Production and characterisation of glycoside hydrolases from GH3, GH5, GH10, GH11 and GH61 for chemo-enzymatic synthesis of xylo- and mannooligosaccharides

摘要

Produktion og karakterisering af glykosid hydrolaser fro GH3, GH5, GH10, GH11 og GH61 til chemo-enzymatisk syntese af xylo- og mannooligosakkarider Biprodukter fra hydrolyse af plantecellevægge er kilder til oligosakkarider, som potentielt kan fungere som prebiotika ved at stimulere væksten af probiotiske bakterier, og dermed medføre en række sundhedsmæssige fordele for værten. Formålet med dette forskningsprojektet er, at producere nye prebiotika eller biologisk aktive oligosakkarider ved enzymkatalyseret transglykosylering af materialer, der er relateret til, eller stammer fra industrielle biprodukter. Fem forskellige rekombinante glykosidhydrolaser, dvs. en GH3 β-xylosidase, to GH5 β-mannanaser, en GH10 β-xylanase, og en GH11 β-xylanase fra Aspergillus nidulans FGSC A4, blev undersøgt for deres transglykosyleringsaktivitet med det formål at producere xylo- og mannooligosakkarider. Projektet omfatter karakterisering af de producerede enzymer samt cDNA kloning af formodet GH61 endo Produktion og karakterisering af glykosid hydrolaser fro GH3, GH5, GH10, GH11 og GH61 til chemo-enzymatisk syntese af xylo- og mannooligosakkarider Biprodukter fra hydrolyse af plantecellevægge er kilder til oligosakkarider, som potentielt kan fungere som prebiotika ved at stimulere væksten af probiotiske bakterier, og dermed medføre en række sundhedsmæssige fordele for værten. Formålet med dette forskningsprojektet er, at producere nye prebiotika eller biologisk aktive oligosakkarider ved enzymkatalyseret transglykosylering af materialer, der er relateret til, eller stammer fra industrielle biprodukter. Fem forskellige rekombinante glykosidhydrolaser, dvs. en GH3 β-xylosidase, to GH5 β-mannanaser, en GH10 β-xylanase, og en GH11 β-xylanase fra Aspergillus nidulans FGSC A4, blev undersøgt for deres transglykosyleringsaktivitet med det formål at producere xylo- og mannooligosakkarider. Projektet omfatter karakterisering af de producerede enzymer samt cDNA kloning af formodet GH61 endo β-glucanase.