extractivo a extracção em fase sólida, comrecurso a colunas Oasis HLB, tendo sido utilizada uma diluição diferente para cada um dostipos de amostras. O padrão interno escolhido foi o zolpidem-d6. As análises foramefectuadas com recurso a um sistema UPLC-MS/MS, com ionização por electrospray eanálise por triplo quadrupolo. A separação cromatográfica foi efectuada com recurso a umacoluna analítica Acquity UPLC HSS T3. A fase móvel utilizada consistiu numa mistura deacetonitrilo e solução aquosa de ácido fórmico a 0,1%, num gradiente de concentração aolongo da separação cromatográfica e com um fluxo de 0,5 mL/min.RResumoA validação do método incluíu o estudo de diversos parâmetros definidos peloServiço de Química e Toxicologia Forenses da Delegação do Centro (SQTF-DC) doInstituto Nacional de Medicina Legal e Ciências Forenses, Instituto Público (INMLCF, I.P.),nomeadamente a selectividade, eficiência de extracção, linearidade, precisão, efeito matriz,entre outros. O método demonstrou ser selectivo e específico para a determinação desertralina e venlafaxina e seus metabolitos activos em sangue e urina. Foi ainda demonstradoque o método tem um desempenho linear na gama de trabalho compreendida entre 1 e 800ng/mL, não apresentando fenómenos de arrastamento. A extracção evidenciou ser eficiente,tendo sido obtidas recuperações entre 60,9% e 108,0%. Os limites de detecção equantificação determinados são adequados tendo em consideração o âmbito de utilização dométodo, e foram devidamente testados. Os efeitos de matriz foram devidamente estudados equantificados, tendo-se constatado um significativo efeito de supressão iónica para ambas asmatrizes.A fim de testar a aplicabilidade do método proposto, foram analisados nove casosreais, com determinação em amostras de sangue e urina. As concentrações determinadas, nãosendo relevantes do ponto de vista médico-legal, permitiram evidenciar a capacidade dométodo para identificar e quantificar este tipo de substâncias.O método analítico apresentado demonstrou ser eficiente, designadamente ao níveldo tempo de análise, e suficientemente sensível para a detecção, identificação e quantificaçãode sertralina, venlafaxina e os seus metabolitos activos em amostras de sangue e urina. Derealçar, também, que a simplicidade da metodologia proposta torna-o facilmente integrávelna rotina analítica de um laboratório de toxicologia.Palavras-chave: Sertraline; Venlafaxine; Metabolito activo; Sangue; Urina; UPLCMS/MS.