Comparação do desempenho de dois conjuntos comerciais e de dois métodos de extração para a análise de glicocorticóides fecais em jaguatiricas (Leopardus pardalis) submetidas ao desafio com ACTH

摘要

A jaguatirica (Leopardus pardalis) é uma das espécies de felídeos selvagens listadas no CITES e integrantes de planos de conservação que necessariamente envolvem o emprego de técnicas de reprodução assistida. Para isso, é fundamental o desenvolvimento de técnicas práticas, de alta repetibilidade e pouco invasivas, que permitam o estudo da fisiologia reprodutiva animal. Objetivou-se neste experimento comparar e validar os ensaios realizados com os conjuntos comerciais ImmuChem Double Antibody Corticosterone 125I RIE da ICN Biomedicals, Costa Mesa, CA, USA e Coat-a-count Cortisol 125I RIE da DPC, Los Angeles, CA, USA, na mensuração dos metabólitos de glicocorticóides das fezes de jaguatiricas por meio do desafio com ACTH. Para este estudo foram utilizadas amostras fecais de cinco indivíduos que se encontravam no Centro Brasileiro de Felinos Neotropicais, Associação Mata Ciliar, Pedreira, SP, Brasil, sendo que um destes animais foi escolhido como controle negativo. O experimento foi conduzido em um período de nove dias. No dia 0 foi administrada uma dose total de 100 UI IM de ACTH (hormônio adrenocorticotrópico). Imediatamente após a colheita, as amostras de fezes foram conservadas a -20ºC em sacos plásticos identificados e posteriormente os metabólitos hormonais foram extraídos e mensurados utilizando-se os dois conjuntos comerciais. Previamente foi realizado com o conjunto comercial da DPC um teste para comparar dois métodos de extração. Os dados foram analisados utilizando o programa The SAS System for Windows V8. A média ± erro padrão dos valores obtidos pela técnica de Schwarzenberger foi levemente superior à média dos valores obtidos pela técnica de Wasser (103.334,56 ± 19.010,37ng/g de fezes úmidas e 59.223,61 ± 12.725,36ng/g de fezes úmidas, respectivamente; P=0.0657). O conjunto comercial da ICN detectou com maior clareza o aumento das concentrações dos metabólitos de glicocorticóides. Os valores do dia ) 0 e do dia 1 para os conjuntos comerciais DPC e ICN foram respectivamente 66.956,28 ± 36.786,93ng/g de fezes úmidas e 92.991,19 ± 28.555,63ng/g de fezes úmidas; 205.483,32 ± 83.811,32ng/g de fezes úmidas e 814.578,75 ± 292.150,47ng/g fezes úmidas. Para o conjunto comercial da ICN a sensibilidade foi de 7,7ng/mL para 100% B/ Bo (25 ng/mL para 88%B/Bo) e para o conjunto comercial da DPC foi de 0,2ug/dL para 90,95% B/Bo (1ug/dL para 81,27% B/Bo). Confirmou-se, portanto, que a melhor técnica de extração foi a descrita por Schwarzenberger e que o conjunto comercial da ICN Biomedicals teve um melhor desempenho para a quantificação de metabólitos de glicocorticóides em fezes de jaguatiricas