Identifikation signaltransduktionsrelevanter Gene in Melanom-zelllinien durch Entwicklung und Anwendung eines Verfahrens zur Analyse von Daten aus cDNA-Hybridisierungsarrays

摘要

Mit speziell angefertigten cDNA-Makro-Arrays wurden Melanomzelllinien und kulti-vierteMelanozyten auf die transkriptionelle Aktivität von Genen untersucht, welchebekannterweise bei der zellulären Signaltransduktion von Bedeutung sind. ZurAnalyse der daraus erhaltenen Daten wurde das Computer-Programm "GeneFish"geschrieben, welches auch für zukünftige, ähnliche Fragestellungen in anderenSystemen verwendbar ist. Mit Hilfe dieses Programmes wurde gefunden, dass beiADAM-9, ADAM-10, HER3, FAK, SHC und dem IGF-1-Rezeptor die Unterschiededer Expression zwischen Melanomzelllinien und Melanozyten besondersausgeprägt waren. Bei weiteren Genen wurden schwächer ausgeprägte, jedochebenfalls interessante Expressionsmuster beobachtet.Die Rolle von HER3 wurde durch Einführung einer dominant negativ wirkendenMutante von HER3 in Melanomzelllinien weitergehend untersucht. BeiVerwendung eines konstitutiv exprimierenden Expressionssystems starben dietransgenen Zellen, was einem lethalen Effekt der Mutante zugeschrieben wurde.Mit einem induzierbaren Expressionssystem wurden Zellklone erhalten, dieveränderte biologische Eigenschaften aufwiesen, welche jedoch unabhängig vonder Expression des Transgens waren. Trotz dieser technischen Schwierigkeitbleibt HER3 eines der vielversprechendsten Gene für die künftige Forschung anMelanomen.